关于阿尔茨海默病的机制研究:Mint2基因在PC12细胞中的表达功能及其作用的初步研究

目的:获得高表达Mint2蛋白的PC12稳定表达株,观察Mint2蛋白对PC12细胞形态的影响,深入研究阿尔茨海默病的发病机制。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达载体pcDNA3.1A-Mint2;采用脂质体lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选稳定克隆;用RT-PCR和Westernblot检测外源基因Mint2在PC12细胞中的转录及表达,并观察Mint2蛋白对PC12细胞形态的影响。结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-Mint2;并获得了稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株;Mint2对PC12细胞具有明显的促分化和促胞体增大的神经营养作用。结论:Mint2可在PC12细胞中有效表达,目对PC12细胞形态有明显影响,这为进一步研究Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础。

胶质细胞源性神经营养因子家族信号转导及其在神经系统中的作用

神经营养因子在神经元的存活、生长、分化、神经再生、突触形成与突触可塑性以及神经退行性疾病的过程中起着重要的作用,对它的研究已成为目前神经科学领域中的重要课题之一。胶质细胞源怀神经营养因子(glialcelllinederiredneurotrophicfactor,GDNF)家族配体包括GDNF,neurturin(NRTN),persephin(PSPN)和ARTNemin(ARTN),它们在结构和功能上有很大的相关性。GDNF家族受体由两类亚基组成,即GDNF受体Alpha亚基(GFRαs)和受体酪氨酸激酶RET亚基。GFRαs亚基又包括各亚型,即GFRα1～4。GDNF家族各营养因子与受体的相互作用、信号转到及其在神经系统中的作用是目前研究的热点。

浓缩污泥中胞外聚合物组分与脱水性的关系

为研究浓缩污泥中胞外聚合物的组分(蛋白质和多糖)对污泥脱水性的影响,对添加和未添加腐殖土的浓缩污泥进行21天的高温(55℃)厌氧消化试验。通过离心和热提取的方法分别提取浓缩污泥中的溶解态胞外聚合物(dissolve-EPS)及结合态胞外聚合物(bound-EPS),并对污泥的溶解态和结合态的胞外聚合物以及脱水性(毛细吸水时间表征)进行跟踪监测。结果表明,高温厌氧消化过程中,污泥毛细吸水时间随时间的增加逐渐增大。统计分析结果表明,污泥毛细吸水时间与溶解态蛋白质和多糖有显著地正相关(0.868,0.959),与结合态蛋白质和多糖有显著地负相关(-0.783,-0.831)。厌氧消化21天后,添加腐殖土的污泥中溶解态多糖比未添加的低7%左右,而溶解态蛋白质、结合态蛋白质和多糖没有明显变化。添加腐殖土的污泥毛细吸水时间比未添加的降低了25%,这表明,污泥中溶解态多糖对污泥的脱水性起主要作用。

腐殖土改善活性污泥沉降与脱水性能的研究

考察了腐殖土对活性污泥沉降和脱水性能的改善效果。结果表明,投加腐殖土可显著改善污泥的沉降和脱水性能,随着腐殖土投量的增加,活性污泥的初沉速度、压缩比、泥饼含固率均明显提高,污泥容积指数(SVI)、污泥比阻(SRF)及毛细吸水时间(CST)均明显降低;当活性污泥浓度为2 300 mg/L、腐殖土的投加量为5.0 g/L时,污泥的初沉速度由原来的1.72 m/h增至3.01m/h,压缩比由原来的2.86增至7.14,SVI由原来的152 mL/g降至61 mL/g;当污泥浓度为7 300mg/L、腐殖土的投加量为5.0 g/L时,污泥比阻由原来的1.33×1012m/kg降至5.7×1011m/kg,CST由原来的20.3 s降至15.7 s,泥饼含固率由原来的13.4%增至33.0%。

腐殖土强化活性污泥工艺的除污效果研究

分别采用腐殖土强化活性污泥系统与普通活性污泥系统处理生活污水,考察了对COD、NH3-N、TN、TP的去除效果。结果表明,腐殖土强化活性污泥系统与普通活性污泥系统对有机物的去除效果差别不大,平均去除率都在86%左右;腐殖土可以强化普通活性污泥系统对营养盐的去除,特别是明显提高了对TP的去除效果,腐殖土强化活性污泥系统对NH3-N、TN和TP的平均去除率分别为71.50%、54.83%和62.67%,比普通活性污泥系统分别高出8.67%、8.16%和33.84%。可见,增加腐殖土反应器是改善普通活性污泥系统脱氮除磷效果的有效方法。

