病理解剖专业青年教师的培养

青年教师是高等院校中最具有生命力和最为活跃的力量,其正处于一个由学生向老师转变的过渡期,可见,对青年教师的培养是医学院校的一项重要工作。病理解剖学课程是医学院校中最重要的学习内容之一,课程专业性强、跨度大、难度大,

病理学精品课程的建设与实践

为了进一步推进我国高等学校教育教学改革工程和人才培养工程，2003年4月教育部在全国各高校开展精品课程建设工作，是促进高校加强教学建设、提高教学质量的一项重措施。我校病理学系根据教育部和学校的求进行了课程建设和教学改革，2004年病理学被评为院级精品课程，2006年获得省级精品课程称号并于2011年顺利通过复审。通过病理学精品课程建设，大大促进了现代教育技术在本学科的应用，显著提高了病理学课程的教学水平，受到学生的热烈欢迎，现将笔者的初步经验和体会报告如下。

免疫组织化学Image Pro Plus图像半定量分析的参数选择

应用ImageProPlus（IPP）图像分析软件测算阳性细胞面积（area）、平均光密度值、积分光密度值，研究面积参数选择、阳性结果选色方式对免疫组织化学结果的影响，以期获得IPP图像分析免疫组织化学的标准化结果。方法：采用人工计数法将矽肺免疫组织化学结果分为低表达、中表达、高表达3组。应用IPP软件，面积选择参数分为过滤10、30、50、100以下的阳性显色；采用吸管取色、RGB、HIS3种选择阳性显色的方法；编写宏文件，计算各组阳性细胞面积、平均光密度值（MD）、积分光密度值（IOD）的均值和总和，并与人工计数法测算结果进行比较。结果：在滤过面积10-100范围内，面积参数对各组阳性细胞面积总和、IOD总和统计结果无影响，与人工计数法结果一致；采用HIS选色测算的面积总和、IOD总和与人工计数法结果一致。结论：IPP图像分析能够简易、快速地进行免疫组织化学结果的半定量分析，面积参数在一定范围内对测算结果无影响，HIS选色方式可能较吸管显色和RGB选色方式好，而IOD总和是比较可靠、稳定的半定量指标。

TGF-β_1介导的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纤维细胞分化中的调节作用

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)介导的RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路在调控肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程中的作用。方法:胰酶消化法获得原代培养的肺成纤维细胞,进行以下实验:(1)观察TGF-β1诱导肺成纤维细胞不同时间后p-RhoA、ROCK、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基(pMBS)、血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型和III型胶原蛋白表达变化;(2)将细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组和Y-27632(ROCK通路阻滞剂)干预组,免疫细胞化学染色与Western blotting法分别观察与检测ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白在细胞内的定位分布与表达。结果:(1)经TGF-β1诱导24 h后,大鼠肺成纤维细胞胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝。随着TGF-β1诱导刺激时间的延长,p-RhoA、ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达逐渐增高,其中RhoA/ROCK信号(p-RhoA、ROCK、p-MBS)、SRF和α-SMA蛋白分别在诱导后6 h、12 h和24 h达到高峰。I型胶原和III型胶原蛋白表达均在24 h达高峰,分别为诱导前的2.19和3.04倍(P<0.05)。(2)与TGF-β1诱导分化组比较,当给予Y-27632干预后,在相应时点ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1通过ROCK信号转导通路的活化,刺激了大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,进而促进了胶原蛋白的合成,可能在(矽)肺纤维化形成过程中发挥着重要作用。

