血清和尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测在震波碎石治疗肾结石中的应用

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)是细胞内溶酶体的一种水解酶,人体以肝、肾含量较高,肾近曲小管上皮细胞内含量最为丰富,血液和尿液中仅含微量。在生理条件下血液中NAG不能通过肾小球,但对肾脏病变反应敏感。

迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的:研究迷迭香酸对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。方法:将20、40、60μg/ml迷迭香酸或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇,分别加入黄嘌呤溶液(测尿酸生成量:1 mmol/L;测超氧离子:50μmol/L)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,用生化仪测定5min尿酸生成量和超氧离子生成(NBT显色法)。在1 ml 2×105/ml HL-60细胞悬液中加入100μl 6 mol/L黄嘌呤、100μl0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶、500μg/ml迷迭香酸,分别以AnnexinⅤ-PI双标试剂盒法(以1μg/ml别嘌呤醇为阳性对照)或细胞周期法(以100 U/ml SOD为阳性对照)测定细胞凋亡率。结果:迷迭香酸显著抑制尿酸生成和超氧离子引起的NBT显色,两种方法测得其IC50分别为56μg/ml和21μg/ml;对细胞凋亡的抑制率均在40%以上。结论:迷迭香酸是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂。

玄参中苯丙素苷XS-8对兔血小板cAMP和兔血浆中PGI_2/TXA_2的影响

玄参属(Scrophularia L.)是玄参科(Scrophulariaceae)的一个大属,世界上共有200种以上,我国约有40种[1].玄参属有许多药材作为民间药物治疗各种疾病[2].我们对玄参的化学成分进行了较为系统的分离,发现其主要成分为环烯醚萜苷和苯丙素苷.药理实验中证实苯丙素苷能抑制血小板聚集和大鼠中性白细胞花生四烯酸(AA)代谢物白三烯(LTB4)的生成[3].本研究在此基础上,进一步探讨苯丙素苷抗血小板聚集的作用机制.

中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50μmol/ml)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,利用5 min超氧离子生成量来测定黄嘌呤氧化酶活性(NBT显色法)。再将20、40、60μg/ml renierol或100 U/ml阳性对照SOD加入25℃预热过的邻苯三酚,在波长420 nm处测定吸光值,观察renierol对自由基的直接清除作用。建立尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,并给高、中、低剂量renierol组小鼠口服10、203、0 mg.kg-1renierol,别嘌呤醇组给药量为2 mg.kg-1,用全自动生化分析仪测定实验鼠的血清尿酸值,观察renierol体内降尿酸作用。结果:Renierol体外是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,其IC50为1.36μg.ml-1,在体内也有明显的降尿酸作用。结论:Renierol通过抑制黄嘌呤氧化酶来降血尿酸。

玄参中环烯醚萜Epibueropyridinium A对醛糖还原酶的抑制作用

目的:研究Epibueropyridium A对醛糖还原酶的抑制作用。方法:醛糖还原酶通过硫酸铵分级沉淀从牛眼晶状体中提取,在含有DL-甘油醛、醛糖还原酶、NADPH的反应体系中,加入一定浓度的Epibueropyridium A,通过340 nm处光密度的变化来反映Epibueropyridium A对酶活性的抑制作用。阳性对照为依帕司他,采用双倒数作图的方法确定抑制类型,二次作图法求Ki,以抑制剂浓度对抑制率作图求IC50。结果:Epibueropyridium A能显著抑制醛糖还原酶的活性,为竞争性抑制,其半数抑制剂量IC50为4.2μg/ml,Ki值为4.88μg/ml。结论:Epibueropyridium A是醛糖还原酶的竞争性抑制剂。

丹参总酚酸抑制大鼠肾间质纤维化的初步观察

目的观察丹参总酚酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响。方法将40只健康、雄性SD大鼠随机分为4组分别为UUO组、假手术组(SOR)、阳性对照依那普利(ACEI)组和丹参总酚酸样品(TSA)组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,ACEI组和丹参总酚酸组分别灌胃ACEI[6mg/(kg·d)]和丹参总酚酸[20mg/(kg·d)],连续8d。术后第7天分别处死各组大鼠用免疫组织化学方法测定TGF-β1的表达情况。行H-E和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果丹参总酚酸组和ACEI组TGF-β1的表达量与模型组(0.22±0.06)比较有明显的下降(P<0.05),结果分别是1.38±0.26和1.38±0.26。丹参总酚酸能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β1的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论丹参总酚酸对UUO所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β1的表达有关。

玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响

目的 :观察玄参中苯丙素苷对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响。方法 :采用D 氨基半乳糖 (D Gal)造成大鼠急性肝损伤模型 ,观察玄参中苯丙素苷对此模型肝细胞凋亡及相关基因表达的影响。结果 :玄参中苯丙素苷明显抑制模型肝细胞凋亡 ,上调bcl 2蛋白表达 ,下调Fas/FasL的表达。结论 :玄参中苯丙素苷抗肝损伤细胞凋亡可能与其调控肝细胞凋亡相关基因有关。

