利用CRISPR/Cas9技术构建拟南芥IQM家族基因四突变体

之前,本研究组分别对IQM家族基因的功能进行了研究。不过,由于缺乏相应突变体而未能对该家族多基因同时突变所产生的生长发育改变进行研究。因此,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建IQM家族多基因突变体。分别在IQM家族4个成员的基因组上设计靶点接头,通过同源重组构建成相应小载体sgRNA表达盒:LazAtU3d-AtU3b-AtU3d-AtU3b,并整合成pYLCRISPR/Cas9Pubi-N表达载体后转入拟南芥。经抗生素抗性筛选,共获得70株T0代植株。最后经过编辑靶点测序,得到2个IQM1~IQM4的四突变体株系。