新生鼠肺成纤维细胞原代培养方法的比较与体外肌成纤维细胞分化模型的建立

目的肌成纤维细胞(fibroblasts,FB)是器官纤维化形成过程中关键的靶细胞,以特异表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和细胞基质沉积为特征。文中比较胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB的优缺点,并报道体外肌FB分化模型的建立。方法分别采用胰蛋白酶消化法和组织贴壁法原代培养乳鼠肺FB,倒置相差显微镜观察原代培养,MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学染色法鉴定细胞来源,采用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导FB向肌FB分化。结果采用胰蛋白酶消化法和组织块贴壁法均可以成功原代培养鼠胚肺FB,2种方法无论在形态、细胞增殖水平还是在细胞鉴定方面均无差异,但胰蛋白酶消化法在相同条件下能够快速获得较组织贴壁法更多的细胞,且2种方法获得的FB在4代之内均不表达α-SMA,需经TGF-β1诱导分化为肌FB。随TGF-β1诱导时间的延长,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调。结论胰酶消化法较组织贴壁法能快速、大量获得纯度较高的FB,4代以内的乳鼠FB适合建立肌FB分化模型。

新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1对大鼠肺成纤维细胞增殖和JNK通路的影响

目的探讨新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)对大鼠肺成纤维细胞(FB)增殖和JNK通路的影响。方法体外培养FB,随机分为:对照组、TGF-β1组、空转染组、Prx-1转染组。对照组:以0.4%血清浓度MEM作为基础培养液;TGF-β1组:0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;空转染组:利用脂质体Lipo2000将空载体转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;Prx-1转染组:Prx-1真核表达质粒转染到FB 36 h,给予同步化处理12 h后,在0.4%血清培养条件下,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞。质粒转染采用脂质体转染法;免疫荧光检测质粒转染和8-OhdG(DNA氧化产物)的水平;MTT法检测FB增殖;Western blot检测JNK和Prx-1的表达情况。结果质粒成功转染入FB,转染Prx-1真核表达质粒使Prx-1在FB内蛋白表达水平增高。与对照组比较,TGF-β1组的FB增殖、8-OhdG及磷酸化的JNK表达均明显增加。与TGF-β1组比较,空转染组中的上述观察指标无明显变化,但在Prx-1转染组,这些指标均明显下降。结论 TGF-β1能够诱导FB生成反应性氧物质(ROS),并由此促进JNK的激活和FB增殖,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1诱导的FB增殖。

α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白在大鼠矽肺模型中表达的病理形态学特点及其意义

目的:观察与探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白在大鼠矽肺模型中的表达及其病理学意义.方法:采用非暴露式支气管灌注SiO2制作大鼠矽肺模型,分1、2、4、8周4个时间点进行观察.应用免疫组织化学显色检测CD68、波形蛋白和α-SMA在肺组织中的表达.结果:在正常对照组,α-SMA仅表达于血管和支气管的平滑肌,而在正常肺泡上皮和支气管黏膜上皮中无表达;在矽肺模型组,随着染尘时间的延长,矽肺纤维化程度逐渐加重.波形蛋白在早期染尘肺组织可表达于肺泡的巨噬细胞,并与α-SMA均能够明显表达于矽结节和间质纤维化区域.结论:矽肺形成过程中发生了肌成纤维细胞分化,α-SMA和波形蛋白在矽肺大鼠模型中具有较为特殊的分布与定位特征,并与矽肺纤维化及其病变的形成密切相关.

结肠碰撞瘤1例并文献复习

目的探讨结肠碰撞瘤的组织病理学特点和临床表现。方法对1例含有结肠腺癌与神经内分泌肿瘤成分的碰撞瘤进行HE和免疫组化染色,并复习相关文献。结果肿物位于横结肠,大小4 cm×3 cm×1.2 cm,环管腔呈浸润性生长。镜下肿瘤组织部分呈中分化腺癌,部分呈神经内分泌肿瘤,侵透肌壁达浆膜,累及网膜。免疫组化标记腺癌部分CK20和CK(AE1/AE3)均(+),神经内分泌肿瘤部分Syn和CD56(+),CgA(弱+)。结论含有结肠腺癌与神经内分泌肿瘤成分的碰撞瘤十分罕见,正确认识其临床病理特征可避免误、漏诊。

