氨氯吡脒抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的角膜新生血管

目的探讨氨氯吡脒是否能抑制碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）诱导的角膜新生血管形成（ＣＮＶ）。方法每只兔眼角膜基质层内植入ｂＦＧＦ１０００ｎｇ缓释小丸，诱发ＣＮＶ。实验组兔每天腹膜下注射氨氯吡脒３０ｍｇ，共５天；对照组不用该药。定量分析ＣＮＶ的面积。结果实验组ＣＮＶ较对照组减少６９．３２％（Ｐ＜０．００１）。结论尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活物的抑制剂氨氯吡脒可显著抑制ｂＦＧＦ诱导的ＣＮＶ。

TGF-β_1AS-ODN对牛眼小梁细胞TGF-β_1、纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原表达的影响

目的 观察转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor β1,TGF β1)反义寡核苷酸对牛眼小梁细胞 (bovinetrabecularmeshworkcells,BTMC)表达TGF β1、纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原的影响。方法 脂质体介导下 ,将 0 .1,0 .5 ,1μmol·L-1TGF β1反义寡核苷酸作用于BTMC ,对照组分别加入 1μmol·L-1TGF β1正义寡核苷酸脂质体复合物、2 0g·L-1脂质体、无血清RPMI 16 4 0。然后用半定量RT PCR检测TGF β1反义寡核苷酸对BTMC表达TGF β1、纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原的影响。结果 与无血清RPMI 16 4 0对照组相比 ,0 .1μmol·L-1TGF β1反义寡核苷酸即可抑制BTMC表达TGF β1,0 .5 ,1μmol·L-1TGF β1反义寡核苷酸可完全抑制BTMC表达TGF β1(P <0 .0 5 )。 0 .1,0 .5 μmol·L-1TGF β1反义寡核苷酸可浓度依赖性抑制BTMC表达纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原 ,1μmol·L-1TGF β1反义寡核苷酸可完全抑制BTMC表达纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原 (P <0 .0 5 )。 2 0 g·L-1脂质体、1μmol·L-1TGF β1正义寡核苷酸不能抑制BTMC表达TGF β1、纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原 (P >0 .0 5 )。结论 进一步证实TGF β1可通过自分泌方式作用BTMC ,促进细胞外基质的合成。通过TGF β1反义寡核苷酸抑制BTMC表达TGF β1、纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原 ,

聚乳酸作为视网膜脱离手术可吸收性填充材料的实验研究

目的研制可吸收性化学合成材料聚乳酸（ｐｏｌｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄ，ＰＬＡ）作为视网膜脱离手术填充物，以避免非吸收性合成材料引起的手术并发症。方法健康灰兔作视网膜脱离模型，应用可吸收化学合成材料聚乳酸作为填充物，行巩膜外加压术，术后定期以Ｂ超检测巩膜嵴高度，相应时间取眼球作病理检查。观察聚乳酸在体内降解速度。结果巩膜嵴高度术后３个月内无明显变化，术后７个月下降３０％。术后１个月填充物吸收５．６％，４个月为１６．９％。组织学观察填充物未引起明显炎症反应，相邻巩膜、视网膜结构正常，无明显手术并发症。术后２周填充物为纤维膜包绕。结论聚乳酸是一种理想的巩膜外填充材料，不仅填压效果可靠，而且安全，无脱出和继发感染危险。

地塞米松对体外培养的晶状体上皮细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的观察体外培养的人眼晶状体上皮细胞(LECs)水通道蛋白-1(AQP-1)的表达;研究地塞米松对其表达水平的影响。方法运用免疫组织化学法测定人眼LECs AQP-1的表达;用含0、1×10-8、5×10-8、10×10-8、50×10-8mol/L地塞米松的DMEM培养液培养人眼LECs7d,采用RT-PCR检测地塞米松对LECs AQP-1表达的影响。结果免疫组织化学检测示体外培养的正常人眼LECs胞膜和胞浆中可见AQP-1的表达;RT-PCR示正常人眼LECs AQP-1/β-actin吸光度比值为1·43±0·12;4种浓度地塞米松处理7d后其比值分别为1·32±0·09、1·27±0·08、1·01±0·09、0·67±0·10,当地塞米松浓度≥5×10-8mol/L时有抑制作用(P<0·05),且抑制作用随地塞米松浓度的增加逐渐增强。结论体外培养的人眼LECs中可见AQP-1的表达,AQP-1可能参与维持晶状体的脱水状态及其透明性;地塞米松抑制体外培养的人眼LECs AQP-1的表达,AQP-1可能在皮质类固醇性白内障的发生发展中起重要作用。

