miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制。方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实验检测癌组织和细胞系miR-1269a的表达水平。将miR-1269a的mimics和inhibitor分别转染食管癌细胞KYSE30后,用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测miR-1269a对KYSE30细胞增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响。通过生物信息学软件预测miR-1269a的靶基因,并通过WB实验和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a对靶基因的调控作用。转染SOX6质粒后,采用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测SOX6对KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响,并利用回复实验进一步验证结果。结果:食管癌组织中miR-1269a的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞系中miR-1269a的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a mimics转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著高于mimics NC组(P<0.05或P<0.01);inhibitor转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著低于inhibitor NC组(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a可与SOX6的3’UTR区相结合,且过表达miR-1269a后,KYSE30细胞的SOX6表达水平和荧光素酶报告基因的活性均显著降低(P<0.05)。回复实验表明,高表达miR-1269a可以促进食管癌细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01),同时高表达SOX6后,miR-1269a的促进作用出现部分逆转。结论:miR-1269a在食管癌组织和细胞系中表达上调,能够促进KYSE30细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成等恶性生物学行为,其机制可能是通过抑制靶基因SOX6实现的。

幽门螺杆菌的治疗现状和研究进展

幽门螺杆菌（helicobacter pylori,H.pylori）是一种定植于胃黏膜的微需氧革兰阴性杆菌,其在世界范围内的感染率超过50%。感染主要在儿童早期获得,通过粪-口或口-口传播,可在宿主体内持续终生,并且大部分为无症状性感染。然而H.pylori长期感染是慢性萎缩性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素,并与胃腺癌、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤及原发性胃非霍奇金淋巴瘤等胃部恶性疾病的发病密切相关。

胃癌高发区幽门螺杆菌对胃上皮细胞系GES1蛋白质组的影响

目的探究胃癌高发区分离的幽门螺杆菌(H.pylori-400)对正常胃上皮细胞系GES1细胞蛋白质组的影响。方法C-13呼气实验阳性患者胃镜下取下胃黏膜,分离、培养并鉴定H.pylori-400。将H.pylori-400与GES1细胞按50∶1的比例共培养,提取细胞RNA,RT-qPCR法检测炎性因子IL-8、IL-1β和TNF-α的mRNA表达。收集共培养细胞蛋白,用高效液相色谱-质谱联用检测蛋白质组的改变,lable-free进行定量分析。选择差异表达蛋白进行GO和KEGG富集分析,并筛选出其中的关键基因(Hub)。结果在胃癌高发区(河北井陉地区)分离培养并鉴定出H.pylori-400,其能够促进胃上皮细胞GES1的IL-8,IL-1β和TNF-α炎性因子的mRNA表达。GES1感染H.pylori-400后,373个蛋白发生显著变化(|Fold change|≥2),其中143个蛋白降低,230个蛋白升高。这些差异表达蛋白经富集分析后表明,H.pylori-400可能通过调节细胞周期、T细胞免疫活性以及P53通路调节炎性因子分泌,进而导致肿瘤发生。结论胃癌高发区分离的H.pylori-400能够促进炎性因子表达,通过影响胃上皮细胞GES1蛋白质组而促进肿瘤发生。

Mda-7/IL-24与C-myb在Burkitt淋巴瘤中的表达及其相关性研究

目的深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平、相关性及其临床意义。方法收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb表达水平进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及IPI指数之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24及C-myb蛋白表达水平与患者生存期之间的关系,并制作生存曲线。结果与正常淋巴结组织相比,Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24的表达水平明显降低,而C-myb的表达水平则明显增高;65例Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平呈明显的负相关(r=-0.474 9);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者生存期较短(P<0.05)。结论 Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平呈明显负相关,低表达Mda-7/IL-24或高表达C-myb是Burkitt淋巴瘤患者临床预后较差的指标。

含幽门螺杆菌特异性抗体牛奶清除幽门螺杆菌效果的临床随机试验

目的:比较观察抗幽门螺杆菌抗体牛奶根除幽门螺杆菌的效果。方法:用4株幽门螺杆菌(1株为标准菌株,3株为本地流行菌株)免疫奶牛,制备出抗幽门螺杆菌抗体牛奶。本次试验共筛选148例患者,C-14呼气试验阳性的患者为72例,最后符合入选标准的为39例,将符合标准的患者随机分为试验组和对照组,分别为21例和18例,试验组饮用含特异性幽门螺杆菌抗体的牛奶,对照组饮用普通牛奶,连续饮用2个月后,观察结果。结果:试验组的21名对象中,9人C-14呼气试验转为阴性,10人降低。有效清除率达42.86%,而对照组未有清除,两组清除率有统计学意义(P=0.005,P<0.05)。结论:抗幽门螺杆菌抗体牛奶具有多克隆性和很高的效价,能够有效清除胃内幽门螺杆菌。

