基于网络药理学和分子对接探讨续断治疗骨质疏松性骨折作用机制

目的:运用网络药理学及分子对接技术探讨续断治疗骨质疏松性骨折(OPF)的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选续断具有高活性的潜在有效成分,通过GeneCards和OMIM数据库筛选OPF的相关靶标,运用Metascape数据库对OPF相关靶标进行映射,确定续断对OPF的可能靶标。利用Cytoscape软件搭建续断治疗OPF的药物-成分-疾病-靶点网络;通过STRING平台构建蛋白质互作网络;利用David数据库提供的续断相关靶标进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;最后通过分子对接验证核心靶点和续断活性成分的结合能力。结果:续断治疗OPF的主要活性成分主要有龙胆碱(Gentisin)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、谷甾醇(Sitosterol)、(E,E)-3,5-二邻咖啡酰奎宁酸[(E,E)-3,5-Di-O-caffeoylquinic acid]和林生续断苷Ⅲ-qt(SylvestrosideⅢ-qt)等成分,其作用于半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (CASP3)、β2-肾上腺素受体基因(ADRB2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8 (CASP8)、雌激素受体2 (ESR2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 (CASP9)、二肽基肽酶-4 (DPP4)、糖原合成酶激酶3 (GSK3β)、异常凝血酶原(F2)等靶点。续断能够通过参与转录调控和细胞凋亡执行阶段的半胱氨酸型内肽酶、G蛋白偶联胺受体、缩氨酸酶活性等生物过程,调控癌症通路、弓形体病、卡波西肉瘤相关的疱疹病毒感染、乙型肝炎、大肠癌、小细胞肺癌脂质与动脉粥样硬化、雌激素信号通路来发挥治疗OPF的作用。分子对接结果显示,续断的活性成分(E,E)-3,5-二邻咖啡酰奎宁酸、龙胆碱、威岩仙皂苷A_qt、β-谷甾醇与CASP3、ADRB2、CASP8有较好的亲和力。结论:续断可通过直接作用骨代谢相关途径和参与调节上下游多个信号通路对OPF进行治疗,CASP3及癌症通路可能是其治疗OPF的关键靶点及通路。

椎体CT值联合腰椎MRI椎体骨质量评分筛查绝经后女性骨量异常的诊断价值

目的探讨椎体CT值、腰椎MRI椎体骨质量评分(VBQ评分)对绝经后女性骨量异常的诊断价值。方法回顾性分析2018年1月~2022年8月在广州中医药大学附属番禺区中医院骨科收治的210例绝经后女性患者临床资料,根据双能X线骨密度仪的股骨颈T值,将研究对象分为骨量异常组(骨量减少、骨质疏松,n=166)及骨量正常组(n=44),并测量出各组的CT值以及VBQ评分。采用受试者工作特征曲线(receiver operating curve,ROC)计算曲线下面积(area under the curve,AUC),分析筛查方法的诊断价值,确定诊断截断值,同时计算出不同联合方式筛查方法相应的灵敏度、特异度及约登指数。结果单独运用CT值、VBQ评分作为筛查标准时,AUC分别是0.79、0.777,cut-off值分别是116.75 HU、3.24,其约登指数分别是0.520、0.45,具有一定的诊断价值。CT值联合VBQ评分作为筛查标准时,AUC是0.822,灵敏度是75.9%,特异度为75%,约登指数为0.509;CT值与VBQ评分并联(CT值≤116.75 HU或VBQ评分≥3.24)诊断骨量异常时,其灵敏度为95.26%,特异性为49.16%,约登指数为0.444;串联(CT值≤116.75 HU且VBQ评分≥3.24)诊断骨量异常时,其灵敏度为60.73%,特异性为91.73%,约登指数为0.524,具有较高的诊断价值。结论单独或联合运用CT值、VBQ评分对筛查绝经后女性骨量异常均具有一定的诊断价值,可作为筛查绝经后女性骨量异常的补充方法。

