FoxO1对牛骨骼肌细胞增殖、凋亡和分化的调控

【目的】骨骼肌是动物机体的重要组成成分,其生长发育直接影响畜禽肉产量,叉头转录因子O1(forkhead box protein O1,FoxO1)作为重要的转录调控因子,其与骨骼肌生长发育密切相关。探究过表达FoxO1对牛骨骼肌细胞增殖、凋亡与分化的作用,为肉牛遗传改良提供基础材料。【方法】采集牛的多个组织样品,提取其RNA并反转录,利用实时荧光定量PCR(qPCR)构建FoxO1组织表达谱。利用酶消化法分离得到牛骨骼肌细胞,通过观察其分化后肌管的形成以及qPCR检测其分化标志基因的表达情况来检验所分离细胞的分化性能。利用免疫荧光技术对牛骨骼肌细胞进行FoxO1亚细胞定位。设计并包装牛FoxO1过表达腺病毒,以提高牛骨骼肌细胞内FoxO1的表达。利用EdU染色检测过表达FoxO1对细胞相对增殖率的影响。利用流式细胞术检测过表达FoxO1对细胞周期分布的影响。利用qPCR检测过表达FoxO1对牛骨骼肌细胞增殖、凋亡和分化相关基因表达水平的影响。【结果】组织表达谱结果显示FoxO1在多个组织中均有表达,其在成年牛的背脂中表达量最高,在背最长肌组织中表达量最低,且FoxO1在犊牛背最长肌组织中的表达量要极显著高于成年牛的(P<0.01)。亚细胞定位结果显示FoxO1在牛骨骼肌细胞的细胞核和细胞质内均有表达,其细胞核内荧光强度高于细胞质。成功构建FoxO1过表达载体,并完成FoxO1重组过表达腺病毒的包装与扩繁,在感染牛骨骼肌细胞后,能显著提高FoxO1表达水平(P<0.01)。EdU检测显示过表达FoxO1会显著降低细胞增殖率(P<0.01),流式细胞周期检测显示过表达FoxO1会显著增加G1期细胞数并减少S期和G2期细胞数,抑制细胞G1/S期的转化,并减少G2期细胞的形成。利用qPCR进一步检测发现,增殖相关基因PCNA、CDK1、CDK2、CCNA2、CCNB1、CCND1和CCNE2均极显著下调(P<0.01),促凋亡相关基因BAD和BAX显著上调以及抑凋亡基因BCL2显著下调(P<0.05)。过表达FoxO1导致牛骨骼肌细胞肌管形成量减少,qPCR检测结果发现,骨骼肌分化相关基因MYOD、MYOG、MYF5、MYF6和MYHC的表达量显著下调(P<0.05)。【结论】FoxO1在牛的不同组织中均有表达,是一个广泛存在的转录调控因子,并且在背最长肌组织生长发育不同阶段存在表达差异,起到阶段调控作用。FoxO1在细胞核和细胞质中均发挥重要的转录调控作用,特别是在细胞核内。过表达FoxO1可能通过抑制细胞增殖相关基因和肌细胞分化相关基因的表达,从而抑制牛骨骼肌细胞的增殖与分化,并且可能通过上调促凋亡基因的表达和下调抑凋亡基因的表达来促使牛骨骼肌细胞凋亡的发生。

染色质开放状态对食管癌相关通路影响及关键基因分析

目的:探讨染色质开放状态对食管癌相关通路的影响及对关键基因进行分析。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载食管癌染色质开放性高通量测序(ATAC-seq)数据,使用R4.2.1对2组数据分别进行基因注释,并进行KEGG通路富集分析与GO功能富集分析;对食管癌RNA-seq数据进行差异分析,筛选出与染色质开放状态相关性较高的2个基因ARL5B和RUNX1,并绘制KM生存曲线;对ARL5B、RUNX1进行单因素与多因素COX分析。结果:食管癌中ATAC-seq数据的峰值距离转录起始位点≤1 kb、1~2 kb、2~3 kb所占百分比分别为32.59%、6%、4.41%,位于远端基因间区的峰值占27.15%,这种现象和染色质开放区域的分布相一致。染色质开放区峰值绝大多数存在于转录起始位点附近,符合染色质开放性的特点。KEGG和GO功能分析结果显示,注释基因在Rap1信号通路、Hippo信号通路、ErbB信号通路、mTOR信号通路等明显富集。ARL5B高表达的食管癌患者预后较差(P<0.05),RUNX1高表达的食管癌患者预后较好(P<0.05)。结论:染色质开放状态在调节食管癌的发生和发展方面发挥重要作用,ARL5B、RUNX1基因可能成为食管癌的治疗靶点和预后指标。

