人脐带间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肠道屏障功能的调节作用

背景:糖尿病肾病是引起终末期肾病的重要原因,其中肠道屏障损伤在糖尿病肾病的发生发展中起到了重要作用。目的:观察人脐带间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肠道屏障的保护作用。方法:30只8周龄雄性SD大鼠随机分配至健康对照组、模型组和人脐带间充质干细胞组,每组10只。人脐带间充质干细胞组大鼠在糖尿病肾病成模后经尾静脉注射1×106个人脐带间充质干细胞,每周1次,连续4周,健康对照组和模型组大鼠在相同时间注射等体积PBS。末次注射后1周,光镜下观察肾脏和结肠组织形态学改变情况,免疫组化法检测大鼠结肠组织中ZO-1和Occludin的表达;ELISA法检测大鼠血清D-乳酸和脂多糖水平。此外,还利用活体成像系统观察DiR染料标记的人脐带间充质干细胞在大鼠体内的示踪分布,以及应用免疫组化法检测结肠组织中人源性间充质干细胞表面标志抗原CD44和CD90的表达。结果与结论:①与模型组比较,人脐带间充质干细胞移植显著抑制了糖尿病肾病大鼠尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白水平和尿白蛋白/肌酐比值的增加(均P<0.05);②在糖尿病肾病大鼠结肠中发现了人源间充质干细胞表面标志物CD44和CD90的表达;③与健康对照组相比,模型组大鼠结肠组织中紧密连接蛋白Occludin与ZO-1蛋白表达水平显著减少,而人脐带间充质干细胞治疗后显著提高了Occludin和ZO-1的表达;④与模型组比较,人脐带间充质干细胞移植后显著降低了糖尿病肾病大鼠血清D-乳酸和脂多糖水平;⑤结果提示,人脐带间充质干细胞可能通过增强糖尿病肾病大鼠肠道紧密连接蛋白的表达来保护肠道屏障功能。

人脐带间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏HIF-1α表达的影响

目的观察人脐带间充质干细胞(HUMSC)对糖尿病肾病大鼠肾脏缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法50只健康清洁级8周龄雄性SD大鼠,随机选取20只为健康对照组,其余30只采用链脲菌素复制糖尿病肾病大鼠模型(模型组),两组大鼠饲养12周。第12周,随机选取两组大鼠各3只分别尾静脉注射DiR-HUMSCs,代谢12~16 h后在小动物活体光学3D成像系统下观察DiR-HUMSCs在大鼠体内的分布。随机选取9只模型组大鼠进行HUMSCs移植(HUMSCs移植组)。HUMSCs移植采用尾静脉注射方式移植浓度为1×10^(6)个/mL HUMSCs 500μL至大鼠体内,每周1次,连续4周,共28 d。检测3组大鼠的24 h尿蛋白定量(24 h UPro)、血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿肌酐(Ucr)、尿白蛋白与肌酐比值(UACR)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组大鼠血清HIF-1α水平;采用PAS和Masson染色进行肾脏组织病理检测;免疫荧光法检测3组大鼠肾组织HIF-1α、Slc12A3和Aquaporin1蛋白的表达。结果移植HUMSCs治疗4周后,与健康对照组比较,模型组和HUMSCs移植组大鼠Ucr水平降低(P<0.05),Scr、24 h UPro、BUN、UCAR均升高(P<0.05);与模型组比较,HUMSCs移植组大鼠Ucr水平差异无统计学意义(P>0.05),Scr、24 h UPro、BUN、UCAR均降低(P<0.05)。糖尿病肾病大鼠病理损伤缓解,系膜增生和基底膜增厚改善,小管空泡变性减少,间质纤维化减轻。模型组大鼠血清HIF-1α水平较健康对照组升高(P<0.05),HUMSCs移植组血清HIF-1α水平较模型组下降(P<0.05)。与健康对照组比较,模型组大鼠肾脏远端小管中HIF-1α蛋白水平增加(P<0.05);HUMSCs移植组的HIF-1α蛋白水平较模型组降低(P<0.05)。模型组远端小管标记蛋白Slc12A3水平低于健康对照组(P<0.05),HUMSCs移植组Slc12A3水平较模型组升高(P<0.05)。HUMSCs移植组的Aquaporin1蛋白水平较模型组和健康对照组均降低(P<0.05)。糖尿病肾病大鼠近端小管中无HIF-1α表达。结论HIF-1α主要在糖尿病肾病大鼠肾脏远端小管表达,且HUMSCs可通过抑制HIF-1α的表达修复肾小管的损伤。

血清半乳糖缺陷型IgA1和甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3在IgA肾病发病机制中的研究进展