腐殖土对活性污泥中重金属形态分布的影响

分别投加0,0.5,1,2,3和5g腐殖土(HS)于1000mL活性污泥中充分搅拌20d,采用Tessier五步提取法对其中锌、镍、铜、铅元素的形态分布进行分析研究,结果表明,投加腐殖土能明显改变活性污泥中重金属的形态分布.对锌元素,可交换离子态(F1)锌,碳酸盐结合态(F2)锌和铁锰氧化物结合态(F3)锌含量与HS投加量有显著负相关性(0.9266,0.9310,0.9144,置信度P<0.01),硫化物及有机结合态(F4)含量与HS的投加量有显著的正相关性(0.9304,P<0.01);对镍元素,F1镍和F2镍含量与HS的投加量具有显著的负相关性(0.9027,0.9724,P<0.01),F4镍和残渣态(F5)镍含量与HS的投加量具有显著的正相关性(0.9188,0.9123,P<0.01);对铜元素,F2铜含量与HS的投加量呈负相关性(0.7145,P<0.05);对铅元素,F3铅和F4铅含量与HS投加量具有负相关性(0.7027,0.7635,P<0.05),F5铅含量与HS投加量具有正相关性(0.7668,P<0.05).投加腐殖土能明显降低活性污泥中锌,镍元素的潜在迁移能力.

腐殖土强化SBR工艺除磷效果及污泥性能

将普通SBR和腐殖土SBR反应器进行除磷效果对比。结果表明,腐殖土SBR工艺好氧吸磷量、利用单位PHA吸磷量、VFAs吸收速率都比SBR工艺明显提高,腐殖土强化了SBR工艺PAOs优势,提高了PAOs含量,抑制了GAOs的代谢活动,有利于生物除磷。腐殖土还改善了SBR工艺污泥沉降性能,SVI值比普通SBR工艺降低20%以上,VSS/MLSS比值降低8.9%,污泥性能改善是化学和生物共同作用的结果 。

不同污泥龄下腐殖土SBR工艺运行效果

以模拟生活污水培养驯化污泥的小试规模腐殖土SBR工艺为研究对象,进行了污泥龄(SRT)为5、10和15 d时对脱氮除磷的影响研究。结果表明,随着污泥龄的延长,SRT对COD的去除几乎没影响,COD去除率达90%~92%;TN去除率略有下降,但不同SRT下处理效果差别不大;TP的去除率逐渐提高,处理效果很好,出水浓度分别为0.84、0.42和0.37 mg/L。该文试验条件下,以SRT为15 d时系统脱氮除磷效果为最好。结果还表明,聚磷菌厌氧利用单位PHA释磷量及好氧利用单位PHA吸磷量在SRT为10 d时达到最高,5 d次之,15 d最低。但聚磷量/吸磷量比值却是随着SRT延长而增加。聚糖菌利用PHA合成糖原量随着SRT延长逐渐减少。总的来说,聚糖菌在长泥龄中的比例是下降的,聚磷菌仍然占据优势。这有益于解决同步脱氮除磷中有关污泥龄的矛盾,从而有利于腐殖土SBR工艺系统的推广和应用。

P/C比对腐殖土SBR工艺运行效果的影响

以模拟生活污水培养驯化污泥的小试规模腐殖土SBR工艺为研究对象,考察P/C比对腐殖土SBR工艺(HS-SBR)运行效果影响。结果表明,P/C比对COD去除几乎没有影响,整体去除率90%以上,出水浓度30 mg/L以下。NH_4^+-N几乎全部去除,TN去除效果差别也不大,整体出水10~12 mg/L之间。随着P/C比的增加,厌氧释磷量和好氧吸磷量逐渐增加。好氧吸磷量/厌氧释磷量的比值分别为1.14、1.10和1.07。P/C比1.25/100下磷的去除主要是通过微生物的同化作用。结果还表明,污泥含磷量随P/C增加而增加,分别为3%、6%和8%左右;污泥含糖量逐渐减少。通过分析得出活性污泥浓度限制了高P/C比下除磷效果。不同P/C下,SVI处于60~100 mg/L,这主要是腐殖土填料的物理、化学和微生物综合作用,改善了活性污泥的沉降性能。在SRT为15 d,MLSS为2 800 mg/L条件下,腐殖土SBR工艺优于传统活性污泥工艺同样P/C比下运行效果。

