淫羊藿治疗骨质疏松骨折的网络药理学分析

目的利用网络药理学原理探讨淫羊藿治疗骨质疏松骨折的分子作用机制。方法利用中药系统药理学分析平台(TCMSP数据库)筛选淫羊藿的主要活性成分和作用靶点,应用GeneCards数据库、OMIM数据库、PharmGkb数据库、TTD数据库、DrugBank数据库预测骨质疏松骨折的相关靶点,制作维恩图获取淫羊藿与骨质疏松骨折的共同靶点,运用Cytoscape软件绘制中药-成分-疾病-靶点调控网络,利用STRING数据库进行蛋白相互作用网络的构建与分析。最后,使用R语言和Bioconductor平台进行基因本体富集分析(GO)和基因相互作用通路分析(KEGG)。结果淫羊藿主要是通过23种活性成分、121个作用靶点及155个生物学通路发挥作用治疗骨质疏松骨折。其中主要活性成分为槲皮素、山奈酚和木犀草素;主要核心靶点有AKT1、TP53、Jun、HSP90AA1和CASP3等;关键通路为脂质和动脉粥样硬化信号通路。结论通过网络药理学揭示了淫羊藿通过多成分、多靶点、多通路治疗骨质疏松骨折的作用特点,为进一步的研究和实验工作提供了基础。

“土茯苓-薏苡仁”药对治疗骨性关节炎的网络药理学分析

目的研究探讨“土茯苓-薏苡仁”药对治疗骨性关节炎的关键靶点以及作用机制。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索并筛选“土茯苓-薏苡仁”主要有效活性成分及其作用靶点,通过GeneCards数据库、OMIM数据库、PharmGkb数据库、TTD数据库、DrugBank数据库检索收集“骨性关节炎”的相关靶点,制作Venn图获取“土茯苓-薏苡仁”药对与骨性关节炎的共同靶点,运用Cytoscape软件构建“中药活性成分-骨性关节炎-靶点-疾病”网络,利用STRING数据库构建蛋白相互作用网络。最后运用R语言进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果中药“土茯苓-薏苡仁”对骨性关节炎有治疗作用的活性成分共19个(槲皮素等);发挥治疗作用的关键靶点共81个(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1等);发挥疗效干预的生物学进程主要有对脂多糖的反应、对细胞外刺激的反应等;发挥重要作用的生物学通路主要有脂质和动脉粥样硬化通路、白细胞介素-17(IL-17)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。结论“土茯苓-薏苡仁”药对能够通过多成分、多靶点、多通路治疗骨性关节炎,为后续进一步研究和开展实验工作提供了思路和理论依据。

关节腔注射脐带血单个核细胞治疗膝骨关节炎的相关研究

膝骨关节炎(KOA)是一种严重危害中老年人健康的慢性膝关节退行性疾病,关节软骨的退变损伤、骨赘异常增生、软骨下骨硬化是其主要的病理改变,常引起关节疼痛、肿胀、活动受限、僵硬及畸形,甚至致残,严重影响患者的生活质量。目前临床上KOA的治疗主要包括保守治疗和手术治疗,然而其效果均不能令人满意。脐带血单个核细胞(UCB-MNCs)是脐带血中具有单个细胞核的细胞总称,包含多种异质性细胞群,如造血干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞、淋巴细胞、单核细胞等。在KOA患者膝关节腔内注射UCB-MNCs,利用不同细胞间的协同作用,通过抗炎、调节免疫、修复组织损伤、促进软骨再生等机制,发挥消除或减轻临床症状、改善关节功能、减少关节退行性变、阻止或延缓病程进展等作用,且安全性良好。但是,该方法存在注射剂量、次数、观察指标不统一,以及缺乏严格的单个核细胞质量控制等问题。本文主要对关节腔注射UCB-MNCs治疗KOA的相关研究作一综述。

膝关节软骨损伤疾病治疗方法研究进展

膝关节运动形式具有多样化表现,很容易发生损伤。关节软骨几乎不能自我再生,大多数的损伤是不可逆的,一旦缺损就很难修复,而且容易出现骨关节炎等退行性改变。目前针对膝关节软骨损伤类疾病的治疗方法较多,手术修复软骨损伤是比较理想的治疗方法。主要有关节冲洗清理术、微骨折技术、自体骨移植术、异体骨软骨移植术、人工膝关节置换手术、组织工程技术和基因治疗、生物制剂治疗等其他方法。各种方法都有其各自的特点,通过选择性运用上述治疗可以在短期内改善临床症状,延迟或者避免行关节置换手术,但是临床上有效的软骨损伤修复方法仍是广大学者探索的目标之一。在不久的将来,关节软骨损伤的治疗将会越来越成功,本文现就其治疗方法研究综述如下。

成年大鼠嗅球成鞘细胞的原代培养及形态学研究

目的探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)分离与纯化培养方法并对形态学进行研究。方法取材后采用差速贴壁和阿糖胞苷(Arac)抑制相结合的纯化培养方法培养嗅鞘细胞,并分不同阶段进行观察和NGFRp75和GFAP免疫组化染色鉴定。结果成功培养出高纯度的嗅鞘细胞,胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形三种类型,突起细长编织成网状为其特点。结论差速贴壁和Ara-c抑制相结合的纯化培养方法兼收了两者的优点,实践证实是一种简单经济而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。