左归丸通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗绝经后骨质疏松症的机制研究

目的对左归丸治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制进行研究。方法通过体外实验制备左归丸低、中、高剂量对应的含药血清,对培养的MC3T3-E1进行药物干预,分为空白对照组、成骨诱导组(OGI组)、OGI+左归丸低、中、高浓度组;对培养的MC3T3-E1细胞进行FNDC5转染后成骨诱导,分为空白对照组、OGI+转染组、OGI+转染+左归丸低、中、高浓度组。对上述细胞培养液进行ALP活力检测及染色。在体内实验中将野生型小鼠随机分为野生型对照组、野生型卵巢切除(OVX)组、野生型治疗组,将FNDC5基因敲除(KO)小鼠随机分为KO对照组、KO-OVX组、KO治疗组,采用OVX方式造模,给予治疗组小鼠灌胃左归丸12周。12周灌胃结束后检测各组股骨骨密度(bone mineral density,BMD),HE染色股骨切片,ELISA检测血清E2、PINP、Irisin含量,实时荧光定量PCR检测FNDC5、Runx2、OPN、OCN、OSX mRNA表达,Western Blot检测FNDC5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达。结果左归丸含药血清增加了MC3T3-E1的ALP表达,FNDC5转染后ALP表达下降;左归丸可以显著改善野生型小鼠OVX术后导致的BMD降低及股骨骨小梁损害,缓解E2、PINP、Irisin表达降低,而对于KO小鼠无显著差异;左归丸抑制了OPN的表达,提高了Runx2、OSX、OCN的mRNA表达。对比KO-OVX组,KO治疗组的OPN、Runx2、OSX、OCN等均没有明显差异。左归丸可以上调Wnt3a和β-catenin的表达,当FNDC5被敲除后这种上调效果被显著抑制。结论左归丸可能通过FNDC5/Wnt3a/β-catenin通路治疗PMOP。

腰椎终板形态对经椎间孔腰椎椎间融合术后融合器沉降的影响

目的探讨不同腰椎椎间形态对经椎间孔腰椎椎间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)后融合器沉降发生的影响。方法回顾性分析2019年1月至2021年8月接受单节段TLIF治疗的90例腰椎退行性疾病患者的临床和影像资料。根据影像资料,将患者分为沉降组43例,其中男15例,女28例,平均年龄(53.56±8.2)岁;未沉降组47例,其中男8例,女39例,平均年龄(58.26±13.53)岁。比较两组患者术前、术后、末次随访的影像参数(椎间隙高度、局部前凸角、终板形态参数、骨赘程度等)。再将患者分为无骨赘组46例,其中男15例,女31例,平均年龄(50.43±8.76)岁;骨赘组44例,其中男8例,女36例,平均年龄(61.84±11.18)岁。比较两组患者末次沉降度的差异。结果所有患者顺利完成手术,术后随访12~27个月,平均(14.5±3.6)个月。沉降组的椎体前缘骨赘、终板形态较未沉降组的退变程度更高;沉降组的椎间隙矫正度高于未沉降组;骨赘程度与沉降度呈负相关。以上差异有统计学意义(P<0.05)。结论终板形态不规则、椎间隙过度撑开的患者TLIF术后发生融合器沉降的可能性大;椎体前缘骨赘在维持TLIF术后局部节段稳定、避免融合器沉降方面具有积极意义。

煤矿巷道掘进支护工艺总结研究

随着煤炭资源需求量的不断增大,我国的地下开采量逐渐达到总量的一半以上,随着开采深度的不断深入,对巷道的支护条件提出更高的要求,由于巷道内部受高应力等复杂地质条件的影响,矿井内开采时经常发生支护难的情况,尽管我国煤矿业迅速发展,引进许多先进技术和设备,但仍然存在煤矿巷道支护难或一些潜在的问题,加上我国煤矿企业内部的软岩巷道较多,更加增加了支护的难度,因此要处理好围岩易变性、稳定性差的难题是煤矿井下巷道支护的重点。

椎旁肌退变与短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动的相关性分析

目的:分析椎旁肌退变与短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动的相关性。方法:回顾性分析2018年6月至2020年6月广州市番禺区中医院行短节段腰椎融合内固定术治疗的251例腰椎退行性疾病患者的临床资料,根据术后螺钉松动情况分为松动组(n=47)和对照组(n=204)。收集患者的临床资料,对比两组椎间植骨融合情况、螺钉直径、螺钉长度、螺钉椎内长度、椎旁肌的肌肉相对总横截面积(rt CSA)和脂肪浸润程度(FI)。应用多因素logistic回归分析短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动发生的危险因素,并描绘受试者工作特征(ROC)曲线检验危险因素预测短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动的效能。结果:251例患者平均随访时间(24.16±7.28)个月,其中47例患者在最终随访时发生螺钉松动,总体松动率18.73%。两组性别、骨密度比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,松动组的多裂肌FI增高(P<0.05)。与对照组相比,松动组的竖脊肌rt CSA减少,竖脊肌FI增高(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示竖脊肌FI较高是短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动发生的独立危险因素,而竖脊肌rt CSA较高、骨密度较高则是保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示:骨密度、竖脊肌rt CSA、竖脊肌FI等3指标单独及联合应用时:ROC-AUC(0.95CI)分别为0.708(0.446~0.971)、0.736(0.495~0.951)、0.648(0.335~0.965)、0.842(0.719~0.957)。联合应用预测效能较高。结论:竖脊肌的退变是短节段腰椎融合内固定术后螺钉松动的危险因素。当骨密度<-3.00 g/cm^(2)、竖脊肌rt CSA<1.45%及FI>35.00%时,提示术后发生螺钉松动的可能性大,可作为短节段腰椎融合内固定术后评价螺钉松动风险的参考指标。