腐殖土SBR工艺除污效果和微型动物种群分析

对比研究腐殖土SBR工艺与传统SBR工艺除污效果及微型动物种群动态变化。研究发现,腐殖土SBR工艺提高除磷效果,出水TP平均值为0.44mg/L,去除率为97.07%,而SBR工艺出水TP为2.40mg/L,去除率仅为84.02%。TN去除效果差别不大,腐殖土SBR和SBR工艺分别为62.97%、69.15%。由于腐殖土析出腐植酸,测定UN254值SBR工艺中较高,造成腐殖土SBR工艺COD出水浓度比SBR工艺高10 mg/L。污泥镜检发现,腐殖土SBR工艺活性污泥微型动物数量比SBR工艺略少,可能是腐殖土反应器中培养出了放线菌所致。对微型动物密度与出水水质和污泥指标的相关分析表明,微型动物密度与SVI、SS、TN和COD去除率呈明显负相关。且腐殖土SBR工艺后生动物与SVI相关性比SBR工艺明显。

miR-133b对骨肉瘤细胞MG-63增殖的抑制作用及其机制

目的探讨miR-133b是否通过下调KLF4抑制骨肉瘤细胞系MG-63的增殖。方法将MG-63细胞分为对照组、miR-NC组和miR-133bmimic组,对照组不做干预,miR-NC组转染miR-NC,miR-133bmimic组转染miR-133bmimic。24 h后,Western blotting法检测MG-63细胞中与细胞增殖相关的蛋白p21、p27、PCNA、Ki-67以及KLF4的表达,12、24、48 h后,MTT法观察细胞增殖活力,利用荧光素酶试验验证KLF4是miR-133b的靶基因;将MG-63细胞随机分为miR-133b组、miR-133b+KLF4组、miR-133b+空质粒组,分别转染miR-133bmimic、miR-133bmimic+KLF4过表达质粒、miR-133bmimic+空质粒。检测MG-63细胞中p21、p27、PCNA、Ki-67、KLF4的表达,并观察细胞增殖情况。结果相比于miR-NC组,miR-133bmimic组中,24、48 h MG-63细胞的增殖活力降低(P均<0.01),PCNA、Ki-67、KLF4的表达减少,p21、p27表达增加(P均<0.05或<0.01)。荧光素酶试验结果显示,miR-133b能够显著降低KLF4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.05);相比于miR-133b+空质粒组,miR-133+KLF4组MG-63细胞中PCNA、Ki-67表达增加(P均<0.05),p21、p27表达减少(P均<0.01),细胞增殖率升高(P<0.01)。结论miR-133b通过下调KLF4表达从而抑制骨肉瘤细胞系MG-63的增殖。

骨肉瘤组织miR-133b表达变化及意义

目的探讨微小RNA-133b(miR-133b)在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法收集32例行骨肉瘤切除术患者的骨肉瘤组织及肉瘤旁正常骨组织(简称正常骨组织),采用荧光定量PCR法检测其miR-133b、miR-451、miR-15a、miR-646、miR-218、miR-449a相对表达量,Western blotting法检测细胞增殖相关蛋白(p21、p27、PCNA、Ki67)和Krppel样因子4(KLF-4)蛋白相对表达量。采用Spearman相关分析法分析骨肉瘤组织中miR-133b与KLF4表达之间的关系。结果骨肉瘤组织miR-133b相对表达量低于正常骨组织(P<0.01);两种组织miR-451、miR-15a、miR-646、miR-218、miR-449a相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。骨肉瘤组织p21、p27蛋白相对表达量均低于正常骨组织,PCNA、Ki67、KLF-4蛋白相对表达量均高于正常骨组织(P均<0.01)。Spearman相关分析结果显示,骨肉瘤组织中miR-133b与KLF-4表达呈负相关(r=-0.344,P<0.01)。结论骨肉瘤组织miR-133b表达降低;miR-133b可能通过下调KLF-4表达而参与骨肉瘤的发生、发展。

青藤碱对骨肉瘤细胞增殖的影响及其抑瘤作用观察

目的观察青藤碱对骨肉瘤细胞增殖的影响及其抑瘤作用,探讨其可能的机制。方法 (1)取传至3~7代的人骨肉瘤MG-63细胞,随机分为四组,空白组不予处理,50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200mmol/L青藤碱组分别给予50、100、200 mmol/L青藤碱干预24 h。干预后各组细胞均再培养12、24、36、48 h,采用MTT法检测细胞增殖能力,Western blotting法检测KLF4蛋白相对表达量。(2)采用背部皮下注射MG-63细胞的方法构建骨肉瘤裸鼠模型20只,随机分为青藤碱组和对照组各10只,分别腹腔注射青藤碱20mg/(kg·d)和同等剂量的生理盐水。3周后处死裸鼠取出瘤体,记录瘤体质量、瘤体体积,计算青藤碱抑瘤率;分别采用real-time PCR法、Western blotting法检测两组肿瘤组织KLF4 mRNA和蛋白相对表达量。结果 (1)随培养时间的延长,各组细胞增殖能力均呈逐渐升高趋势。培养36、48 h,空白组、50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200 mmol/L青藤碱组细胞增殖能力依次降低,两两比较P均<0.05。对照组、50 mmol/L青藤碱组、100 mmol/L青藤碱组、200mmol/L青藤碱组KLF4蛋白相对表达量依次降低,两两比较P均<0.05。(2)青藤碱组瘤体质量、瘤体体积均低于对照组(P均<0.05),青藤碱抑瘤率为62.51%;青藤碱组肿瘤组织KLF4 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05)。结论青藤碱可抑制骨肉瘤细胞增殖及骨肉瘤生长,其作用呈浓度依赖性;下调肿瘤细胞或肿瘤组织KLF4表达是其可能的机制。