食管胃结合部癌术后肺部感染多因素logistic回归分析

分析食管胃结合部癌术后肺部感染的因素。方法:在选取2019年1月至2021年12月的三年间内,共有227名接受食管胃结合部癌根治手术的患者参与了研究。根据手术后是否发生肺部感染,将这些患者分成两组,其中感染组包括68人,非感染组包括159人。我们比较了这两组患者的一般信息,并分析了与术后肺部感染相关的因素。结果:在这227例接受食管胃结合部癌根治手术的患者中,有68例发生了术后感染,感染率为29.96%。单因素分析显示,感染组和非感染组在年龄、吸烟史、手术时间、手术方式等方面存在统计学上的显著差异(p<0.05),而在性别和术中出血量方面的差异则没有统计学意义(P>0.05)。这一结果提示,术后肺部感染与年龄、吸烟史、手术时间和手术方式等因素相关。多因素logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、吸烟史、手术时间≥3H、剖胸食管胃结合部癌根治术是食管胃结合部癌患者术后发生肺部感染的独立危险因素(P<0.05)。结论 食管胃结合部癌根治术后肺部感染的影响因素主要包括:年龄≥60岁,吸烟史,手术时间≥3小时,术式(剖胸食管胃结合部癌根治术)。

磁珠富集法筛选兰州鲇微卫星分子标记

兰州鲇（Silurus lanzhouensis）又名黄河鲶，隶属于鲇形目（Siluriformes）、鲇科（Siluridea）、鲇属（Silurus），是我国黄河中上游特有的大型经济鱼类。肉质细嫩、少刺、味道鲜美，具有很高的营养价值，俗有“黄河鲶鱼活人参”之称[1]。但由于过度捕捞、水利工程等因素，兰州鲇野生种群数量日益减少，已被《中国物种红色名录》列为濒危物种[2]。

基于胡鲇科和鲇科ESTs序列初步筛选兰州鲇EST-SSR分子标记

利用SSRHunter软件对现已公布的鲇形目（Siluriformes）中胡鲇科（Clariidae）和鲇科（Siluridea）共2002条EST（Expressed Sequence Tag）序列筛选兰州鲇（Silurus lanzhouensis）微卫星标记,并分析其序列丰度和分布特征。结果共发现209个微卫星序列,占整个ESTs数据库的10.44%;其中三碱基重复序列数量最多,占ESTs数据库中发现微卫星序列总数的35.62%;二、四、五、六碱基重复序列分别占微卫星序列总数的28.31%、25.57%、7.76%、2.74%。根据侧翼序列,设计125对引物,随机选取58对进行扩增鉴定及多态性筛选。结果显示29对引物能稳定扩增,16对引物具有多态性,每个位点等位基因数2-7个（平均3.75）,观测杂合度（Ho）0.133 2-0.732 2（平均0.405 1）,期望杂合度（He）0.198 2-0.848 3（平均0.560 2）,多态信息含量（PIC）0.124 1-0.794 5（平均0.506 5）。研究表明,借用已有鲇形目鱼类ESTs数据库筛选到的兰州鲇微卫星标记质量较好,可为兰州鲇种质资源保护、微卫星连锁图谱构建、经济性状的QTL定位及分子标记辅助育种奠定基础。

第二语言ERP研究的新进展

本文对近年来ERP技术在二语的语义、句法、语音和双语转换等方面的研究进展做了梳理后,得出如下结论:习得年龄、二语水平和语言结构相似度等是影响二语实时加工的3大因素;儿童二语语音的习得受到学习方式和语言水平等因素的制约;语言转换存在非对称效应,句子语境中的转换代价发生在决策阶段而非语义整合阶段。最后,指出了二语ERP研究存在的不足以及今后发展的新路径。