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是世界范围内最常见的原发性肾小球疾病,是导致终末期肾病的常见原因。目前,肾活检仍然是其诊断和评估病情活动的金标准。已有研究显示半乳糖缺陷型IgA1(galactose-deficient IgA1,Gd-IgA1)的沉积在IgAN致病过程中发挥重要作用,GdIgA1的沉积会激活补体系统,包括替代途径、凝集素途经和经典途径,甘露糖结合凝集素是凝集素途径起始的关键因子,活化的甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(mannose binding lectin-associated serine protease,MASPs)是凝集素途径的关键酶,MASPs存在三种不同的亚型(MASP1、MASP2、MASP3),MASP3作为一种新型的MASP蛋白酶,成为近期研究热点,国内外多项研究表明MASP3能够激活D因子,参与替代途径,造成肾小球系膜细胞的损伤。因此Gd-IgA1的沉积与MASP3地出现在IgAN当中可能存在一些联系,有待于进一步的实验研究。本文旨在系统综述GdIgA1、MASP3在IgAN的发病机制中的作用,并探讨Gd-IgA1与MASP3之间的相关性。

人重组骨形态发生蛋白7通过下调半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D信号通路抑制高糖诱导的近曲小管上皮细胞的焦亡

目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞模拟糖尿病肾病模型。分为正常浓度葡萄糖对照组(Control)、高浓度葡萄糖组(HG)、Control+rhBMP-7组、HG+rhBMP-7组。采用免疫荧光方法检测HK-2细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SAM)、焦孔素D(gasderminD, GSDMD)蛋白和焦孔素E(gasderminE, GSDME)蛋白;TUNEL染色检测细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-4(caspase-4)、半胱氨酸蛋白酶-5(caspase-5)、 N-GSDMD和GAPDH的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HK-2细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 与Control组相比,高糖组HK-2细胞Tunel染色的阳性率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.000 1),α-SMA蛋白和α-SMA mRNA表达量也显著增加(P<0.000 1),E-cadherin蛋白和Ecadherin mRNA表达量显著下降(P=0.000 6,P<0.000 1);HG组添加rhBMP-7后α-SMA蛋白和m RNA水平显著下降(P=0.011 7, P=0.002), E-cadherin蛋白和m RNA水平明显升高(P=0.001 5,P<0.000 1)。与对照组比较,HG组HK-2细胞GSDME/GSDMD蛋白的荧光信号明显增强。进而,HG组添加rhBMP-7后GSDME/GSDMD蛋白荧光信号显著减弱。同样,HG组HK-2细胞中焦亡相关蛋白caspase-1、caspase-4、caspase-5以及GSDMD的表达量显著高于对照组,差异明显(均P<0.001)。HG组添加rhBMP-7后焦亡相关蛋白的表达明显下降(分别P<0.001,P=0.002,P<0.001)。与对照组比较,HG组HK-2细胞培养上清液中IL-1β和IL-18蛋白浓度显著增加(均P<0.001)。进而导致rhBMP-7干预后HG组细胞上清液中IL-10和IL-1β蛋白浓度明显减少(P<0.001)。结论 rhBMP-7具有抑制HK-2细胞焦亡的作用,其通过调控caspase-1/GSDMD信号通路减缓高糖诱导的HK-2细胞焦亡。

肠道菌群失衡与肠道屏障损伤在糖尿病肾脏疾病中的研究进展

肠道菌群失衡可以破坏肠道屏障功能,致病菌及其有害代谢产物穿过肠黏膜屏障移位至血液,造成慢性炎症,加重肾脏损伤。肠道微生态的恢复有望成为糖尿病肾脏疾病(DKD)治疗的新靶点。大量的研究证实,DKD中存在肠道菌群失衡与肠道屏障损伤,但其具体致病机制尚未阐明。本文以“微生物-肠-肾轴”为切入点进行叙述,对DKD中存在的肠道菌群失衡、肠道屏障损伤及恢复肠道微生态的措施进行综述,有望为DKD的预防和治疗提供新的思路。

细胞焦亡相关因子在膜性肾病中表达的Meta分析

目的通过Meta分析探讨细胞焦亡相关因子在膜性肾病中的表达情况。方法全面检索英文数据库Web of Science、PubMed、Embase、Cochrane Library和中文数据库中国知网、维普中文科技期刊、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献的相关文献,采用Revman 5.4.1(ReviewManager)软件对入选文献质量进行评价,对数据进行提取和统计学分析。主要结局指标包括:含NOD样受体家族pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(caspase-1)、基因gasdermin D(GSDMD)、白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)。结果最终纳入了7篇文献,Meta分析结果显示,与空白组相比,模型组小鼠肾组织NLRP3、caspase-1、ASC、GSDMD、IL-1β、IL-18表达,以及血清IL-18及IL-1β均明显升高。结论细胞焦亡相关因子的明显升高充分证明了膜性肾病中发生了细胞焦亡,为膜性肾病的治疗提供了新靶点。

