高压二氧化碳对人冠状病毒(hCoV-229E)的消杀效果

目的:探究高压二氧化碳(HPCD)对人冠状病毒229E(hCoV-229E)的消杀效果。方法:采用HPCD在不同温度(10、25、37℃)、压力(6.3、10 MPa)和时间(15、30 min)条件下,对hCoV-229E进行消杀处理。结果:与不加压相同温度处理的对照组相比,HPCD在10℃、6.3 MPa条件下对50 mL离心管中的病毒液处理30 min后,病毒滴度显著降低(P<0.05);在37℃、10 MPa条件下对50 mL离心管中的病毒液处理15 min后,病毒滴度极显著降低(P<0.01);在37℃、10 MPa条件下对表面含有病毒的三文鱼肉、虾壳、聚乙烯类包装材料处理15 min,病毒滴度显著降低(P<0.05)。结论:HPCD在37℃、10 MPa条件下处理15 min,可以有效消杀食品(三文鱼肉和虾壳)及聚乙烯类包装材料表面的hCoV-229E。

野生动物在猴痘病毒传播中的作用

野生动物能够携带许多病原体,并且还可作为中间宿主通过跨种传播将病原体传播给人类或家畜。如新型冠状病毒肺炎(COVID-19)大流行给人类健康带来巨大威胁。与此同时,野生动物日益受到人们的关注,猴痘病毒(MPXV)是一种从野生动物溢出到人体内的一种人兽共患病原体,能引起人类和动物的严重疾病。到目前为止,猴痘已在70多个国家和地区蔓延,然而,猴痘是如何扩散的,野生动物在其中又扮演着怎样的角色目前尚不清楚。本文主要对野生动物在MPXV传播链中的作用进行阐述,以期为MPXV的监测防控提供科学依据,防止MPXV输入我国。

生长因子Progranulin的结合受体和生物学功能

生长因子颗粒素蛋白前体(progranulin,PGRN)广泛存在于动物和植物组织中.研究证明,哺乳动物的PGRN是一个多功能分子,在组织/器官发育、细胞分化、肿瘤发生发展、炎症应答以及神经退行性疾病中均具有重要的作用.PGRN发挥生物学功能需要和多种结合蛋白相互结合,例如sortilin、Toll样受体9(TLR9)、肿瘤坏死因子受体(TNFR)及分泌性淋巴细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)等.本文将对PGRN的结合受体和生物学功能进行综述.

猪圆环病毒Ⅱ型特异抗体检测间接ELISA法的建立

利用巴斯德毕赤酵母表达的猪圆环病毒2型株Cap蛋白为包被抗原,成功地建立了一种检测血清中PCV-2特异抗体的间接ELISA方法.确定了血清样品阴、阳性判定标准.临床检测结果表明,自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性.

细胞自噬在结核分枝杆菌感染中的作用

结核病是严重危害人类健康的一种感染性疾病,其主要病原体是抗酸性棒状结核分枝杆菌。1998年世界卫生组织（WHO）的统计结果表明,全世界约有1/3的人口受到结核杆菌的潜在感染[1]。尽管只有一小部分的潜伏感染人口会发展成结核病,这仍然意味着每年将增加800万结核病例和导致大约150万结核病人死亡。结核病是死亡率排在第二的传染性疾病。

巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展

巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是基因工程研究中广泛使用的真核表达系统,对Pichia pastoris基因结构、载体元件以及影响外源基因表达的因素等进行了较为全面的综述.

猪白细胞介素2基因的克隆和酵母表达

以伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导的猪外周血淋巴细胞中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出约500 bp的DNA片段,对阳性克隆进行测序与分析。结果:所克隆的基因与GenBank上公布的猪白细胞介素2(PoIL-2)基因的同源性为100%,表明试验成功获得了PoIL-2基因的全序列克隆;以该重组质粒为模板进行PCR,扩增出PoIL-2成熟蛋白的基因片段,连接真核表达载体pPICZαA,成功地构建了重组PoIL-2成熟蛋白基因的真核表达载体pPICZαA-PoIL-2;电转化pPICZαA-PoIL-2于巴斯德毕赤酵母X-33,诱导表达后进行表达产物的SDS-PAGE鉴定,结果表明试验成功地建立了重组PoIL-2的酵母表达系统。

基质金属蛋白酶ADAMTS的病理学功能

ADAMTS蛋白酶是含有TSP基序的分泌性多结构域蛋白水解酶.ADAMTS蛋白酶通过降解细胞外基质而发挥其病理学作用,包括细胞外基质的组装和降解、止血过程、器官生成、肿瘤和遗传性疾病等.本文将结合笔者的研究工作,重点讨论ADAMTS蛋白酶在肿瘤和遗传性疾病中的作用.

奶牛混合感染附红细胞体的诊断与分析

奶牛附红细胞体病多为混合感染.通过对宁夏某奶牛场送检的发病犊牛的各种脏器组织及粪样进行病原体的分离培养、分离菌的药敏试验等检测,并对发病犊牛和同群犊牛的血样进行附红体检测.结果表明,该场发病犊牛存在附红细胞体、致病性大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌和链球菌的混合感染,且附红细胞体感染为主要发病原因;未发病的犊牛存在着附红细胞体隐性感染.对发病犊牛使用血虫净(贝尼尔)进行治疗的同时,使用氧氟沙星全身给药,病牛发生明显好转.

葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠肠炎中骨质丢失的分析

建立小鼠葡聚糖硫酸钠肠炎(DSS)模型,并分析肠炎小鼠中骨质丢失的发生情况.C57BL/6小鼠口服DSS溶液2周以建立肠炎模型,第1周饮用2%DSS溶液,第2周饮用1%DSS溶液.饮用蒸馏水的C57BL/6小鼠作为对照.记录每组小鼠体质量变化,观察粪便和血便状况,μCT分析股骨骨质丢失的情况.结果表明DSS处理组小鼠和对照组相比,出现了明显的骨质丢失,骨量减少,骨小梁数目下降.说明DSS诱导的小鼠肠炎模型可以作为研究肠炎引发骨质丢失的良好模型.

含LoxP位点和EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建

提取鸭瘟病毒(DPV)疫苗株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的DPV UL区UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失468个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得了pSKLR;再将含2个LoxP位点的表达绿色荧光蛋白的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLR-EGEP-LoxP.大量提取pSKLR-EGEP-LoxP质粒,用脂质体转染鸭胚成纤维细胞,24 h后蛋白被正确表达,表明含LoxP位点的表达EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失的重组转移载体被成功构建.

cGAS介导牛分枝杆菌诱导小鼠髓源树突状细胞成熟

旨在深入研究小鼠髓源树突状细胞(BMDC)感染牛分枝杆菌(M.bovis)后环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶(cGAS)的调控作用。通过体外诱导C57BL/6骨髓细胞分化为树突状细胞,建立牛分枝杆菌感染模型,运用siRNA技术沉默cGAS基因的表达,分别设置对照组、感染组、沉默组。通过流式细胞仪检测BMDC表型变化,Western blot和免疫荧光技术检测cGAS信号通路中STING、TBK1、p-TBK1及IRF3的表达情况,ELISA检测细胞上清液中细胞因子分泌水平。结果表明,牛分枝杆菌可刺激BMDC引起细胞表面标志物CD86、CD80、CD40、MHC-Ⅱ表达升高,相关细胞因子IFN-β、TNF-α、IL-12p70、IL-6分泌量提高,BMDC的抗原提呈能力增强。同时cGAS信号通路被激活,下游STING、p-TBK1、IRF3蛋白活化,而沉默cGAS基因后相关指标均显著下调。这表明牛分枝杆菌感染BMDC可激活cGAS信号通路,且cGAS有助于BMDC的成熟和活化。

多元结合教学模式在家畜内科学教学中的探索与应用

家畜内科学是研究动物非传染性内部器官疾病、营养代谢性疾病和中毒性疾病为主要内容的一门综合性临床学科,是动物医学专业本科课程中一门专业理论和实践综合程度较高的临床基础课。针对家畜内科学课程教学中存在的问题,对传统教学模式进行改革和创新,将LBL、PBL、CBL、雨课堂等多元教学模式整合到家畜内科学教学中并进行探索和实践,以期促进学生深度参与课堂,从根本上提升该课程的教学效果。

“学业+执业”教育教学模式在兽医临床诊断学中的应用与实践

兽医临床诊断学是动物医学专业的一门专业基础课,它是以各种畜禽为对象,研究诊查、判断畜禽疾病的基本方法和理论的学科。结合目前理论教学和实践教学现状,在优化课程体系和提高学生实践动手能力的基础上,探索适应于现代科学技术和畜牧业生产发展需求的"学业+执业"的兽医临床诊断学教育教学改革,以期实现大学生在校期间既完成学业,又提升执业能力的创新培养模式。

CD4^+CD25- CD45RB^(high) T细胞转移性肠炎模型的建立

目的建立CD4+CD25-CD45RBhighT细胞转移性肠炎模型,并分析其在炎性肠病中的研究价值。方法流式细胞仪分选和纯化CD4+CD25-CD45RBhighT细胞并通过静脉注射移植到Rag1-/-小鼠,记录每组小鼠体质量变化,根据标准程序制作结肠组织切片进行HE染色检查,分离肠黏膜固有层CD4+T细胞并采用ELISA方法检测TNF-α和IFN-γ的表达水平。结果 CD4+CD25-CD45RBhighT细胞重建Rag1-/-小鼠3周后出现体质量下降,至第6周时体质量下降更加急剧并伴有明显腹泻。结肠组织切片结果发现明显的炎性细胞浸润,结肠上皮出现局灶性溃疡,炎症进一步蔓延至黏膜下层。结肠黏膜固有层CD4+T细胞TNF-α和IFN-γ的表达水平明显高于对照组。结论CD4+CD25-CD45RBhighT细胞转移性肠炎模型在研究炎性肠病的发病机制中具有重要作用。