基于萤石溶解/表面转化的含钙矿物表面定向调控浮选技术及机理研究

研究了萤石在白钨矿和方解石表面溶解和转化的可能性,发现萤石可以在特定的捕收剂体系下作为抑制剂实现含钙矿物的浮选分离。浮选实验结果表明,萤石作为抑制剂,在白钨矿和方解石的浮选中,用量小、作用效果明显;动电位检测结果证实了萤石能明显降低方解石的动电位,但对白钨矿基本没有影响;XPS检测结果证明了萤石对方解石的作用主要在于对Ca—O键能的减弱和Ca—F基团的生成,即在方解石表面生成CaF2膜;AFM检测则可直观观察到方解石表面经过萤石处理之后出现明显的起伏,印证了离子的侵蚀与CaF2膜的生成。

兰州鲇(CAG)_n、(GATA)_n微卫星文库构建与鉴定

应用磁珠富集法构建兰州鲇（ Silurus lanzhouensis） CAG重复和GATA重复的微卫星文库，并分析其序列特征。兰州鲇基因组DNA经MseI酶切，选取200～800 bp的片段与生物素标记的探针（CAG）8和（GATA）6杂交，捕获到含有微卫星序列的目的DNA片段连接到pMD19-T载体，转化到大肠杆菌DH5α菌株中构建微卫星富集文库，经PCR检测筛选出阳性克隆进行测序。从126个阳性克隆中随机选取96个进行测序，获得59个微卫星序列（ GenBank登录号： KJ545973～KJ545998， KJ598088～KJ598120）。其中完美型31个（52.54％）、非完美型20个（33.9％）、混合型为8个（13.56％）。根据侧翼序列，成功设计48对引物，选取25对微卫星引物在10个个体进行扩增与多态性筛选，共获得10对多态性引物。结果表明，经优化的磁珠富集法能够高效地获得兰州鲇微卫星标记，这些标记将为兰州鲇种质资源保护、微卫星连锁图谱构建、经济性状的QTL定位及分子标记辅助选育奠定基础。

柿竹园多金属尾矿中铷资源综合回收技术研究

针对柿竹园复杂多金属矿浮选尾矿中的铷资源,通过泥砂分选工艺,获得了产率3.22%、Rb2O品位0.435%、Rb2O回收率19.84%的精矿产品,产品质量达到冶金要求。该研究成果可为国内类似矿山企业的铷资源综合回收提供参考。

柿竹园黑钨选别新工艺中的离心机抛尾探索研究

针对湖南柿竹园钨、钼、铋、萤石复杂多金属矿采用高梯度强磁选分离黑、白钨矿-黑、白钨矿分别浮选的工艺流程,采用离心机对高梯度强磁选精矿进行重选预先抛尾,提高黑钨矿入选品位,减少黑钨矿浮选给矿量,得到的粗精矿再用浮选回收黑钨矿。试验结果表明,对WO3品位0.64%的高梯度磁选精矿进行重选抛尾-浮选,获得了WO3品位54.23%、回收率84.75%的黑钨精矿。通过预选抛尾,减少了浮选投资,同时较大幅度降低了水耗、电耗和药耗,取得了较好的技术经济指标。

英语学习者前缀派生词认知加工机制实验研究

采用掩蔽启动技术探讨中国英语学习者前缀派生词的认知处理机制。实验采用2(外语水平:高水平和低水平)×3(启动条件:词素相关,词素无关和词素全同)的混合设计,因变量为反应时和错误率。结果表明:启动条件的主效应显著,外语水平的主效应显著,但这两者的交互作用未达到显著性水平。被试不能实现在线的分解加工,他们是以整词的形式将含re-前缀的派生词储存在大脑当中,并且这种加工机制独立于语言水平的影响。实验结果支持陈述—程序记忆模型和浅层结构假设。

复杂适应系统理论及其对二语习得研究的启示

复杂适应系统理论是Holland于1994年正式提出的新一代系统理论,迄今已在经济、生物、哲学以及社会科学等领域得到成功应用。同样,该理论也为学者研究语言提供了新的理论框架。本文就是在这一背景下尝试探讨其对第二语言习得研究中的个体差异研究、写作研究以及研究方法的启示。个体差异是语言、主体和环境互动的产物,是动态化和过程化的;写作过程的研究也可以用复杂系统理论进行指导和解释;在研究方法方面,二语研究方法上可以借鉴隐喻的思维方法和基于主体的建模方法。