对羟基桂皮醛诱导食管癌TE-13细胞分化及其作用机制

目的:探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛(p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP)对食管癌细胞株TE-13的分化作用及其机制。方法:用流式细胞术检测质量浓度为10、20、40Dμg/ml的CMSP处理TE-13细胞对该细胞凋亡和细胞周期分布的影响,用吉姆萨染色、电镜观察TE-13细胞形态学改变,Real-time PCR和ELISA方法检测TE-13细胞中肿瘤相关抗原CEA和SCC的表达,用克隆集落形成实验、Transwell迁移实验检测不同质量浓度CMSP对TE-13细胞的增殖、迁移能力的影响,Western blotting检测CMSP(20μg/ml)对TE-13细胞中MAPK通路中各蛋白水平的影响。结果:CMSP可抑制食管癌Kyse30、TE-13、Eca109和Kyse180细胞的增殖[(1.6±0.2)×10~4 vs(3.8±0.3)×10~4、(1.7±0.3)×10~4 vs(4.5±0.4)×10~4、(2.5±0.1)×10~4 vs(4.0±0.4)×10~4、(1.5±0.1)×10~4vs(2.5±0.3)×10~4个细胞,均P<0.01],而对人食管上皮细胞无明显作用(P>0.05)。CMSP处理TE-13细胞后:(1)随CMSP质量浓度(10、20、40μg/ml)和处理时间的增加(24、48、72 h),G_0/G_1期细胞数量均增加、S期细胞数量减少(P<0.01或P<0.05),但细胞凋亡率无明显变化(P>0.05);(2)细胞出现典型分枝状突起,且随CMSP质量浓度增加更显著(P<0.05);(3)CEA和SCC水平显著降低(P<0.01);(4)抑制TE-13细胞的增殖和迁移能力,诱导细胞分化;(5)p-P38蛋白水平明显升高(P<0.01),而p-ERK、P-SPKA/JNK蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:CMSP抑制食管癌TE-13细胞的增殖、诱导其分化,其作用机制可能与上调MAPK信号通路中P-P38和下调P-ERK、P-SPKA/JNK有关。

苷泰胶囊抗乙肝病毒的实验研究

目的观察苷泰胶囊对乙肝病毒复制的抑制作用。方法使用鸭乙肝炎病毒使1日龄的北京鸭感染,造模7 d后给药(ig),使用斑点杂交法检验用药后(5、10 d)及停药5 d后血清中的DHBV DNA含量;以转染的2.2.15细胞为模型,分别加入不同浓度的苷泰胶囊药液,分别以酶联免疫法及斑点杂交法检测培养上清液中的HbsAg,HbeAg及HBV DNA的水平。结果 (1)用药后10 d和停药后3 d鸭血清中的DHBV DNA水平显著低于给药前(P<0.01,P<0.05);(2)苷泰胶囊可以明显地抑制2.2.15细胞HbsAg、HbeAg的分泌(P<0.01,P<0.05),其半数抑制浓度分别为1 158.92μg/mL和1 794.14μg/mL;(3)苷泰胶囊明显地抑制2.2.15细胞HBV-DNA的复制,其半数抑制浓度为701.27μg/mL。结论实验结果表面苷泰胶囊对2.2.15细胞及鸭乙肝病毒感染的模型均具有一定抑制作用并呈剂量依赖性。

木鳖子提取物对羟基桂皮醛对小鼠黑色素瘤移植瘤生长和转移的影响及其作用机制

目的:体内外实验探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛[Momordica cochinchinensis(Lour.)Spreng. phydroxycinnamaldehyde,CMSP]对小鼠黑色素瘤移植瘤生长和转移的影响及其作用机制。方法:建立荷瘤小鼠动物模型,并将18只C57BL/6小鼠随机分成3组(每组6只):对照组(腹腔注射0.1 ml生理盐水)、CMSP治疗组(分别腹腔注射0.1 ml 1、2 mg/ml CMSP),给药的第5天开始,每次给药前用卡尺分别测量和计算小鼠移植瘤的体积,实验结束后称量移植瘤的质量;H-E染色后光镜观察肝组织的病理学变化;免疫组织化学SP法观察移植瘤组织E-cadherin和vimentin蛋白的表达。采用细胞划痕和Transwell实验分别检测CMSP实验组(10、20μg/ml)黑色素瘤B16细胞24、48 h的迁移能力,qPCR法检测CMSP处理24 h后B16细胞EMT相关mRNA表达,WB法检测CMSP处理B16细胞48 h后β-catenin、p-β-catenin(Ser675)、vimentin和E-cadherin蛋白的表达水平。结果:CMSP治疗组小鼠移植瘤平均体积和肿瘤质量明显降低(均P<0.05);对照组小鼠肝脏中转移灶的数量明显多于CMSP(1、2 mg/kg)治疗组(均P<0.05),CMSP(2 mg/kg)处理组小鼠的肝组织内未发现明显转移灶。CMSP治疗组(1、2 mg/kg)移植瘤组织中E-cadherin蛋白表达水平明显高于对照组(均P<0.05),而vimentin蛋白表达显著低于对照组(均P<0.01)。体外实验中,CMSP实验组(10、20μg/ml)B16细胞24、48 h后划痕愈合率较对照组均明显降低(均P<0.05)。20μg/ml CMSP处理B16细胞24、48 h后穿过Transwell小室的细胞数较对照组则显著下降(均P<0.01)。CMSP(10、20μg/ml)处理B16细胞后β-catenin mRNA表达水平较对照组明显降低(均P<0.01),E-cadherin m RNA表达水平则明显升高(均P<0.05),而vimentin m RNA表达水平在10μg/ml处理组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),20μg/ml处理组则明显降低(P<0.01)。与对照组相比,CMSP实验组(10、20μg/ml)处理B16细胞后β-catenin、p-β-catenin和vimentin蛋白表达均显著降低(均P<0.01),而E-cadherin蛋白表达则明显升高(均P<0.01)。结论:CMSP能够抑制小鼠黑色素瘤移植瘤的生长和转移,其作用机制可能与抑制wnt/β-catenin通路的活性相关。