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对P38分裂原活化蛋白酶通路调节在肺成纤维细胞胶原合成中的作用

目的：探讨N乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）是否通过阻断转化生长因子-β1（TGF-β1）介导的P38分裂原活化蛋白酶（MAPK）途径，进而抑制大鼠肺成纤维细胞增殖与Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。方法：培养新生大鼠肺成纤维细胞，分为对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β受体阻滞剂组、P38MAPK特异性抑制剂组、AcSDKP干预组。采用MTT法检测细胞增殖，免疫细胞化学法检测磷酸化P38蛋白的定位及表达，免疫印迹法检测TGF-β受体、磷酸化P38MAPK、P38MAPK、c-myc及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果：与对照组比较，TGF-β1能够促进细胞增殖，而分别给予LY364947、SB203580和AcSDKP干预后，细胞增殖均受到抑制。与对照组比较，TGF-β1刺激组的TGF-β1受体、磷酸化P38MAPK、c-myc以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达上调，当分别给予LY364947、SB203580和AcSDKP干预后，肺成纤维细胞TGF-β1受体、磷酸化P38MAPK、c-myc以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达均降低。而各组间比较P38MAPK蛋白表达无明显改变。结论：AcSDKP能够通过阻断TGF-β1介导的P38MAPK信号转导途径，进而抑制肺成纤维细胞增殖和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。

降温方法对硫酸软骨素保存的心脏瓣膜的影响

目的观察不同降温方法对含硫酸软骨素的液氮深低温冷冻保存的同种异体心脏瓣膜的组织学结构和细胞活力的影响。方法将32只兔主动脉瓣随机分成4组，每组8只均经灭菌处理。对照组于灭菌后立即行瓣膜细胞活力测定及组织学检查；实验Ⅰ-Ⅲ组分别采用速冻法、阶梯降温法、程序控速降温法将瓣膜保存在含有硫酸软骨素的液氮深低温中1个月，复温后行瓣膜细胞活力测定、光镜及电镜检查。结果三种降温方法下冷冻保存的瓣膜均有损害，与对照组比较，实验Ⅰ组瓣膜组织学结构改变较重，细胞活力下降显著（P〈O．05）；实验Ⅱ组瓣膜组织学结构改变较轻，细胞活力下降显著（P〈O．05），实验Ⅲ组瓣膜组织学结构改变轻微，瓣膜细胞活力下降不明显（P〉O．05）。结论程序控速降温法是目前含硫酸软骨素的液氮深低温冷冻保存同种异体主动脉瓣的最佳降温方法，经此法保存的瓣膜组织学结构损伤轻微，细胞活力佳。

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对大鼠肺成纤维细胞c—Jun氨基末端激酶通路活化的调节作用

目的：探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导通路活化的调节作用.方法：培养新生大鼠肺成纤维细胞.激光扫描共聚焦显微镜观察phospho-JNK在细胞内定位与分布.免疫印迹法检测JNK/phospho-JNK蛋白的表达.结果：激光扫描共聚焦显微镜显示,与对照组比较,TGF-β1刺激后,胞质中phospho-JNK荧光强度变弱,而核浆比值明显增加.经AcSDKP干预作用后,胞质中phospho-JNK的荧光强度较TGF-β1刺激组增强,核浆比值明显减小.免疫印迹法显示,与对照组比较,TGF-β1刺激组phospho-JNK表达明显增加;而AcSDKP干预作用后,phospho-JNK蛋白表达较TGF-β1刺激组明显减少.结论： AcSDKP能阻断TGF-β1介导的肺成纤维细胞JNK通路的活化作用.

