乳杆菌代谢所产生的抑酵母活性物质的分离纯化

从内蒙古传统乳酸发酵食品中筛选出具有抑酵母作用的乳杆菌,对其代谢产生的抑菌物质进行分离纯化。结果表明:ALAC-3和ALAC-4菌株的代谢产物粗提液通过Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化后,分别得到抑菌活性组分G100-3和G100-5,经过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测均达到电泳纯,相对分子质量分别为80.49 ku和40.32 ku。经过薄层色谱法证明G100-3和G100-5为单一成分的抑菌物质。

乳杆菌产生的抑菌活性物质对酵母细胞膜通透性的影响

以内蒙古地区传统发酵食品中筛选出的两株具有抑酵母菌作用的乳杆菌为研究对象,在酵母菌菌悬液中加入不同质量浓度的抑菌物质粗提液,通过测定不同时间菌悬液中的电导率和可溶性蛋白的变化,从而初步阐明抑菌物质的抑菌机理。结果表明:酵母悬浮液经抑菌物质粗提液处理后,菌液电导率明显增加,说明抑菌物质破坏了酵母菌细胞膜的通透性;可溶性蛋白质量浓度高于对照,进一步说明抑菌物质影响细胞膜通透性,使大分子物质渗漏到细胞外。

乳杆菌代谢产生抑菌物质的特性研究

从内蒙古传统发酵食品中筛选出具有抑酵母作用的乳杆菌,对其特性进行研究。结果表明,ALAC-3和ALAC-4菌株经排酸后,对酵母仍有抑菌效果。活性物质对热有很好的稳定性,并且对紫外线辐射不敏感。Ca2+、Mn2+对ALAC-3代谢产物的抑菌作用起促进作用,而K+、Na+、Mg2+对其代谢产物的抑菌作用起抑制作用。K+,Ca2+,Na+,Mg2+,Mn2+对ALAC-4代谢产物的抑菌作用均起抑制作用。经过氧化氢酶处理后,仍有抑菌效果。经木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶处理后,抑菌活性均有不同程度降低,说明抑菌物质对蛋白酶敏感,故判定抑菌物质中有蛋白类物质。

乳杆菌ALAC-3产抑酵母菌活性物质培养基的优化

从内蒙古传统乳酸发酵食品中筛选出具有较强抑酵母菌作用的一株乳杆菌ALAC-3。从8组适合乳杆菌菌株生长的培养基中筛选出代谢产生抑酵母活性物质的最优培养基,再通过单因素和正交实验,确定培养基中最适宜组分和适宜添加量。结果表明,碳源、氮源对菌株产抑菌物质有显著的影响,最优培养基为:蔗糖25 g/L,蛋白胨∶牛肉膏∶酵母膏(2∶1∶1)20 g/L,K+:Mg2+:Mn2+(10∶3∶1)0.1 mol/L,生长因子乙醇2 m L/L。以此培养基培养ALAC-3,其抑菌圈可达32.68 mm,比培养基优化前(抑菌圈29.91 mm)提高了9.3%。

乳杆菌产生的抑酵母活性物质抑菌机理的研究

以具有抑酵母活性的乳杆菌ALAC-3和ALAC-4为研究对象,以白假丝酵母为指示菌,通过测定抑菌物质粗提液对酵母菌生长曲线、细胞膜通透性、磷代谢和蛋白质表达的影响,从而初步阐明乳杆菌产生的活性物质抑酵母菌的作用机理。研究结果表明:乳杆菌产生的抑酵母活性物质对酵母菌生长曲线、细胞膜通透性、磷代谢和蛋白质表达均有影响,导致酵母菌无法正常进行生长和繁殖,从而产生抑菌作用。且ALAC-4产生的抑菌物质的抑菌性更强。