几丁糖/海藻酸敷料止血性能的实验研究

目的研究一种新型敷料:几丁糖/海藻酸敷料(本项目组自行研制,已申请国家专利)的止血性能。方法取新西兰兔4只,在背部两侧对称性剪5个直径1cm的圆形创口,分别用与创面大小相当的几丁糖/海藻酸敷料和明胶海绵止血,观察与创面的粘附情况,记录出血时间;止血停止后,将几丁糖/海藻酸敷料和明胶海绵放入预先配制好的氰化高铁血红蛋白检测试剂中仔细清洗,用分光光度计在540nm波长处光度比色,测出的Hb光度吸收值表示出血量。结果几丁糖/海藻酸敷料与创面粘附较好,几丁糖/海藻酸敷料组、明胶海绵组的出血时间分别为87.7±19.1秒、170.7±22.6秒,Hb光度吸收值分别为1.131±0.44、1.733±0.733,经统计学分析,两组数据都有显著性差异(<0.01),几丁糖/海藻酸敷料组明显优于明胶海绵组。结论几丁糖/海藻酸敷料具有较好的止血性能。

神经生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用(英文)

背景:神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对神经元的存活、神经纤维的生长和分化以及再生起重要作用,是维持中枢神经和周围神经功能的重要活性因子,对许多疾病如神经系统变性疾病、老年性痴呆、脊髓损伤、脑卒中致瘫痪等均有潜在的治疗价值。目的:测定经二硫化碳所致视神经损害的大鼠在治疗前后视觉诱发电位的变化,来证实神经生长因子对受损视神经的治疗效果。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:研究地点为解放军上海第二军医大学基础部。材料为Wistar健康成年大鼠,体质量240～340g,雌雄各半,由第二军医大学实验动物中心提供。方法与主要观察指标:将大鼠随机分成4组:NGF5000U/kg组、NGF1000U/kg组、NGF200U/kg组和空白对照组。将清醒已埋好电极的大鼠进行固定,测定其视觉诱发电位及模式翻转诱发电位。结果:大鼠视神经损伤模型经神经生长因子治疗20d后,模式反转诱发电位潜伏期犤NGF5000U/kg组N1为(42.9±5.3)s,P1为(59.9±5.6)s,N2(93.8±5.9)s犦和闪光诱发电位的潜伏期犤NGF5000U/kg组P1为(31.2±2.6)s,N1为(37.9±4.0)s,P2为(54.7±4.9)s,N2为(85.1±5.2)s犦与对照组相比均有明显的缩短。结论:神经生长因子能明显改善视神经传导功能,并有量—效关系,提示神经生长因子对视神经损伤有一定的?

鲨鱼肝刺激物对大鼠急性肝损伤和肝脏线粒体功能的影响

目的研究鲨鱼肝刺激物(sHSS)对硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠急性肝损伤和肝线粒体功能的影响。方法雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,随机分3组对照组、模型组、治疗组,每组8只。以400mg/kgTAA2次腹腔注射建立大鼠急性肝损伤模型,治疗组在注射TAA前1h腹腔注射80mg/kgsHSS,对照组注射等体积的生理盐水,24h后观察大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝中丙二醛(MDA)含量的变化,以及TAA和sHSS对肝线粒体呼吸功能、线粒体肿胀和膜电位的影响。结果治疗组大鼠血清中ALT、AST的水平明显低于模型组,而模型组MDA含量明显高于治疗组和正常组(P<0.05);治疗组大鼠肝脏线粒体ADP诱导的3态氧消耗、呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化率(OPR)明显高于TAA模型组(P<0.05);注射TAA和sHSS后,线粒体肿胀和跨膜电位没有明显的变化。结论sHSS能明显抑制TAA造成的急性肝损伤和脂质过氧化,改善因TAA而受损的线粒体呼吸功能。

中国南海海绵提取物-renierol抗痛风作用的实验研究

目的探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响和可能的作用机理。方法从海绵中分离提取renierol成分,采用尿酸生成法和超氧离子致NBT显色法测定黄嘌呤氧化酶活性,并进一步研究其作用机理。结果两种实验显示其对黄嘌呤氧化酶有明显的抑制作用,IC50分别为1.85和1.36μg.mL-1。结论该海绵中renierol成分能有效抑制黄嘌呤氧化酶。

