全自动生化分析仪与快速血糖仪测定血糖的对比分析

目的比较快速血糖仪测定的血糖值与静脉血糖值之间的差别。方法采用东芝TOSH IBA TBA-40FR全自动生化分析仪,血糖检测试剂由天津多克隆提供(批号:11621);雅培血糖仪及配套原装试纸条对血糖进行检测。结果快速血糖仪测得值比全自动生化分析仪测得的血糖值高,有显著性差异。结论通过分析确定标本采集后应及时进行检测,以使结果保持有较高的准确性。

重组乳酸杆菌表达猪传染性胃肠炎病毒抗原表位

将猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的抗原表位B、C片段插入到乳酸菌表面表达载体pLA上,通过多聚谷氨酸合成酶A蛋白(pgsA)锚定到细胞表面进行展示表达。经SDS-PAGE、免疫荧光技术和流式细胞术检测表明蛋白成功表达于菌体表面。Western-blot检测所表达的TGEV S蛋白具有与TGE病毒一样的抗原特异性。同时将重组菌株口服免疫BALB/c小鼠,间接ELISA分析结果表明,口服免疫能诱导机体产生明显的抗TGEV IgG和sIgA抗体,可诱导小鼠产生特异性黏膜免疫和体液免疫应答,且偏向Th1型细胞免疫反应。

利用重组蛋白检测ETEC菌毛抗体的间接ELISA方法的建立

通过构建pQE-30Xa+K99重组质粒获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)重组K99蛋白的高效表达,Western blot检测该重组蛋白具有很好的免疫原性。利用纯化的重组蛋白为抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最适包被浓度为0.7μg/孔,血清最佳稀释倍数为1∶800,酶标二抗最佳稀释倍数为1∶6000,初步建立了检测牛血清中抗ETEC菌毛抗体的间接ELISA方法。经特异性试验、敏感性试验和重复性试验证明,该方法具有良好的特异性和敏感性,重复性好。

大肠杆菌野生株K_(99)菌毛蛋白结构基因的克隆与序列分析

根据产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99菌毛蛋白的全基因序列设计产肠毒素大肠杆菌主要菌毛K99的一对引物。PCR扩增K99菌毛蛋白的全基因序列大小为546bp。将PCR扩增的目的片断克隆于pMD18-T载体、pET-32a载体中,分别转化大肠杆菌,经酶切鉴定、PCR鉴定及DNA序列分析,筛选出阳性克隆。经过序列比对,所克隆的外源基因与报道的K99菌毛蛋白结构基因序列同源性达99.3%。成功克隆分离到的产肠毒素大肠杆菌菌毛的K99基因,为当地产肠毒素性大肠杆菌病疫苗的选择及基因疫苗的研制提供了坚实的理论基础,为产肠毒素性大肠杆菌病检测、预防及基因工程疫苗的研制开辟新的途径。