肾组织补体C_3沉积与糖尿病肾病病理及临床表现的关系

目的：探讨肾组织补体C3的沉积与糖尿病肾病病理及临床表现之间的关系。方法：回顾性分析我科2003年1月~2013年1月收治的2型糖尿病患者145例,根据病理分型标准对患者进行病理分型,统计不同病理类型补体C3的沉积情况,并以其为依据,分为C3阳性组及C3阴性组,比较两组在病理及临床指标之间的差异,并比较不同病理类型之间补体C3沉积的差异。结果：145例患者中,肾组织C3阳性者共49例（33.8%）,根据C3沉积情况将患者分为C3阳性组及C3阴性组,两组患者在年龄、糖尿病病程、血压、24 h尿蛋白定量、血清补体C3等方面差异无统计学意义（P〉0.05）,在血浆白蛋白、血清肌酐、估算肾小球滤过率方面的差异有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）；随着病理等级的升高,C3沉积率升高,差异有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）。结论：肾组织补体C3的沉积可能加重了糖尿病肾病患者的病理及临床改变。

注重学生“自主学习”能力培养的细胞病理学教学改革探系

河北联合大学基础医学院病理学系在细胞病理学教学中,以重实践能力和创新能力为核心的素质教育改革为培养目标,注重学生"自主学习"能力的培养,在教学设计与实施、PBL(Problem-Based Learn-ing,PBL)教学法的应用、集体备课、理论课与实验课并轨、学生动手操作、改革考试方法等方面进行了初步研究和实践。

新型过氧化物酶peroxiredoxin-1对大鼠肺成纤维细胞JNK介导的Ⅰ和Ⅲ型前胶原合成的影响

目的：探讨活性氧（ROS）在转化生长因子（TGF-β1）激活c-Jun N末端激酶（JNK）促进肺成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型前胶原过程中的作用,并观察新型过氧化物酶peroxiredoxin-1 （Prx-1）是否通过抑制活性氧来抑制TGF-β1促纤维化作用.方法：采用脂质体转染法转染真核质粒;免疫荧光检测质粒转染和8-OHdG（DNA氧化产物）的水平;免疫印迹检测Ⅰ/Ⅲ型前胶原、磷酸化JNK和Prx-1的表达.结果：与对照组比较,TGF-β1组的Ⅰ/Ⅲ型前胶原、8-OHdG及磷酸化p-JNK的表达水平均明显增加.与TGF-p1组比较,空载体组中的上述观察指标无明显变化,但Prx-1转染组的指标均明显下降.结论：TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成活性氧,并由此促进JNK的激活和Ⅰ/Ⅲ型前胶原合成增加,而Prx-1则通过抑制活性氧来抑制TGF-β1的促纤维化作用.

煤炭企业管理中的统计分析应用对策

统计分析是统计工作参与煤炭企业管理最有成效的一种手段。通过对煤炭企业管理中统计分析应用现状的系统分析,找出了影响煤炭企业统计分析工作正常开展的原因,提出了有针对性的煤炭企业管理中的统计分析应用对策。

病理学硕士研究生创新人才培养探索

病理学作为基础与临床医学的桥梁学科，有着它固有的特点和规律。病理学既是研究疾病的病因、发病机制、病理变化和转归的一门医学基础学科，同时又是一门实践性很强的具有临床性质的学科。病理学研究生作为病理学的高级人才应当具备宽广的病理学理论知识、较强的科研能力和较高的临床技能，即科研、教学、临床病理诊断三方面相辅相成，缺一不可，而且研究生毕业后的去向也与这三方面密切相关。然而，现阶段我们的病理学研究生教育的现状却不容乐观。

银行对改善持卡环境的责任

ATM、特约商户、受理网点是当前持卡环境建设的三个重要环节,从根本上影响着银行卡的发展,其中某些问题决定着持卡环境能否实现根本性好转,不能不引起我们的思考。一、ATM的维护及软件开发 1.ATM的维护 (1)ATM维护是一项长期而又复杂、繁琐的工作,对操作人员的专业水平要求很高。