玄参中环烯醚萜Epibueropyridinium A预防D-半乳糖性白内障的实验研究

目的:探讨玄参中环烯醚萜Epibueropyridinium A对D-半乳糖性白内障形成的干预作用。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型组、样品高、低剂量组和阳性对照组,每组10只。模型组腹腔注射D-半乳糖诱导大鼠白内障模型;样品高、低剂量组在注射D-半乳糖同时分别给予20、10 mg/kg环烯醚萜Epibueropyridinium A灌胃;正常对照组仅仅灌胃生理盐水;晶体混浊度和山梨醇含量的变化阳性对照为依帕司他(10 mg/kg),SOD活性和丙二醛含量变化的阳性对照为VitE(30 mg/kg)。3、6周后用裂隙灯观察晶体混浊程度,处死动物后检测晶体中SOD的活性,丙二醛以及山梨醇的含量。结果:样品高、低剂量组大鼠白内障的晶体混浊度明显低于模型组,样品高剂量组低于低剂量组(P<0.01)。晶体中SOD活性(Nu.mg-1)由模型组的32.1±11.2分别升高到样品低剂量组的65.9±16.7和样品高剂量组的83.2±15.6(P<0.01);丙二醛含量(nmol.mg-1)由模型组的26.72±5.36分别降到样品低剂量组的18.34±4.29和样品高剂量组的15.66±5.47(P<0.01);山梨醇含量(μmol.g-1)在第3周时由模型组的24.33±2.57分别降到样品低剂量组的15.46±2.07和样品高剂量组的11.45±1.39(P<0.01),在第6周时由模型组的20.04±1.59分别降到样品低剂量组的15.82±1.42和样品高剂量组的13.22±1.37(P<0.05或0.01)。结论:玄参中环烯醚萜Epibueropyridinium A对大鼠糖性白内障形成有一定的预防作用。

医学生物技术综合性分子生物学实验课程设计

综合性实验课程在高校人才培养过程中的作用越来越突出,分子生物学实验作为医学生物技术专业的一门核心课程也要尝试综合性、设计性课程改革,对医学生物技术专业综合性分子生物学实验课程的教学课程设计环节中遇到的问题进行一些探索和思考。

神经生长因子对大鼠视觉诱发电位的影响

目的和方法 :本研究主要通过电生理方法 ,测定经CS2 所致视神经损害的大鼠在治疗前后视觉诱发电位的变化 ,以证实神经生长因子对受损视神经的治疗效果。结果 :大鼠视神经损伤模型经神经生长因子治疗 2 0d后 ,模式反转诱发电位和闪光诱发电位的潜伏期与对照组相比均有明显的缩短 ,并有量—效关系。结论 :神经生长因子能明显改善视神经传导功能 。

鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗小鼠急性肝损伤作用

肝刺激物(hepatic stimulator substance,HSS)是从初断乳大鼠肝和部分肝切除后的再生肝中发现的一种肝脏刺激因子,它存在于新生肝和再生肝的肝细胞胞液中,能刺激肝细胞有丝分裂,促进肝细胞再生和肝细胞DNA的合成.与其他肝细胞因子不同,HSS的作用只有组织特异性,而没有种属特异性,目前已从猪、狗、兔等多种动物的乳肝组织及人胎肝组织提取出HSS.大量研究证明,从哺乳动物提取的HSS对CCl4、D-(+)-氨基半乳糖、硫代乙酰胺(TAA)、乙醇造成的大鼠急性肝损伤有明显的保护作用[1,2].研究表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况[3].本文探讨了其对小鼠急性肝损伤的影响.

开放性实验在生物化学教学改革中的实践与探索

开放实验室对学生的技能训练、培养学生的创新意识、创新精神和开拓能力都具有重要的作用,是提高高校实验教学水平的重要手段。而生化作为一门医学实践性很强的学科,实验教学对学生学习实验知识尤为重要,通过开放性实验培养学生独立思考、分析和解决问题的能力。

神经生长因子──脑利素在治疗神经系统疾病中的应用

神经生长因子──脑利素在治疗神经系统疾病中的应用丁素菊，郑惠民，宋树奎，吴涛，李年贵，魏善建，黄才国随着神经生长因子──脑利素（ＮＧＦ）的研究进一步深入，越来越多的研究资料表明，ＮＧＦ对神经系统具有十分广泛的作用［１，２］。１９９３年６月至１９９４年...

血浆中分子物质对人红细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活力的影响

本文初步观察了正常人中分子物质(N-MMS)和烧伤病人中分子物质(B-MMS)对正常人红细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活力的影响。结果表明,不同保温时间N-MMS对红细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活力有明显影响,保温时间越长酶活力抑制越显著(p<0.01),对照组变化不明显;不同浓度N-MMS和B-MMS对红细胞膜Ca^(2+)-ATP酶活力均有影响,浓度越高酶活力抑制越明显(P<0.01)。MMS对质膜Ca^(2+)-ATP酶的抑制作用可能是MMS导致细胞病理变化的一个重要环节。

人肝细胞再生刺激因子对实验性肝纤维化大鼠的保护作用

肝细胞再生刺激因子（ＨＳＳ）的发现已有２０余年的历史，有关其分离纯化和生物学性质的报道较多［１，２］。但由于其在组织中含量少、纯化难度大，未见有将其纯化到同质的报道。本研究利用分子筛层析，弱阴离子纤维柱高效液相色谱和毛细管电泳分离技术，获得了人肝细胞...