东北部分地区蜱传埃立克体DNA的检测

目的了解东北部分地区一些蜱种中是否携带埃立克体。方法应用 16SrRNA基因构建的特异性引物进行半套式PCR ,检测蜱标本中埃立克体DNA ,并对扩增产物进行克隆和序列测定 ,与基因库中已知序列进行同源性比较。结果从辽宁清原和吉林抚松、和龙、敦化、珲春的全沟硬蜱 (I .persuleatus)和森林革蜱 (D .silvarum)中均扩增出了查菲埃立克体DNA ,扩增片段与美国分离株 (基因库M 732 2 2 )相对应片段完全一致 ,同源性为 10 0 % ;另外从吉林抚松、珲春的全沟硬蜱中扩增出了粒细胞埃立克体DNA ,扩增片段与美国分离株 (基因库U 0 2 5 2 1)相对应片段相差 2个碱基 ,同源性为 99.7%。结论发现东北部分地区存在埃立克体病的病原学迹象 。

东宁、绥阳地区3种蜱媒疾病的血清流行病学调查

蜱是虫媒疾病的重要宿主之一。斑点热、莱姆病及Q热都是因其病原体通过蜱叮咬而传播的。我国东北地区广泛存在这几种蜱媒疾病的自然疫源地。为了解驻地部队对这3种蜱媒疾病的感染情况，我们于1996年4～6月对黑龙江省东宁、绥阳地区驻军及部份林业工人进行了血清学调查。现将结果报告如下。

表皮生长因子对小鼠急性肝损伤的治疗效果

为探讨表皮生长因子(EGF)对急性肝损伤的疗效,以四氯化碳所致小鼠急性肝损伤为实验模型进行了对照观察.结果表明.EGF治疗组小鼠存活率(57%)明显高于对照组(13%,P<0.05).血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和肿瘤坏死因子水平低于对照组,且两者下降较对照组显著.提示EGF对急性肝损伤有促进修复作用。

东北战区斑点热分离株rOmpA基因的PCR/SSCP分析

为分析东北战区斑点热立克次体(SFGR)的基因型,应用 SFGR 的 rOmp A 基因的 PCP/SSCP分析了东北战区 SFGR 分离株 HL-54、HL-36株的基因型,并与国际标准株及国内其它分离株作了比较。结果显示 HL-54株和 HL-36株二者相同,具有独特的 SSCP 图谱,与国际标准株及国内其它分离株有明显差异。结论:我国 SFGR 分离株存在2个种,即西伯利亚立克次体和斑点热群新种——黑龙江立克次体。PCR/SSCP 分析立克次体型别具有特异、简便、省时等特点。

黑龙江立克次体蜱传斑点热的病原学研究

目的 对我国东北地区蜱传斑点热进行病原学和流行病学研究。方法 建立并应用分子立克次体学方法 ,包括单克隆抗体、SDS -PAGE、免疫印迹、DNA酶切图谱、PCR/RFLP、PCR/SSCP及DNA序列分析等。结果 (1)在种的水平上研究了黑龙江分离株 (代表株HLJ - 5 4、36) ,从分类学上确定其属立克次体属、斑点热群的一个新种 ,命名黑龙江立克次体(R heilongiangii) ;(2 )发现其现症患者 ,并从病人血液分离到一株与黑龙江立克次体相同性质的立克次体株 ,证实了其对人的致病性。

从病人血液分离的斑点热群立克次体H-5株的鉴定

目的1996年5～6月在黑龙江省绥芬河、东宁地区进行斑点热病的调查。方法采用micro-IF、病原分离及PCR／RFLP等方法。结果（l）发现被蜱叮咬后斑点热临床指征的疑似病人7例，其中血清检测有4例早期与恢复期血清抗SFG立克次体lgM、IgG抗体滴度≥4倍升高;（2）从病人血液分离到1株SFG立克次体H-5株，经鉴定显示该分离株和黑龙江省立克次体54株一致，和SFG各标准株有明显差异。结论该患者为SFG黑龙江立克次体感染，从病原学角度证实该立克次体对人具有致病性。