羟氯喹治疗IgA肾病的研究进展

IgA肾病(IgAN)是以肾小球系膜区IgA沉积为病理特征的原发性肾小球疾病,其发病过程有多基因、多因素参与,缺少特异性治疗方法。羟氯喹(HCQ)作为一种免疫调节剂,现主要用于治疗系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。多项研究证实羟氯喹能够降低IgAN的蛋白尿,减轻肾脏损伤。本综述旨在系统描述羟氯喹用于治疗IgAN的可能机制及研究进展,为今后临床用药提供可靠依据。

新型冠状病毒肺炎引起急性肾损伤的发病机制研究进展

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)是一种传染力极强的呼吸道病毒,越来越多的临床报道新型冠状病毒肺炎(coronavi⁃rus disease 2019,COVID-19)相关的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)。有研究表明,肾脏可能是SARS-CoV-2主要受累的靶器官,通过多因素引起肾脏功能的改变,包括病毒的直接毒力作用、肾素血管紧张素-醛固酮系统的失衡、免疫系统失调、细胞因子风暴、横纹肌溶解、凝血功能障碍、脓毒血症、肾毒性药物、器官之间的串扰以及典型症状引起的肾前性因素。本文将COVID-19引起AKI的可能发病机制做一综述,为制定管理策略和寻找可靠的治疗方法提供依据。

法域视角下农村生活垃圾分类现状与对策

当前我国农村垃圾分类呈现出制度软、规范弱以至广大基层监管缺乏、意识浅薄、垃圾混投的困境。为优化农村生活垃圾的治理模式,在实践调研与现状分析的基础上,提出构建"二重相应"的法律制度。借鉴国外先进监管经验,在成本-收益博弈的考量下,肯定监管机制非固化地设定,以社会利益最大化为立足点,创新公众参与制度。

浙北乡村聚落道路植物景观美景度评价

文章选取浙北41个乡村聚落,运用SBE评价法对乡村道路植物景观开展美景度评价,按照9种道路植物景观要素分析其对14个典型道路植物景观美景度的影响,构建道路植物景观美景度模型。结果表明:影响道路植物景观美景度的景观要素主要为观赏性和整洁度,美景度值随着观赏性和整洁度增加而增加。研究结果可为乡村道路植物景观规划提供参考借鉴。

从美国体育教学冰棒岛游戏案例分析中得到的启示

体育游戏是体育教学中的一个重要内容,是学生通过所喜爱的体育活动.体育游戏的趣味性和普及性为体育设施差的学校提供了丰富的教学方法和手段,并且也是体育教学的重要辅助手段之一.它是具有一定的情节竞赛因素,富有思想性、生活性、直观性和趣味性.在欢乐的气氛中进行竞争,在竞争中体验愉悦,同时还有利于提高中枢神经的兴奋性.因此,采用游戏形式的教学,学生不会感到枯燥和厌倦。

天津体育学院教师羽毛球运动开展现状调查与分析

羽毛球这项运动是我国传统优势项目,在各种国际大小比赛中都获得很多奖杯.现在羽毛球这个运动在我国很多地方都出现了羽毛球热.羽毛球是一种非常锻炼身体的运动,不会受年龄大小、性别的限制.简单易学,隔网运动,没有身体对抗,安全性很高,陶冶情操,锻炼身体.是一个非常流行的体育运动.针对天津体育学院教师羽毛球运动现状进行了调研,羽毛球运动深受天津体育学院教师喜爱,但由于场地器材,竞赛组织,上课时间安排,宣传力度等方面问题,导致羽毛球运动没有得到广泛的开展.

天津体育学院学生羽毛球协会现状及发展对策的研究

通过对天津体育学院羽毛球协会成员的构成情况、协会成员对羽毛球运动的热爱程度、协会成员参加训练及比赛的情况等的统计调查.一方面提高协会会员的运动水平;另一方面促成协会会员有更多的机会参与社会上各个羽毛球俱乐部之间的比赛,积累社会经验,增加协会的影响力;在良好的氛围和较好的运动成绩下,吸引其他项目的人员积极参与,进一步壮大学生羽毛球协会的队伍;分析也为天津体育学院学生羽毛球协会更好的发展提供更加合理化的建议.

文化产业发展对经济的影响——以德国柏林为例

城市经济的发展需要文化产业的推动。为研究文化产业的发展对经济的影响,以德国柏林为例,通过对柏林各文化产业的分析,证明文化产业对经济发展的贡献。