高三尖杉酯碱防治增殖性玻璃体视网膜病变作用机理的超微结构动态研究

从细胞超微结构水平动态观察了在不同浓度和不同作用时间下,半合成性中药高三尖杉酯碱对体外培养的人眼结膜成纤维细胞的作用及其机理。初步结果表明,该药引起细胞损伤的主要特点是核膜内陷,染色质凝聚和边集以及胞浆的广泛空泡变性。此外,该药尚能抑制细胞分泌胶原纤维和合成细胞微丝的功能,故其为防治眼内纤维增生性病变的有效药物。

水通道蛋白-1在小梁切除术之切除组织中的表达

目的观察青光眼患者小梁和虹膜组织与正常眼组织水通道蛋白-1(AQP-1)的表达差异。方法收集开角型和闭角型青光眼小梁切除术时切除的小梁和虹膜组织,免疫组织化学法检测AQP-1的表达,并与正常眼相应组织对照。结果正常眼小梁网组织、Schlemm’s管内皮细胞、周边虹膜组织中上皮和基质组织可见AQP-1呈强阳性着色,开角型青光眼和闭角型青光眼组织标本小梁网AQP-1阳性染色较正常弱;部分急性闭角型青光眼患者周边虹膜组织标本上皮层较基质组织染色明显弱。结论开角型青光眼小梁网AQP-1的表达减少可能与小梁网的发育有关,闭角型青光眼虹膜上皮和小梁网AQP-1的表达减少可能与虹膜萎缩或高眼压有关。

体外培养牛眼小梁细胞表达转化生长因子β及其受体蛋白

目的 从蛋白质水平了解体外培养牛眼小梁细胞是否表达转化生长因子 β(TGF β)及其受体 (TGF βR)。 方法 采用Supervision法对体外培养第 3代牛眼小梁细胞进行TGF β1,TGF βR免疫组化检测。 结果 小梁细胞TGF β ,-β2 和TGF βRⅠ ,RⅡ ,RⅢ免疫组化染色的阳性信号分别位于胞浆内和胞膜上 ,阴性对照未见阳性信号。 结论 牛眼小梁细胞表达TGF β ,TGF βR蛋白。较之猪眼小梁细胞 ,牛眼小梁细胞更适用于今后研究TGF β及其受体与原发开角型青光眼发病学的关系。

转化生长因子-β_2对牛眼小梁细胞吞噬功能的影响

观察转化生长因子 β2 (transforming growth factor- β2 ,TGF- β2 )对体外培养牛眼小梁细胞吞噬功能的影响。体外培养牛眼小梁细胞经 0、 0 .32、 1.0 0、 3.2 0 ng/ m l TGF- β2 处理 2 4h后 ,加入乳胶微粒 ,2 4h后作瑞氏染色 ,光镜下数取相邻 2 0个细胞中的微粒数。结果发现 :0 .32、 1.0 0、 3.2 0 ng/ ml TGF- β2 可促进牛眼小梁细胞吞噬乳胶微粒 ,与对照组比较有显著差异 ;同时呈现明显的量效关系。提示 TGF- β2

家兔眼压测量的标定问题

应用兔眼接压力传感器记录眼内压，通过一灌注系统改变眼内压，用Ｓｃｈｉｏｔｚ和Ｐｅｒｋｉｎｓ眼压计进行眼压测量，对此二种眼压计进行标定。结果发现家兔眼球壁硬度平均值为０．００３２±０．００１１，远较人眼为低，所以用Ｓｃｈｉｏｔｚ眼压计必须用双砝码测量对读才能避免实验性研究的误差；也发现Ｐｅｒｋｉｎｓ眼压计测量读数明显低于实际眼压，这可能与兔眼角膜明显较人眼薄有关，建议按本文提出的回归方程校正，以减少误差。

维拉帕米对牛眼小梁细胞表达转化生长因子-β的影响

目的 研究维拉帕米 (Verapamil)在抑制牛眼小梁细胞 (BTMC)合成细胞外基质 (ECM )的同时 ,对BTMC表达转化生长因子 β1(TGF β1)、TGFβ2 的影响。方法 采用半定量RT PCR和免疫组化结合计算机图像分析技术分别检测等于和低于 0 0 1mg/mLVerapamil对BTMC表达TGFβ1、TGFβ2 蛋白和mRNA。结果 0 0 0 1、0 0 0 5、0 0 1mg/mLVerapamil可质量浓度依赖性抑制BTMC表达TGFβ1、TGFβ2 蛋白和mRNA(P <0 0 5 ) ,且 0 0 1mg/mLVerapamil可完全抑制TGF β1的蛋白合成 ,同样质量浓度的Verapamil对TGF β1的抑制程度要大于TGF β2 (P <0 0 5 )。结论 Verapamil抑制BTMC合成ECM的机制可能为抑制TGF β表达 ,这种抑制是在转录水平上 ,且对TGF β1的抑制可能在其中起主要作用。此外 ,TGF β可通过自分泌方式作用BTMC ,促进ECM的合成 ,进一步为Verapamil在发病学环节上防治原发性开角型青光眼提供实验依据。