蜱中人粒细胞埃立克体DNA的PCR检测及序列分析

目的了解吉林地区蜱种感染人粒细胞埃立克体的情况。方法采用16S rRNA基因特异引物进行半套式PCR,检测吉林省部分林区蜱中人粒细胞埃立克体DNA,并对扩增产物进行克隆和测序,与已知序列进行同源性比较。结果从采集于吉林地区的全沟硬蜱中检出人粒细胞埃立克体的特异性DNA片段,阳性率为1.98%。扩增产物经克隆、测序发现吉林地区人粒细胞埃立克体扩增片段与美国人粒细胞埃立克体分离株(GenBank注册号为U02521)16SrRNA基因序列相对应片段相差2个核苷酸,同源性为99.7%。结论吉林地区的全沟硬蜱携带人粒细胞埃立克体,提示吉林地区可能存在人粒细胞埃立克体病的自然疫源地。

应用PCR/RFLP对我国北方斑点热群立克次体分离株的基因型分析

应用立克次体１９０ＫＤ蛋白基因的ＰＣＲ／ＲＦＬＰ分析我国北方斑点热群立克次体分离株的基因型，并和国际标准株作了比较。结果，分离自黑龙江省、内蒙、新疆等地不同蜱类的５个，分离株呈现２种不同的ＲＦＬＰ图谱：ＪＨ－７４株、Ｈｕ－８４株及ＨＬ－８４株和西伯利亚立克次体相同；黑龙江立克次体５４株、３６株二者相同，与其它相关菌株均有差异。基因型结构分析证明，我国北方斑点热群立克次体分离株存在２个种，即西伯利亚立克次体种和斑点热群新种—黑龙江立克次体。

vJ16env/IFNα-2b基因共表达颗粒化抗原疫苗的免疫程序

目的观察国际流行株HIV1env与IFNα2b基因共表达的颗粒化抗原疫苗与质粒DNA核酸疫苗免疫程序优化的效果。方法将重组质粒pJ16envIFNα2b经脂质体介导转染RK细胞,并在痘苗病毒中共表达HIV1env与IFNα2b基因,以间接免疫荧光与斑点酶联免疫法鉴定其表达产物。以表达产物与质粒DNA联合免疫鼠脾淋巴细胞,检测淋巴细胞转化率、细胞毒性T细胞杀伤活性、CD4+、CD8+细胞计数与体液免疫水平。结果pJ16envIFNα2b基因表达的颗粒化抗原疫苗具有良好的免疫原性,3vJ16envIFNα2b+pJ16envIFNα2b联合免疫效果优于vJ16envIFNα2b单独免疫。结论pJ16envIFNα2b基因表达的颗粒化抗原疫苗能诱导机体产生细胞免疫与体液免疫。

黑龙江立克次体190KD蛋白基因的PCR/SSCP分析

应用斑点热立克次体１９０ＫＤ蛋白基因的ＰＣＲ／ＳＳＣＰ分析了我国斑点热群黑龙江立克次体分离株５４、３６的基因型，并与国际标准株和国内其它株作了比较。结果显示黑龙江立克次体呈现出独特的ＳＳＣＰ图谱，与国际标准株显著不同，也和国内其它分离株差异明显。而ＨＬ５４和ＨＬ３６株完全相同。基因单链分析说明，我国斑点热群立克次体分离株存在２个种，即西伯利亚立克次体种和黑龙江立克次体种。同时证明应用ＰＣＲ／ＳＳＣＰ分析斑点热群立克次体型别，方法筒便、省时。

恙虫病东方体黑龙江分离株的PCR分型

目的 鉴定恙虫病东方体黑龙江分离株的基因型。方法 采用PCR技术对分离自黑龙江省密山地区的 6株恙虫病东方体sta5 6kD目的基因进行分析研究 ,并与国际参考株进行比较。结果 MSAa930 1株、MSAa930 3株、MSAa930 4株及MSAp930 5株属于Gilliam型 ;MSAa930 6株属于Karp型 ;MSAp930 2株属于Kato型。 结论 黑龙江密山地区恙虫病东方体存在Gilliam、Karp和Kato 3种型别。

