柠檬苦素类化合物生物活性研究进展

柠檬苦素类化合物是一类高度氧化的四环三萜类次生代谢产物,主要存在于芸香科(Rutaceae)和楝科(Meliaceae)植物中,包括柠檬苦素、诺米林和黄柏酮等物质。本文对柠檬苦素类化合物的生理活性进行概述,总结其各类生物学活性及作用机制,为柠檬苦素进一步用于健康保护、食品开发和农业生产等提供参考。

冻融胚胎移植妊娠结局的影响因素分析

目的探讨患者年龄、子宫内膜准备方案、移植胚胎数、胚胎的发育潜能和胚胎完整性对冻融胚胎移植（FET）妊娠结局的影响。方法选择2012年2月至2014年12月在海军总医院生殖中心接受FET治疗的1 346例患者,1 346个FET周期。按年龄〈30岁、30~〈35岁、35~〈40岁、≥40岁分为A、B、C、D四组;根据移植前不同子宫内膜准备方案分为：自然周期（N组）、人工周期（H组）和促排周期（S组）;根据移植胚胎数2、3枚分为E、F两组;根据解冻胚胎继续培养后卵裂球是否分裂生长,每个FET周期所移植胚胎中进一步卵裂的胚胎个数n,并据此分为I（n=0）,II（n=1）,III（n=2或3）三组;根据复苏后移植胚胎卵裂球的完整性分为两组：完整组和受损组。分别比较各组的妊娠结局。结果年龄方面,A组、B组、C组的妊娠率和着床率均高于D组,差异均具有统计学意义（P〈0.01）;自然周期、人工周期及促排周期3种子宫内膜准备方案,妊娠率和种植率三组间两两比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;移植2枚或3枚胚胎,对妊娠结局（妊娠率45.56%vs.45.02%）影响不大（P〉0.05）,但两组着床率（26.07%vs.17.40%）有显著性差异（P〈0.05）;胚胎解冻后继续培养,随着进一步卵裂胚胎数目的增加,妊娠率（分别为25.27%、39.29%、52.37%）和着床率（分别为10.74%、19.79%、29.16%）均有逐渐升高的趋势,且三组的妊娠率和着床率两两比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01）;胚胎完整组的妊娠率略高于胚胎受损组（45.08%vs.40.15%）,但无统计学差异（P〉0.05）,而相比较,胚胎完整组着床率显著高于胚胎受损组（24.65%vs.18.85%,P〈0.05）。结论移植前不同的子宫内膜准备方案对妊娠结局无显著影响;移植2枚或3枚胚胎对妊娠结局影响不大;年龄和卵裂球的完整性是影响FET成功的重要因素;冻融胚胎提前解冻并培养后,选择进一步卵裂的胚胎进行移植有助于提高妊娠率和着床率。

褪黑素对老化卵母细胞体外发育能力的改善效果评价

目的探讨体外培养阶段(IVC)添加褪黑素(MT)对卵母细胞老化引起发育受损的改善效果。方法采用不同浓度的过氧化氢(H_2O_2)处理小鼠MII期卵母细胞诱导老化,浓度分别为0(对照组)、10、50、100、150μmol/L,体外受精(IVF)后统计各组二细胞率、囊胚形成率,检测老化卵母细胞的线粒体活性及丰度(Mitotracker Red、JC-1)、活性氧(ROS)水平、线粒体拷贝数等指标;在100μmol/L H_2O_2处理条件下,老化卵母细胞在IVF后的培养阶段分别添加不同浓度褪黑素(10-5、10-7、10-9 mol/L),统计二细胞率、囊胚率,并且分别检测各组获得囊胚的细胞数及凋亡率。结果不同浓度H_2O_2诱导卵母细胞老化后,囊胚发育率随H_2O_2浓度的升高而降低,50μmol/L和100μmol/L H_2O_2组囊胚形成率分别为(26.27±0.06)%和(28.46±3.45)%,相比对照组的(34.90±1.77)%显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);在H_2O_2诱导老化卵母细胞中,100μmol/L、150μmol/L H_2O_2浓度时,ROS水平相比对照组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而活性线粒体的丰度及拷贝数呈现下降趋势,膜电位呈上升趋势,但相比对照组无显著性差异(P>0.05);100μmol/L H_2O_2处理诱导卵母细胞老化后,在培养液中添加10-9 mol/L褪黑素组与老化对照组相比,囊胚率[(29.42±2.39)%vs.(20.87±4.12)%]、囊胚细胞数(39.36±9.78vs.37.91±4.25)均显著升高,凋亡率显著下降(2.57%vs.3.18%),差异均有统计学意义(P<0.05);并且这些指标均达到与未经老化处理组的相似发育水平。结论老化卵母细胞体外受精后发育率和发育质量偏低的现象,可以通过在受精后体外培养阶段添加褪黑素得到改善。

姜黄素对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响

目的探讨姜黄素对小鼠卵母细胞体外成熟质量及早期胚胎发育能力的影响。方法获取小鼠卵丘卵母细胞复合体(COC),分别用含(0、5、10、15)μmol/L姜黄素的体外成熟培养液培养18 h。根据卵母细胞极体的排出计算成熟率;体外受精(IVF)后根据受精率、卵裂率、囊胚形成率及囊胚细胞数判断胚胎发育情况;线粒体荧光探针Mito-Tracker Green标记法检测线粒体在卵母细胞内的分布;实时定量PCR检测线粒体合成相关基因线粒体转录因子A(TFAM)和解偶联蛋白2(UCP2)的mRNA水平;免疫荧光细胞化学染色法检测TFAM、UCP2的蛋白表达;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)负载法检测卵母细胞内活性氧(ROS)水平。结果卵母细胞体外成熟率和早期胚胎发育情况各组无显著性差异;姜黄素浓度与卵母细胞内线粒体成簇分布呈正相关;5μmol/L姜黄素处理组TFAM、UCP2 mRNA表达显著高于其他各组,TFAM、UCP2的蛋白表达水平与对照组相比显著升高;5μmol/L姜黄素处理组卵母细胞内ROS水平显著低于对照组。结论姜黄素处理显著改变小鼠体外成熟卵母细胞中线粒体的分布,增加线粒体合成相关基因的表达,降低卵母细胞内ROS水平,但并未对体外成熟率及早期胚胎发育能力造成显著的影响。

单囊胚移植在新鲜移植周期与冻融移植周期中的应用比较

目的:探讨新鲜移植与冻融移植对单囊胚移植妊娠结果的影响。方法:回顾性分析2013~2015年在海军总医院行单囊胚移植的324例患者,其中新鲜移植组周期数为133例、冻融移植组周期数为191例,比较2组患者基本条件、临床妊娠率、流产率、分娩率等指标。结果:新鲜移植组和冻融移植组的患者基本条件中,除了囊胚级别(1.6±0.5 vs 1.9±0.4)、D5囊胚比例(100%vs 94.27%)、获卵数(17.5±5.2 vs 21.6±9.9)有显著性差异外(P<0.01),其余无显著性差异(P>0.05);新鲜周期移植组临床妊娠率低于冻融移植组(51.13%vs 62.30%),具有显著性差异(P<0.05);流产率(17.65%vs 19.33%)、分娩率(42.10%vs 49.21%)无统计学差异(P>0.05)。结论:冻融移植周期中单囊胚移植可取得比新鲜移植周期更高的临床妊娠率。