国家自然科学基金委员会兽医学科流感项目的资助分析

本文对1995年～2017年间国家自然科学基金委员会(National Natural Science Foundation of China,NSFC)兽医学科资助流感病毒研究项目的相关情况进行分析。结果显示,兽医学科资助流感病毒研究经费总计8081万元,资助项目总数132项,其中面上项目59项、青年科学基金项目58项、地区科学基金项目2项、优秀青年科学基金项目2项、国家杰出青年科学基金项目2项、重点项目3项、重大项目1项、创新研究群体科学基金1项和专项基金项目4项。在该学科的8个分支领域中,兽医传染病领域的项目数和经费最多,分别占总数的78%和81.4%。项目研究内容涵盖了流感病毒遗传与变异、跨种传播机制、致病与免疫机理、重要蛋白的结构与功能以及病毒与宿主互作等。通过项目资助,打造了一支强有力的动物流感特别是禽流感病毒研究队伍,攻克了动物流感病毒研究领域诸多难题,大大提高了国际影响力,研究成果发表在Nature、Science、Lancet、PNAS等国际权威期刊,达到了项目资助的预期目的,并为该学科其他项目的资助提供了启示与借鉴作用。

A型流感病毒非结构蛋白NS1主要功能的研究进展

A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是一种具有包膜的、基因组分节段的负链RNA病毒,基因组大小约为14 kb。IAV基因组由8个RNA节段组成,大小从890个碱基到2 341个碱基不等,可编码最多14种蛋白:血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、聚合酶蛋白(PA、PB1和PB2)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M1)、离子通道蛋白(M2)和非结构蛋白(NS1、NS2、PA-X和PB2-F2)^([1])。

宁夏中南部地区牛支原体病原学检测及分离鉴定

为了解宁夏中南部地区牛支原体感染及遗传变异情况,采用PCR方法,对来自宁夏中南部9个县区规模场、屠宰场和交易市场的495份牛鼻拭子样本进行PCR检测及菌株分离鉴定。结果显示:495份样本中,经PCR检出阳性59份,总体阳性率为11.92%,9个县区的阳性率为1.82%~21.82%,规模场、屠宰场、交易市场阳性率分别为11.11%、13.33%、12.59%;共分离出16株疑似牛支原体菌株,经oppF基因特异性引物扩增、测序比对及建立分离株系统发育树,结果有4株被确定为牛支原体;进一步用分离株16S rRNA序列与支原体代表株构建系统发育树,结果发现分离菌株与国际标准株PG45、宁夏菌株Ningxia-1亲缘关系最近。药敏试验发现,分离菌株对苯唑西林、链霉素、环丙沙星、多黏菌素B、阿莫西林、哌拉西林、头孢唑林、氨苄西林不敏感。结果表明,宁夏中南部地区牛支原体流行较为普遍,流行菌株未发生较大的基因变异,但对部分抗生素产生了耐药。建议宁夏中南部地区加强对牛支原体病的防控,临床防治时要结合药敏试验,选用敏感药物,适当联合用药和穿插用药,避免产生耐药性。本研究为宁夏中南部地区牛支原体病防控和临床用药提供了参考。

宁夏鸡传染性支气管炎病原学检测及N基因序列分析

为了解宁夏地区鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)流行情况,分析鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)流行毒株的优势基因型,2021年9—11月,在宁夏8个县(区)部分规模化禽场和散养户,随机采集鸡咽喉/泄殖腔拭子646份,采用RT-PCR方法进行IBV核酸检测,对阳性样品进行病毒分离,对分离毒株的N基因进行遗传进化分析。结果显示:在646份样品中检出阳性88份,总阳性率为13.62%,其中西吉县、利通区阳性率较高,分别为36.00%、32.29%,70日龄蛋鸡阳性率高于120日龄以上鸡群。本试验成功分离出1株IBV毒株。基因分析显示,分离株属于QX型,与我国山东SDIB702/2012株亲缘关系最近,同源性为97.55%,与QX代表株P100株同源性为93.31%,与我国常用疫苗血清型H120、M41型毒株的同源性分别为86.67%、86.14%。结果表明:宁夏地区存在一定的IB流行,且呈现一定的地区、季节暴发特征,低日龄鸡群感染较严重,需要加强防控;流行的IBV毒株属于我国流行的优势基因型QX型,与我国常用的Mass型疫苗毒株同源性较低,现有疫苗可能难以对其产生有效的免疫保护作用。本次研究初步明确了宁夏地区蛋鸡群IB流行情况和流行毒株的遗传特点,可为宁夏地区的IB防控提供参考。

一例猫三体炎的病例报告

三体炎是指同时发生炎性肠病,慢性胰腺炎和胆管肝炎,常见于猫。由于猫独特的解剖结构,导致胆囊胆道,胰腺或小肠炎症互相影响,从而导致三体炎发生。现有研究认为胰腺及胆道发炎多数是由小肠逆行性感染所致,猫的三体炎主要诱因为炎性肠道疾病引发的慢性肠道炎症及慢性呕吐。本文对2岁蓝白英短猫三体炎病因、临床症状、鉴别诊断、实验室检测和治疗进行、分析,为后续、三体炎的诊疗提供参考依据。