绥芬河地区三种蜱媒疾病的血清学调查

１９９６年４～６月，对黑龙江省绥芬河、东宁地区驻军及部分林业工人进行了蜱传斑点热、Ｑ热、莱姆病的血清学调查。应用Ｍｉｃｒｏ－ＩＦ共调查２２１人，三种蜱媒疾病的总感染率为２２．２％，其中斑点热感染率为最高（１１．８％），同莱姆疾病（５．９％）、Ｑ热（４．５％）相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。部队战士的感染率略低于林业工人，分别是斑点热：９．５％和２１．４％，莱姆病：５．６％和７．１％，Ｑ热：４．５％和４．８％。结果表明，上述三种蜱媒疾病在该地区存在程度不同的感染。

八卦作为一种无零二进制数符系统的解说

文章根据原始民族的二进位记数法，与文献记载所谓伏羲八卦、六十四卦的卦序，对八卦、六十四卦的二进制数学意义进行了新的解说，认为八卦、六十四卦是在零的概念和符号产生以前，由１和２两个最原始的数构成的二进位位值制记数系统。

绥芬河地区蜱传斑点热血清流行病学调查

绥芬河地区蜱传斑点热血清流行病学调查沈阳军区军事医学研究所（沈阳１１００３１）吴益民魏安明刘昕昕王光郭建新＊张庆航＊我们在东北边境立克次体病的调查研究中曾从黑龙江省罗北、绥芬河及吉林省浑春地区的不同蜱类中分离到数株斑点热群（ＳＦＧ）立克次体，经血清学...

东北三省部分地区人群几种蜱媒传染病抗体的调查

为了解东北三省部分地区蜱媒传染病空间分布,采用间接免疫荧光技术进行血清流行病学调查。结果表明,斑点热抗体阳性率平均为11.4%;森林脑炎抗体阳性率平均为2.7%;Q热抗体阳性率平均为9.1%;莱姆病抗体阳性率平均为7.4%,其中1份血清查菲埃立克体抗体阳性。结论:东北三省部分地区存在着斑点热群西伯利亚和黑龙江立克次体感染、Q热感染、森林脑炎感染、莱姆病感染。

HIV-1gag/IFNα-2b表达产物免疫小鼠的实验研究

为了将艾滋病病毒核心蛋白(gag)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠,观察小鼠的体液免疫和细胞免疫应答。将IFNα-2b基因片段插入到gag基因的nt531位点,经脂质体转染与血凝素阴性蚀斑筛选出重组痘苗病毒。经SDS-PAGE和Westexn blot鉴定表达产物。用重组病毒vJ38gag/IFNα-2b免疫小鼠,用ELISA方法检测血清IgG抗体含量,用流式细胞仪测定小鼠脾CD4^+、CD8^+T淋巴细胞计数。结果表明,血清IgG抗体含量逐渐增高,实验组与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。CD4^+、T淋巴细胞计数与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结论:重组痘苗病毒vJ38gag/IFNct-2b能增强小鼠的体液免疫和诱导细胞免疫。

艾滋病病毒外膜蛋白与干扰素融合基因表达产物的免疫学研究

为了将艾滋病病毒外膜蛋白(env)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠,观察小鼠的免疫功能状态和细胞免疫应答,将IFNα-2b基因片段插人到env基因的下游,经脂质体转染,筛选重组痘苗病毒,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。用重组病毒vJl6env/IFNct-2b免疫小鼠,以生理盐水和野生型痘苗病毒作为对照,检测小鼠脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性;用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4^+、CD8^+T细胞计数与CTL。结果表明,与对照组比较,实验组脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性显著增高(P<0.05);CD4^+T淋巴细胞计数和CTL活性也显著增高(P<0.05);CD8^+T淋巴细胞计数呈增高趋势,但未达到显著意义的程度。结论:重组病毒vJl6env/IFNα-2b能增强小鼠的免疫功能和诱导细胞免疫。