松口蘑发酵菌丝体糖蛋白MTS03对人乳腺癌细胞MCF-7的体外增殖抑制作用研究

目的研究松口蘑发酵菌丝体糖蛋白MTS03的理化性质及抗肿瘤作用。方法采用SDS-PAGE鉴定MTS03的纯度及相对分子质量,氨基酸自动分析仪分析其中的氨基酸组成;MTT法研究糖蛋白MTS03体外对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制率,同时考察MTS03对人正常肝细胞L-02的杀伤率,评价其安全性。结果SDS-PAGE电泳鉴定为单一组分,测定其相对分子质量约为2.37×10~4,经氨基酸自动分析仪分析含有17种氨基酸;MTS03对MCF-7具有直接的细胞毒作用,在一定的浓度范围内呈现量效和时效关系,MTS03对MCF-7作用24,48,72h的IC_(50)分别为25.81,12.46,8.86mg·L^(-1),而对正常肝细胞的IC_(50)分别为1366.49,190.60,95.58mg·L^(-1),对MCF-7的治疗指数TI分别为54.16,18.74,12.25。结论MTS03对于体外培养的乳腺癌细胞具有良好的直接杀伤作用,而对正常肝细胞的毒性较小,可能是一种高效低毒的生物活性物质。

松口蘑发酵菌丝体中抗肿瘤糖蛋白的分离纯化及组成分析

从松口蘑发酵菌丝体中提取得到一种胞内抗肿瘤糖蛋白,经柱色谱纯化得到其主要组分。采用SDS-PAGE法测得其分子量约为26kD,蛋白含量87.49%,糖含量12.51%。组成分析含有17种氨基酸,糖链部分是由5种单糖组成的杂糖链,其组成为阿拉伯糖-木糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖(1.92∶3.38∶15∶2.38∶1,摩尔比)。

松口蘑糖蛋白联合5-Fu体外对人肝癌细胞Bel-7402的影响及作用机理初探

采用MTT法研究了松口蘑抗肿瘤糖蛋白MTS03与化疗药物5-Fu单独及联合使用对人肝癌细胞Bel-7402的影响及对人正常肝细胞L-02的毒性作用,观察不同浓度配比及不同作用时间对细胞是否具有增效减毒的作用;采用扫描电镜观察MTS03作用后的Bel-7402细胞形态.结果表明,MTS03与5-Fu在较低浓度单独使用对肿瘤细胞无显著差异,但两者联合使用增强了对肿瘤细胞的杀伤作用,而对正常细胞的作用较小,联合使用的q值均大于0.85,说明不存在拮抗作用.扫描电镜观察到凋亡小体的形成,随着剂量升高,凋亡小体增多.这一结果说明两者合用后MTS03增加了5-Fu对肝癌细胞的敏感性,同时降低了两者单一高剂量使用时引起的毒副作用,同时MTS03能诱导Bel-7402细胞膜皱缩和凋亡小体的形成.

不同搅拌速度对松口蘑菌丝体发酵的影响

在摇瓶发酵条件优化的基础上,研究了松口蘑在25L搅拌式发酵罐上的分批放大实验,探讨了不同搅拌转速对菌丝生物量、生产强度、pH、溶氧及对菌丝形态的影响,在发酵温度25℃,通风量0.8vvm,罐压0.5kg/cm2的条件下,最佳搅拌转速为100r/min。发酵培养8d后,发酵液由浑浊变为澄清,上清液亮黄色,菌丝形态呈均匀颗粒状,菌丝生物量增加趋于平缓,最高可达11.5g/L。

林檎叶提取物抗氧化及·OH自由基清除作用的研究

分别采用Fenton反应和硫代巴比妥酸法(TBA)测定林檎叶提取物对·OH的清除作用及对动物肝脏匀浆脂质过氧化的抑制作用.结果表明,林檎叶经乙醇提取再经氢氧化钠溶解和乙酸乙酯溶解组分对·OH自由基有较好的清除作用,其清除率达70%以上.两组分同样有较好的脂质过氧化抑制作用.

林檎叶提取成分对小鼠免疫功能的影响

以林檎叶的水提取组(A)、乙醇提取经石油醚萃取后分成的石油醚组(B)和乙醇提取组(C)、C组加HCl溶解后得到的(D)组、酸不溶物经乙酸乙酯溶解经NaOH萃取得NaOH萃取组(E)、乙酸乙酯萃取组(F)及石油醚提取组(G)为受试物,用小鼠免疫器官重量法、小鼠常压耐缺氧实验、小鼠游泳实验、小鼠耐高温、耐低温实验和小鼠碳粒廓清法实验,探讨了林檎叶不同成分对机体免疫功能的影响.结果表明:A组比对照组小鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著增加(P<0.05),C组比对照组胸腺指数有显著的增加(P<0.05);C组浓度增加对胸腺指数有极显著的影响(P<0.01),脾脏指数与对照相比有显著差异(P<0.05);A组廓清指数、吞噬活性均比对照有明显提高(P<0.05);A、C、D与对照组比较能显著延长小鼠耐缺氧时间(P<0.05);C、D、E组比对照组延长小鼠耐低温时间(P<0.05);D组比对照能延长小鼠游泳时间(P<0.01);受试物均无明显提高小鼠的抗高温能力.林檎叶的水提取物和乙醇提取物能明显提高小鼠的免疫功能.

林檎叶中有效成分在小白鼠体内的抑菌作用

为了检验林檎叶中有效成分在人体内的抑菌作用 ,分别将林檎叶用水、乙醇、石油醚浸泡 ,再以上述提取物质对小白鼠进行动物体内抗菌试验 .结果表明 。

林檎叶研究利用进展

综述了林檎叶的分类学、主要化学成分、防霉抑菌及开发利用的现状和前景的研究进展。