带蒂骨瓣联合松质骨髓移植治疗成人股骨头坏死

目的:探讨治疗成人股骨头无菌坏死的最佳治疗方法.方法:对FicatⅡ～Ⅲ期病人分别采用缝匠肌骨瓣、股方肌骨瓣、臀中肌骨瓣和带旋髂深血管的髂骨瓣联合松质骨髓移植4种手术方法进行治疗,疗效采用百分评价去评定,差别行x2检验.结果:4组病人经过平均5年8个月的随访,优良率分别为73.3%、80%、81.6%、82.8%,但差别无显著意义.结论:4种手术方法都有较好的疗效,其中,臀中肌骨瓣联合松质骨髓移植手术简单、创伤较小,适应证广,值得临床应用.

成年大鼠嗅球成鞘细胞的分离培养及形态学研究

目的:探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactoryensheathingcellsOECs)的分离培养方法并观察其形态。方法:采用差时贴壁和阿糖胞苷(Ara-c)抑制相结合的方法培养嗅鞘细胞,并在不同阶段进行观察和行NGFRp75和GFAP免疫组化染色鉴定。结果:成功培养出高纯度的嗅鞘细胞,胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形3种类型,突起细长编织成网状。结论:差时贴壁和Ara-c抑制相结合的纯化培养方法是一种简单而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。

成年大鼠嗅粘膜细胞原代培养及形态学研究

为了探讨大鼠嗅粘膜嗅鞘细胞(OECs)的分离与纯化培养方法并对其形态学进行研究,我们自鼻腔嗅粘膜取材后采用差速贴壁、机械刮除和阿糖胞苷(Arac)抑制相结合的纯化培养方法培养嗅粘膜细胞,并分不同阶段进行镜下观察及p75NGFR和GFAP免疫组化染色鉴定。结果显示,自嗅粘膜组织可以培养出四种细胞:梭形细胞、双极细胞、窝形细胞和大细胞。其中大部分梭形和双极细胞呈p75NGFR或GFAP免疫反应阳性,属于OECs。结果提示本文介绍的培养方法可以培养出嗅粘膜OECs;差速贴壁、机械刮除和Arac抑制相结合方法可纯化OECs。

嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤(英文)

背景:嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤在众多疗法中效果较佳,成为最有前景的治疗方法之一。目前移植方法为局部移植,存在操作复杂、创伤大、重复移植治疗困难等缺点。寻找一种简单易行且疗效好的移植方法成为各国学者研究的热点。目的:分析嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的可行性和疗效。方法:制备Wistar大鼠脊髓半切模型,随机分4组:嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组、D/F12静脉移植组和空白对照组。定期行CBS功能评分及组织学检查,评价脊髓修复情况。结果与结论:嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组的功能恢复和组织学改变优于D/F12静脉移植组和空白对照组,嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组间无显著差别。说明嗅鞘细胞静脉移植可向脊髓损伤部位迁移并修复脊髓损伤,其疗效与嗅鞘细胞髓内局部移植相当。

螺纹髋臼假体初始稳定性研究

目的：研究一种新型螺纹髋臼假体的设计及其初始稳定性。方法：螺纹髋臼假体通过直接旋入固定，对照组光面髋臼假体通过三枚松质骨螺钉固定。分别测定轴向、顺螺纹、反螺纹三个方向上的应力，以测定假体的稳定性。结果：螺纹髋臼假体的稳定性好，统计学分析有显著性意义。

嗅鞘细胞移植联合应用甲基强的松龙修复急性脊髓损伤

目的探讨嗅鞘细胞髓内移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复脊髓损伤的可行性和疗效,观察甲基强的松龙与嗅鞘细胞的相互作用。方法将Wistar大鼠做成脊髓半切模型,随机分成髓内单独移植嗅鞘细胞组(OEC)、嗅鞘细胞联合应用甲基强的松龙组(OEC+MP)、单独应用甲基强的松龙组(MP)和对照组(CG)共四组,分期进行联合行为学综合评分(CBS评分)及组织学检查,评价各组对脊髓修复情况。结果CBS评分OEC组及OEC+MP组较MP组及CG组在3周后各时段差别有显著意义(P<0.01);OEC组和OEC+MP组没有明显差别(P>0.05);MP组与CG组有显著差别(P<0.05)。OEC组及OEC+MP组组织学改变与MP组及CG组有显著差别,前两组间无显著差别。结论嗅鞘细胞髓内移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复脊髓损伤具有很好的疗效,但未见MP与OEC的明显协同作用。