Ahmed青光眼阀盘周纤维包裹二次手术后的临床分析

目的分析Ahmed青光眼阀盘周纤维包裹二次手术切除后的效果和并发症。方法回顾分析在我院行全视网膜冷凝后Ahmed青光眼阀植入后因Ahmed阀的盘和引流管周围形成包裹、眼压超过30mmHg导致手术失败的患者共11例，进行二次纤维包裹切除后，分析其眼压、视力的变化和发生并发症的原因。结果11例患者术后进行1～12月的随访，远期成功率为72．7％。术前和术后眼压平均为（40．72±9．05）mmHg和（17．36±8．09）mmHg，术后较术前显著下降（t=6．38，P〈0．001）。主要并发症为Ahmed阀盘和引流管的暴露。结论二次选择性的瘢痕切除辅以抗增殖药物的应用，能够进一步提高Ahmed青光眼阀植入术的成功率。

转化生长因子β_2诱导人小梁细胞凋亡的体外研究

目的 观察转化生长因子 β2 (transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 )是否能诱导体外培养人眼小梁细胞 (humantrabecularmeshworkcells,HTMC)发生凋亡。方法 将体外培养的第 3～ 5代人眼小梁细胞分为对照组和实验组 ,实验各组分别经 0 .32、1.0 0、3.2μg·L-1TGF β2 作用 4 8h后 ,分别用透射电镜、TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡的诱导情况。结果 透射电镜观察发现凋亡细胞典型的形态学变化———核染色质凝集边集 ,凋亡小体形成等。TUNEL法检出发生DNA片段化的HTMC。经流式细胞术定量分析 ,不同浓度TGF β2 处理的HTMC凋亡细胞百分数分别为 ( 2 .79± 0 .4 4 ) %、( 4 .4 3±1.17) %、( 9.6 0± 2 .0 5 ) % ,其中 1、3.2 μg·L-1TGF β2 处理组与对照组 ( 1.4 1± 0 .34) %相比分别有显著差异和极显著差异。结论 TGF β2 能诱导体外培养HTMC发生凋亡 ,推测其可能参与了原发性开角型青光眼患者和正常人衰老过程中HTMC数目的减少。

国产房水引流置入物治疗顽固性青光眼近期疗效观察

目的 观察国产引流置入物治疗顽固性青光眼的疗效。方法 对 10例顽固性青光眼施行颞上象限或颞下象限到赤道部区域的国产HAD房水引流物置入术。结果 术后半年以上由术前眼压 46 6± 4.5mmHg ,下降至 19 75± 5 .78mmHg ,总成功率为 70 %。并发症有短暂性前房出血 ,术后早期低眼压引流管过长或过短。结论 国产HAD房水引流物置入术较为经济 ,是治疗难治性青光眼的一种有效方法之一。

体外培养人眼小梁细胞表达转化生长因子-β_2

目的 :了解体外培养人眼小梁细胞是否会表达转化生长因子 β2 (Transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 ) ,以确定TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关。方法 :一步法提取体外培养人眼的小梁细胞RNA ,利用RT PCR检测TGF β2 的mRNA ,用双链测序鉴定PCR产物 ,并用免疫组化SUPERVISION法检测TGF β2 蛋白的表达。结果 :RT PCR扩增得到的单一产物 ,其序列与己知序列完全一致。TGF β2 免疫组化染色呈阳性。结论 :小梁细胞自身产生的TGF β2 ,是小梁网局部微环境和房水中TGF β2 的来源之一 ;TGF β2 不仅通过旁分泌方式 ,也可通过自分泌方式作用于小梁细胞。小梁细胞产生TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关 ,值得进一步研究。

Tranilast及其在眼科的应用

总结Tranilast的一般性质及其抗过敏、有抗纤维化和抑制新生血管形成等作用。回顾近年来Tranilast在过敏性结膜炎、春季结膜炎、PRK术后角膜上皮下浑浊、后发障、滤过泡疤痕化。

维拉帕米对牛眼小梁细胞合成细胞外基质的影响

目的 探讨维拉帕米(Verapamil)对牛眼小梁细胞(BTMC)合成Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、透明质酸的影响。方法 采用免疫组化结合计算机图像分析和放免技术检测等于和低于0.01 mg/ml维拉帕米对BTMC合成胶原、纤维连接蛋白、透明质酸的影响。结果 0.001、0.005、0.01mg/ml维拉帕米可质量浓度依赖性抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白的合成(P<0.05),而促进透明质酸的合成(P<0.05)。0.005、0.01mg/ml维拉帕米可质量浓度依赖性抑制Ⅳ型胶原(P<0.05),而0.001mg/ml维拉帕米无此作用(P>0.05)。结论 维拉帕米可通过抑制细胞外基质在小梁网异常沉积,减少房水外流阻力,有望在发病学环节上治疗原发性开角型青光眼。