大丽轮枝菌继代菌株和复壮菌株的毒素致萎活性比较

章元寿等1991年提出用大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.,简称VD)培养滤液或粗提毒素处理棉苗,根据对棉苗的致萎活性快速测定棉花品种的抗病性,为加速抗黄萎病品种筛选、育种提供了一条新的途径。大批量测定棉花抗病性时。

文字阅读的神经元再利用假说:观点、启示和展望

神经元再利用假说提出文化产物会侵入到较原始的脑回路当中,通过再利用这些回路来实现新的认知功能,新的认知功能会与先天的功能产生竞争关系。在人类历史上,文字阅读是新近发展的认知功能,是人脑对自身一般视觉和人脸识别功能的再利用。该假说对文字阅读教育和阅读障碍人群的矫正治疗具有重要的启示意义,但也有一些不足。

教育神经科学视野中的儿童句法学习及教学策略

句法是短语和句子的构成规律,儿童学习句法规则是语言能力发展的重要内容。儿童句法学习能力的发展以脑发育水平为神经基础,句法加工水平存在着比较明显的年龄阶段特征。到学龄期后,句法能力继续发展,个体差异同时存在。特殊语言障碍儿童和阅读障碍儿童也具有一定的句法加工困难。该文从教育神经科学的视野出发,探讨正常学龄期前后儿童句法能力的发展机制和语言障碍儿童句法学习的困难问题,旨在为儿童语言教育实践提供科学的证据和有益的启示,推动新时代儿童语言教育的发展和创新。

江苏省大棚蔬菜寄生线虫的种类和发生

１９９０～１９９２年对南京、徐州、连云港和淮阴市的大棚蔬菜寄生线虫的种类和发生进行了调查．从采集的３８２份上样和１６３份根样中共分离得到８属１３种寄生线虫．其中．南方根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、肾形肾线虫（Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、双宫螺旋线虫（Ｈｅｌｉｃｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓｄｉｈｙｓｔｅｒａ）和甘蓝矮化线虫（Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓｂｒａｓｓｉｃａｅ）分布较广．田间群体密度也较高．南方根结线虫在各采样区中均有发生，可侵染绝大多数现有的蔬菜栽培种类，重病田株发病率达８０％～９０％，是目前江苏大棚蔬菜生产上面临的最主要的病原线虫．

皮带摇床在柿竹园钨细泥回收作业中的应用研究

针对柿竹园尾矿钨细泥难回收的问题,采用皮带摇床,通过流程和参数优化,充分发挥皮带摇床的优势,使皮带摇床成功回收细泥中的钨。目前正在野鸡尾选厂及多金属选厂进行推广应用,该设备应用效果明显,经济效益可观。

湖南某高硫低品位铜矿选矿试验研究

对湖南某Cu品位0.11%、S品位12.85%的高硫低品位铜矿进行了选矿试验研究。采用磁选-浮选联合工艺,先磁选脱除大部分磁黄铁矿,降低其对后续铜回收的影响,再经过一粗一扫两精铜浮选,最终获得了铜品位25.48%、铜回收率71.31%的铜精矿。

ERP技术在第二语言句法和语音研究中的应用

近年来,语言学界采用先进的事件相关电位(ERP)技术来研究第二语言习得,为我们提供了丰富和有价值的研究数据。本文主要就句法和语音两个方面做一总结和展望。

褐飞虱对水稻纹枯病发生影响的探讨

本文探讨了褐飞虱排泄的蜜露对水稻纹枯病发生的影响。试验表明,有蜜露的马铃薯琼脂和水琼脂培养基对菌丝生长和菌核形成均有促进作用,蜜露含量愈高,其作用愈明显。并分析了蜜露中氨基酸和糖分对病原菌菌丝生长、菌核形成和致病力的作用。由此认为褐飞虱排泄的蜜露提供了丰富的碳、氮营养,是促使纹枯病加重发生的重要原因。