低温保存的嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究

目的:观察低温保存复苏后嗅鞘细胞(OECs)局部移植治疗脊髓损伤(SCI)的疗效,探讨低温保存对嗅鞘细胞活性的影响。方法:建立大鼠T10节段脊髓半切损伤模型56只,随机分为四组,每组12只:新鲜OECs移植组(A组),冻存OECs移植组(B组),D/F12培养液移植组(C组)和空白对照组(D组)。A组损失伤局部行新鲜OECs移植,B组将处于对数生长期的OECs冻存3个月,复苏后(用双苯亚甲胺标记)移植到脊髓半切模型大鼠脊髓损伤区。术后第1天、1、2、3、4、6、8及10周时进行联合行为学(CBS)综合评分,术后5周和10周时取材观察移植细胞存活及迁移情况;HE染色及嗜银染色观察脊髓组织病理及轴突情况;NGFRp75免疫组织化学染色情况。结果:术后第1天,2、10周时CBS评分,A组分别为85.78±1.07、58.80±5.00、6.52±2.37;B组分别为86.12±1.29、60.06±6.51、8.15±2.26;C组分别为86.4±1.03、66.28±7.00、30.65±5.60;D组分别为86.75±1.37、69.85±6.61、34.13±5.38。A、B两组间无明显差别(P>0.05);C组与D组间比较无差异(P>0.05);A组及B组较C组和D组在2周后各时段差别有显著意义(P<0.05)。组织学方面,HE染色和嗜银染色A、B两组在术后5周可见多量突起经近侧断端向损伤区域生长,10周时可见神经纤维跨越损伤区域,而C、D组未见有神经纤维跨越损伤区;NGFRp75免疫组化染色,无论5周还是10周,A、B两组在损伤部位均可见阳性染色区域,C、D组未见有阳性着色。术后5周时A、B两组可检测到荧光标记细胞,且可见细胞发生迁移。结论:低温保存的OECs脊髓局部移植治疗SCI与新鲜OECs移植治疗效果无差别。

嗅鞘细胞培养上清胶质源性神经生长因子含量的测定

目的 观察嗅鞘细胞培养上清胶质源性神经生长因子 (GDNF)的含量随培养时间的变化关系 ,为选择嗅鞘细胞移植的最佳时间提供理论依据。方法 采用差速贴壁纯化培养方法培养嗅球及嗅粘膜嗅鞘细胞 ,培养 2 1天 ,3天留取标本一次 ,采用ELISA法对上清GDNF进行测定。结果 GDNF的含量随培养时间的延长逐渐升高 ,但绝对含量很低。结论 培养的嗅鞘细胞能分泌GDNF ,细胞移植在

嗅粘膜移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复急性脊髓损伤

目的探讨嗅粘膜髓内移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复脊髓损伤的可行性和疗效,观察甲基强的松龙与嗅鞘细胞的协同作用。方法将Wistar大鼠做成脊髓半切模型,随机分成髓内单独移植嗅粘膜组(OM)、嗅粘膜联合应用甲基强的松龙组(OM+MP)、单独应用甲基强的松龙组(MP)和对照组(CG)共四组,分期进行联合行为学综合评分(CBS评分)及组织学检查,评价各组脊髓修复情况。结果CBS评分OM组及OM+MP组较MP组及CG组在3周后各时段差别有显著意义(P<0.01);OM组和OM+MP组没有明显差别(P>0.05);MP组与CG组有显著差别(P<0.05)。OM组及OM+MP组组织学改变与MP组及CG组有显著差别,前两组间无显著差别。结论嗅粘膜髓内移植联合应用大剂量甲基强的松龙修复脊髓损伤具有很好的疗效,但未见MP与OM的明显协同作用。

氨甲环酸及引流管在全膝关节置换过程中的合理应用

背景:全膝关节置换后失血量大是当前临床工作中面临的重要问题,氨甲环酸可采用多种给药方式减少术后失血,大多在术后放置引流管,而局部应用氨甲环酸术后不放置引流管的方式尚未有明确的评估。目的:观察局部应用氨甲环酸对全膝关节置换后失血量的影响,并探讨引流管的合理应用方式。方法:将90例单侧全膝关节置换患者随机分为3组,A组生理盐水50 mL关节腔注射,术后放置引流管,并夹闭4 h;B组氨甲环酸1.6 g溶于生理盐水50 mL后关节腔注射,术后放置引流管,并夹闭4 h;C组氨甲环酸1.6 g溶于生理盐水50 mL后关节腔注射,术后不放置引流管。记录置换术中出血量,置换后2 d内每天记录血红蛋白、引流量、输血量及输血例数,并计算总失血量与隐性失血量,统计置换后7 d下肢深静脉血栓形成例数。对3组所有患者进行定期随访。结果与结论:(1)3组患者置换前资料、置换术中出血量差异无显著性意义(P>0.05);(2)术后总失血量、输血例数,B、C组明显少于A组,差异有显著性意义(P<0.05),B、C组间差异无显著性意义(P>0.05);(3)B组引流量明显少于A组,差异有显著性意义(P<0.05);(4)3组间隐性失血量差异无显著性意义(P>0.05);(5)3组患者均无深静脉血栓形成;(6)结果提示,局部应用氨甲环酸能明显减少全膝关节置换后引流量和总失血量,降低输血率,但对减少隐性失血量效果不明显,且不增加术后深静脉血栓形成的概率;局部应用氨甲环酸术后可以不放置引流管,方法简单、安全、有效。