体外培养视网膜色素上皮细胞对成纤维细胞生长的促进作用

观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对成纤维细胞生长的影响。利用￣３Ｈ胸嘧啶核苷掺入法和细胞计数法首次显示了视网膜色素上皮细胞条件培养液对成纤维细胞生长有促进作用。采用ＳＤＳ——聚丙烯酰胺凝胶电泳从视网膜色素上皮细胞条件培养液中分离出一些细胞分泌性蛋白质，其中某些可能具有细胞因子作用。这些结果有助于增殖性玻璃体视网膜病变的病因学研究。

庆大霉素对牛眼睫状体色素上皮细胞的毒性研究

为了探索庆大霉素对睫状体色素上皮细胞 (Pigmented ciliary epithelial,PCE)的毒性作用 ,在体外培养了牛眼睫状体色素上皮细胞 ,并加入 12 5、 2 5 0、 5 0 0、 10 0 0、 2 0 0 0 μg/ ml的庆大霉素 ,观察加药后第 3、 6、 12、 2 4、 48h的细胞生长、形态结构 ,计算第 48h细胞死亡率。结果发现低于 2 5 0 μg/ m l的庆大霉素对 PCE细胞无任何影响。 5 0 0 μg/m l的庆大霉素作用 2 4h后开始出现细胞间隙增宽、细胞皱缩等中毒反应 ,48h后有 7.6 %的细胞中毒死亡。提示 ,庆大霉素对牛眼 PCE细胞的安全浓度是 2 5 0 μg/ ml,大于 5 0 0 μg/ ml的庆大霉素可使细胞皱缩、变圆、死亡。

环孢霉素A应用于青光眼滤过术

目的 观察环孢霉素A(cyclosporinA ,CsA)在青光眼滤过术中的疗效 ,评价其临床应用价值。方法 采取随机对照临床试验方法 ,将 5 2例 6 4眼原发性开角型青光眼患者随机分为 2组 ,每组 32眼。 1组患者术中 1次性应用 2 0g·L-1CsA溶液浸润巩膜瓣下及结膜瓣内表面 ;另 1组行单纯小梁切除术 ,术后随访 6～ 15个月。结果 (1)术后第 12个月末 ,CsA组功能性滤过泡累积维持 74 .8%± 16 .6 % ,高于对照组的 5 4 .9%± 18.9% (u =4 .4 6 4 ,P <0 .0 5 )。 2组术后滤过泡均以Ⅱ型滤过泡为主 ,但CsA组Ⅲ型滤过泡发生率16 .7%明显低于对照组的 38.7% (χ2 =6 .4 6 0 ,P <0 .0 5 ) ;(2 )CsA组术后完全和条件成功率分别为 76 .7% (2 3/30 )和96 .7% (2 9/30 ) ,高于对照组的 5 1.6 % (16 /31)和 71.0 % (2 3/31) (χ2 =4 .15 0 ,5 .5 91,P <0 .0 5 ,0 .0 5 ) ;术后第 1周 ,2组眼压无明显差异 (t =1.2 73,P >0 .0 5 ) ;而术后第 2周、1、3、6、12月CsA组眼压均显著低于对照组 (t =2 .0 2 9,2 .0 97,2 .2 85 ,2 .6 5 1,3.82 4 ,P <0 .0 5 ,0 .0 5 ,0 .0 5 ,0 .0 5 ,0 .0 1) ;第 1、3、6月 ,CsA组眼压 10～ 15mmHg(1kPa =7.5mmHg)的控制率明显高于对照组 (χ2 =4 .6 80 ,4 .15 0 ,7.878,P <0 .0 5 ,0 .0 5 ,0 .0 1) ;?

蛇毒制剂对兔眼滤过术的影响

评价蛇毒制剂在兔眼滤过术后抗瘢痕形成的效果和眼毒性。方法 对１０只兔双眼行巩膜全层咬切术，术后实验组球结膜下注射 ５ × １０－２Ｕ／ｍｌ的蛇毒制剂０．５ ｍｌ，对照组注射等量生理盐水，裂隙灯观察眼前段。术后第２１天，用鼠尾胶原作为房水外流示踪剂行前房恒压灌注及原位固定，对手术区组织行功能及组织形态学检查。结果术后１４，２１天，实验组有５眼、３眼可见滤过泡，对照组无１眼有滤过泡。滤过泡消失眼的滤过口被瘢痕组织封闭，手术区结膜下纤维组织明显增生。有滤过泡眼的滤过口仍显开放，房水示踪剂经此开口流入滤过泡。结论 蛇毒制剂能抑制兔眼滤过术后结膜下过分瘢痕化，延长滤过泡的存在时间和功能，其眼毒性不明显。