北方某核电厂温排水消泡设计

在总结和分析现有核电厂温排水消泡措施经验反馈和存在问题基础上,在北方某核电厂温排水消除泡沫设计选择虹吸井溢流优化物理消能消泡,由于物理作用不能从根本上消除泡沫,不能治本;所以还采用了在溢流堰前进行喷头喷洒化学药剂来消除泡沫。采取两种措施后,运行效果稳定,冬季泡沫基本消除。有效解决了温排水泡沫对环境的影响。

某核电厂除盐水站室外区域管道防冻优化设计

某核电厂地处寒冷地区,冬季气温在零度以下,YB区域(除盐水站室外)的设备及管道有上冻风险,在对该核电厂一期工程YB区域管道设计及运行期间防冻问题及经验反馈的基础上,在二期工程提出了两个改进方案,经过综合对比分析,选择了方案二(设置室外管道间,实现管道的集中布置)应用到二期并已实施,此方案可以较好的解决寒冷地区电站该区域的防冻问题,对其他电站该区域的管道设计也具有一定的参考意义。

GDNF家族及其受体在疾病治疗中的研究进展

胶质细胞源性神经营养因子 (glialcellline derivedneurotrophicfactor ,GDNF)对多巴胺能神经元、运动神经元、感觉神经元、肠道神经元等多种神经元均具有促存活及损伤保护作用。GDNF的神经营养作用主要是通过胶质细胞源性神经营养因子受体 α (glialcellline derivedneurotrophicfactorreceptors α ,GFRαs)亚基和受体酪氨酸激酶Ret亚基两类受体亚基介导。GDNF家族配体包括GDNF、neurturin (NRTN) ,persephin (PSPN)和ARTNemin (ARTN) ,它们在结构和功能上有很大的相关性。

Endobutton袢钢板和锁骨钩钢板治疗Tossy Ⅲ型陈旧性肩锁关节脱位

[目的]对比锁骨钩钢板＋喙锁韧带重建和Endobutton袢钢板治疗TossyⅢ型陈旧性肩锁关节脱位的临床疗效。[方法]选取2004年5月~2014年5月本院收治的41例TossyⅢ型陈旧性肩锁关节脱位患者为研究对象,根据治疗方法分为两组,其中锁骨钩钢板＋喙锁韧带重建组（A组）22例,男16例,女6例,平均（35.2±4.5）岁。Endobutton袢钢板组（B组）19例,男15例,女4例,平均（33.8±4.6）岁。分别从手术时间、术中出血量、术后并发症发生率及疗效方面比较两组治疗效果。[结果]所有患者均获随访,时间6~18个月,平均13.7个月。根据Karlsson标准评价肩关节疗效。A组优9例,良11例,差2例;手术时间平均（55.65±15.35）min;术中出血量平均（95.23±20.30）ml;3例术后脂肪液化。B组优16例,良3例,差0例;手术时间平均（57.65±13.28）min;术中出血量平均（93.23±18.40）ml;2例出现切口脂肪液化。两组方法在平均手术时间、术中平均出血量和伤口脂肪液化、感染、血管神经损伤、内固定失效、应力性骨折、肩锁关节再脱位等并发症发生率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。在术后肩关节功能方面差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]锁骨钩钢板＋喙锁韧带重建和Endobutton袢钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位均可获得满意效果,但Endobutton袢钢板不影响肩锁关节,术后肩关节功能恢复更优,近期疗效满意。

腐殖土对污泥沉降和脱水性能的影响及其机理

主要研究了腐殖土对活性污泥脱水和沉降性能的影响机理。结果表明:腐殖土能够改善活性污泥沉降和脱水性能。腐殖土与活性污泥最佳接触时间为3 h。随着接触时间变化,污泥沉降和脱水性能变化与腐殖土析出的一价和二价阳离子M/D比值一致。腐殖土析出阳离子对改善活性污泥沉降和脱水性能起重要作用。二价阳离子Ca^(2+)、Mg^(2+)对于对改善污泥性能起正面促进作用,而污泥沉降性能和脱水性能受一价阳离子K^+、Na^+影响较小。SVI值随腐殖土和等效阳离子投加量增加而显著增加,ZSV也相应增加。而CST值随腐殖土和等效阳离子投加量增加而减少。此外,随着腐殖土投加量增加,污泥索太尔径和体平均径都明显降低,污泥粒径累积分布曲线上各百分比对应的粒径明显降低,污泥絮体结构发生变化,污泥的脱水性能和稳定性能得到改善。