人 Orail基因真核表达载体的构建及在足细胞中的表达

目的构建重组人 Orail基因真核表达载体，观察其在小鼠肾小球足细胞株（MPC5）中的表达。方法根据GenBank数据库检索到的人 Orail基因序列，人工合成法合成Orail基因编码区（coding sequence，CDS）全长序列，克隆至质粒表达载体PG-CMV-IRES-EGFP，构建重组质粒载体PC-CMV-Orail，通过PCR、双酶切及基因测序等方法进行鉴定；以脂质体转染法将重组质粒转染至MPC5细胞，应用荧光显微镜观察绿色荧光检测转染效率，RT-PCR、Western blot法分别检测Orail基因的转录与翻译。结果PCR扩增的片段长度为906bp，双酶切出现两条带，其中约906bp处可见目的条带。核酸测序结果与GenBank中所报道的人 Orail基因的CDS序列完全一致。转染后48h置荧光显微镜下观察，85％以上的足细胞中可见绿色荧光。RT-PCR及Western blot实验结果分别显示转染后的MPC5细胞在mRNA与蛋白水平表达Orail均有所增强。结论成功构建了重组人 Orail基因真核表达载体PG-CMV-Orail，并建立了过表达Orail基因的肾小球足细胞模型，为深入研究钙库操纵的Ca2’通道与足细胞病之间的关系奠定了良好的实验基础。

白蛋白过负荷对足细胞骨架蛋白α-actinin-4的影响

目的:观察足细胞损伤及药物干预后细胞骨架蛋白mRNA的变化,以进一步研究足细胞病的发病机制。方法:体外培养条件永生化小鼠足细胞,设立分组:对照组、足细胞损伤组(BSA 20mg/ml)、地塞米松组(地塞米松0.1umol/L+白蛋白20mg/ml),分别于12h、24h、48h检测足细胞内α-actinin4 mRNA表达变化。结果:足细胞损伤组足细胞内α-actinin4 mRNA水平随时间变化逐渐降低,地塞米松组先降低后升高。结论:地塞米松可以改善足细胞损伤后骨架蛋白α-actinin-4的mRNA表达的变化。

义务教育均衡发展与农村教学点的建设研究

目前农村教学点建设存在经费短缺、师资力量薄弱和办学条件差等多种问题,而农村教学点的建设将直接关系到义务教育的均衡发展,所以需要加强教学点的建设。基于此,研究了农村教学点建设对义务教育均衡发展的作用,提出了通过加强农村教学点建设促进义务教育均衡发展的路径。

普米克令舒联合万托林吸入治疗小儿哮喘临床效果及不良反应率评价

目的分析普米克令舒联合万托林吸入治疗小儿哮喘临床效果及不良反应率评价。方法选取我院2017年4月至2018年3月入院治疗小儿哮喘患者96例为研究对象。分为观察组和对照组各48例,两组患者入院后在采取常规治疗的基础上,对照组患者采用普米克令舒治疗,观察组采用普米克令舒联合万托林吸入治疗。在同一治疗时间内对两组临床效果和治疗前后哮喘症状进行比较。结果对照组临床效果,显效10例、有效21例、无效17例,有效率64. 6%;观察组临床效果,显效28例、有效15例、无效5例,有效率89. 6%。对照组治疗前哮喘症状(6. 3±1. 1)分,治疗后哮喘症状(5. 1±2. 1)分;观察组治疗前哮喘症状(6. 7±1. 2)分,治疗后哮喘症状(3. 4±1. 3)分,两组数据之间进行对比,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论普米克令舒联合万托林吸入治疗小儿哮喘,有很好的治疗效果,值得广泛应用。

心肌酶谱变化对热射病患者预后的临床意义

目的探讨心肌酶谱变化在热射病患者预后中的临床意义。方法回顾性分析2010年6月至2021年9月常州市第二人民医院重症监护病房(ICU)住院的热射病患者163例,根据30 d临床结局分为存活组(n=131)和死亡组(n=32)。收集患者入院24 h内的心肌酶谱,多因素Logistic回归分析筛选热射病30 d死亡危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估心肌酶谱对热射病患者30 d死亡的预测价值。联合预测模型的对比采用净重新分类指数(NRI)和综合判别指数(IDI),临床决策(DCA)曲线和校准曲线评价模型优劣。结果死亡组患者肌钙蛋白Ⅰ(TnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)均明显高于存活组患者(P<0.05)。校正混杂因素后的多因素Logistic回归分析显示,TnI、CK-MB、AST、ALT和LDH均为患者死亡的独立危险因素。ROC曲线和DCA曲线分析显示,TnI、CK-MB和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)三者的联合预测效能(AUC=0.873)优于TnI和CK-MB两者的联合预测效能(AUC=0.817),NRI和IDI显示,两个模型的预测效能差异有统计学意义(P<0.05)。校准曲线显示,TnI、CK-MB和APACHEⅡ评分三者的联合预测具有良好的准确度。结论心肌酶谱增高是热射病患者死亡的高危因素,对30 d死亡具有预测价值,联合APACHEⅡ评分有更大的预测效能。

中性粒细胞与淋巴细胞比值对重症中暑患者预后的预测价值

目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)对重症中暑患者预后的预测价值。方法回顾性分析2013年6月至2019年9月在常州市第二人民医院ICU住院的重症中暑患者,根据患者30 d存活情况分组。记录患者的基础资料,分析入院24 h内血常规、肝肾功能、肌钙蛋白、脑钠肽、心肌酶谱、凝血常规和急性生理与慢性健康(acute physiology and chronic health evaluation,APACHE)Ⅱ。多因素COX回归分析筛选重症中暑30 d死亡风险因素。Spearman相关性检验分析NLR与APACHEⅡ评分的相关性关系。绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)评估NLR对重症中暑患者30 d死亡的预测价值。Kaplan-Meier生存曲线分析高风险患者30 d累积生存率。结果共纳入重症中暑患者115例,根据预后分为存活组(n=92)和死亡组(n=23)。死亡组患者NLR明显高于存活组患者(P<0.05)。调整混杂因素后的多因素COX回归分析显示NLR(HR=1.091,95%CI:1.049~1.136,P<0.001)为患者死亡的独立危险因素。Spearman相关性检验分析显示NLR与APACHEⅡ评分具有相关关系(r=0.655,P<0.001)。ROC曲线分析显示,NLR对死亡的预测价值最大,ROC曲线下面积(AUC)0.787,敏感度82.6%,特异度67.4%,截断值7.35。Kaplan-Meier生存分析曲线显示,低于NLR截断值组患者30 d存活率明显优于高于NLR截断值组患者(P<0.001)。结论NLR增高是重症中暑患者死亡的高危因素,对30 d死亡风险具有预测价值。