血小板源性生长因子介导的Akt/c-myc信号转导途径在矽肺纤维化形成中的作用

①目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)AKT通路在矽肺纤维化形成中的作用。②方法选用非暴露式气管灌注法复制大鼠矽肺模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周组和8周组),采用免疫组织化学法检测磷酸化AKT、c-myc蛋白的定位与分布情况,免疫印迹法检测肺组织内PDGF、AKT、磷酸化AKT、c-myc以及I型和III型胶原蛋白的表达。③结果与相应的对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内PDGF、磷酸化AKT、c-myc蛋白以及I型和III型胶原蛋白的表达均增加(P<0.05);各组间比较AKT蛋白表达无明显改变。④结论 PDGF介导的AKT及其c-myc促进细胞增殖途径,促进了肺组织间质细胞的增生及其胶原的合成,促进了矽肺纤维化的形成与进展。

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对肺成纤维细胞P38分裂原活化蛋白酶蛋白核转位及其通路活化的调节

目的：观察P38分裂原活化蛋白酶和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在肺成纤维细胞的分布与表达，探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对P38MAPK信号转导通路活化的调节与其抗矽肺纤维化作用的关系。方法：培养新生大鼠肺成纤维细胞，分为对照组、转化生长因子-β1（TGF-131）刺激组、通路抑制剂组和AcSDKP干预组。采用激光扫描共聚焦显微镜检测磷酸化P38在肺成纤维细胞的分布与核转位的情况；免疫印迹检测P38MAPK蛋白以及I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达；MTT法检测细胞增殖情况。结果：与对照组比较，TGF-131诱导刺激了肺成纤维细胞的磷酸化P38MAPK蛋白由胞质向胞核的转位，使胞核中磷酸化P38MAPK蛋白荧光强度增加，核浆比值升高，同时肺成纤维细胞增殖以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达上调。而AcsDKP减少了由TGF-β1诱导刺激的磷酸化P38MAPK蛋白由胞质向胞核的转位，使磷酸化P38MAPK蛋白在胞核的表达减少，核浆比值下降。同时也使细胞增殖下降以及I型、Ⅲ型胶原蛋白的表达下调。这些结果与P38MAPK通路抑制剂具有相同的作用。结论：AcSDKP通过抑制P38MAPK蛋白的核转位阻抑了P38信号转导通路的活化，进而抑制了肺成纤维细胞增殖与胶原蛋白的表达，这可能与AcSDKP抗矽肺纤维化的作用密切相关。

硫氧环蛋白过氧化物酶3对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的影响

目的观察硫氧环蛋白过氧化物酶3(Prdx-3)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大中的作用,并探讨其作用机制。方法体外培养心肌细胞(H9C2)随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+转染对照组和AngⅡ+Prdx-3转染组。脂质体转染法将Prdx-3表达质粒转染心肌细胞,Western blot法检测Prdx-3蛋白表达,Real-time PCR法检测脑钠素(BNP)m RNA表达,二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平。结果 Prdx-3表达质粒转染心肌细胞后,Prdx-3蛋白表达值为(0.88±0.12),高于转染对照组(0.38±0.05),差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,AngⅡ组BNP m RNA[(1.00±0.00)比(1.72±0.29)]、ROS[(3473±81)比(4439±111)]及Prdx-3蛋白表达水平[(0.33±0.05)比(0.72±0.14)]均明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。AngⅡ+转染对照组和AngⅡ组的BNP m RNA[(1.72±0.29)比(1.94±0.34)]、ROS[(4439±111)比(4285±167)]及Prdx-3蛋白水平[(0.72±0.14)比(0.75±0.11)]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+Prdx-3转染组BNP m RNA[(1.72±0.29)比(1.29±0.15)]和ROS水平[(4439±111)比(3648±254)]明显下降,但Prdx-3蛋白水平[(0.72±0.14)比(1.89±0.37)]显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 AngⅡ可通过ROS诱导心肌细胞肥大,而Prdx-3通过降低ROS抑制AngⅡ的作用。