胃蛋白酶活力测定法的探讨

近几十年来国内外专家学者,提出并研究各种测定胃蛋白酶活力的方法;但被国家药典采用的甚少。我国中华药典及中国药典(1953、1963、1977)、BP(1973)、JP(IX)USS-RP(VⅢ)、NF(1955～1965)中均采用凝固卵蛋白作为底物测定胃蛋白酶的酶活力。此法易受多种因素影响,误差较大。中国药典(1985)采用血红蛋白作为作用物,以福林一酚试剂显色法测定在一定时间内催化水解血红蛋白生成一定量氨基酸的酶量,计算酶活力单位。

超氧化物歧化酶的活力测定法

超氧化物歧化酶能催化超氧阴离子自由基的歧化反应:具有消除自由基的能力,与生物体内的生理现象及病理变化有密切关系。其活力测定也是根据这一反应。以作为底物,是一种寿命很短的自由基,除非用脉冲射解技术进行毫微秒级快速动力学跟踪或快速冰冻结合ESR波谱观察,可获得SOD与反应动力学信息;但均需有特殊仪器设备。在一般情况下,只能应用间接活力测定法,这类方法有:(1)邻苯三酚自氧化法;(2)化学发光法;(3)极谱氧电极法;(4)黄嘌呤氧化酶-细胞色素C法等。现分析如下:一。

用N,N'-二乙基二硫代氨基甲酸酯为染色剂在聚丙烯酰胺凝胶中测定红细胞提取液中CuZn-超氧化物歧化酶

N,N′—二乙基二硫代氨基甲酸酯与CuZn—超氧化物歧化酶中的铜反应形成稳定的黄棕色带,可在448nm测定含量。这种超氧化物歧化酶(SOD)检验法已应用于红细胞裂解物的酶粗提物,裂解物中血红蛋白(Hb)可由氯仿——乙醇沉淀法去除。这种处理不影响测定裂解液中纯SOD活性和异质性,并可用同法测其回收。DDC对抽提液凝胶染色后的所显的带与二茴香胺阳性活性染色法显示的歧化酶活性带正好相对应,表明SOD是形成区带的唯一铜蛋白。通过标准歧化酶与待测物的峰面积比较可测定区带中SOD量,其结果与间接SOD活性测定的预测量相符。在DDC染色过程中,痕量Hb或Hb降解物在凝胶中产生的颜色过夜后可脱色。

胰脏弹性酶制造法

1.发明的名称胰脏弹性酶制造法 2.专利范围 以在动物胰脏中加入曲霉属(状菌属)或酒曲菌属(根霉菌属)的微生物发酵产生的酸性蛋白酶,使胰脏中弹性酶原激活为特征的胰弹性酶制造法。 3.发明的详细说明 本发明是关于胰弹性酶(下称:前脂酶)的制造方法,本法收率较高。 弹性酶存在于一般哺乳动物中,是以惰性的弹性酶原存在的,因而在制造弹性酶时,必须对前脂酶进行激活。 过去,前脂酶的激活方法有:①自溶法;②加含有胰蛋白酶或肠激肽酶的十二指肠或它的抽提液的方法等。①法收率低;

人皂甙去皮骨骼肌纤维中NAD(P)H荧光变化和荧光性黄素蛋白的测定

将取自股外肌的人皂甙去皮肌纤维固定于石英毛细管中以检测NAD(P)H的荧光变化和荧光性黄素蛋白荧光。为从少量肌组织中获取足够强的荧光信号,用HeCd激光在325nm激发NAD(P)H荧光,用氩离子激光在454nm或用HeCd激光的第二波长在442nm激发黄素蛋白荧光.用这种实验人皂甙去皮肌纤维中检测到NAD(P)H,2—硫辛酰胺脱氢酶及转电子黄素蛋白的荧光光谱。

紫外分光光度法测定胃蛋白酶片中蛋白酶活力

本文采用直接分光光度法,以牛血红蛋白为作用物,测定胃蛋白酶片中的酶活力.并与福林-酚试剂法比较试验.

应用正交试验法选择天然药物——蝮蛇抗栓酶的活力测定条件

本文参考Toom的方法,应用正交试验筛选对酶促反应条件:酶浓度、酶反应时间、显色后反应时间及缓冲液的pH值等.