档案馆文化教育功能的拓展——从美国档案机构教学合作谈起

关于综合档案馆"五位一体"的功能定位,学界对其文化教育功能发挥的相关探讨和研究一直热情很高,但实际上秉着打造文化休闲和爱国主义教育基地宗旨的档案馆建设效果却往往差强人意。本文通过分析和研究美国总统图书馆、国家档案馆等相关档案机构对外提供的教学资源,对比中美在这些方面发挥的文化教育作用的差异,为拓展当前我国档案馆文化教育功能提出一些借鉴。

学术期刊的“企业化”与决胜“市场化”

随着国家新闻出版体制改革的逐渐深入,非时政类报刊的转企改制已经在行业内迅速推开。新闻出版总署有数据显示,目前已有1300家非时政类报刊完成转制,201 1年内还有5 000多家非时政类报刊开始转制。作为非时政类报刊中的重要一分子,原来所属事业性质的部分学术期刊,真正迎来了"企业化"的机遇和考验。对于那些已经转制成为企业性质的学术期刊主体,如何在"企业化"的过程中走出一条生存和发展之路,是摆在每一位学术期刊从业人员面前的重要课题。

纽约及伦敦金融中心对北京建设国际金融中心的启示

北京在我国经济和金融领域的地位举足轻重,在承担全国经济、金融和商业调控中心的同时,要发展称为国际化大都市,客观上要求北京发展成为国际金融中心城市。提升北京的金融竞争力,打造国际金融中心是一项长期的战略,因此借鉴世界一流金融中心的优势和长处,是北京应对国际竞争的需要。在对纽约、伦敦等国际金融中心的研究中发现,金融中心的形成是由经济和金融业发展的程度决定的,同时,监管制度和政府政策发挥着重要的推动作用。所以,北京在建设国际金融中心的过程中,一方面要发挥自身优势,另一方面要积极借鉴纽约、伦敦等国际一流金融中心的优势,完善和成熟金融市场,提升金融业的活力,逐步建立于国际接轨的金融监管体系。

越轨的他者——《局外人》和《人间失格》中“局外人”形象比较

法国作家加缪在《局外人》中塑造的默尔索和日本作家太宰治在《人间失格》中塑造的大庭叶藏表现出诸多相似之处,如两位主人公都被其所在的社会视为异端,都属于“局外人”形象。文章借鉴美国社会学家贝克尔的研究成果,深入剖析了“局外人”的内蕴及其越轨行为出现的社会原因。默尔索和大庭叶藏都看穿了人生的荒谬和世人的伪善,有意不去融入社会,从而与现实人生产生疏离。两个人物形象都试图通过“中和化技术”消除现有社会规范的束缚,从而走向越轨;并且,他们还通过消除自己的能动性来逃避越轨所必须承担的责任。因此可以将《局外人》和《人间失格》看作“局外人”的自我告白与自我辩护。

4例复杂先天性心脏病术后并发肝素诱导的血小板减少症患者的监测

2013年7月至2015年2月中南大学湘雅医院心脏大血管外科收治的复杂先心病接受心脏直视手术的患者中有4例先后出现肝素诱导的血小板减少症(heparin-induced thrombocytopenia,HIT),通过严密动态监测血小板计数,观察HIT所致的栓塞性皮肤损伤情况,监测阿加曲班用药效果等综合治疗,3例痊愈,1例死亡。HIT是接受肝素治疗出现的罕见的严重并发症,栓塞发生率和病死率较高。早期识别、早期诊断高风险人群可以有效改善预后。

高校英语口语课堂中交际教学理念的应用实践微探

为了摆脱"哑巴英语",使大学生能够利用所学英语知识与人进行流畅的沟通,真正做到学以致用,各高校开始将交际教学这一理念引入到了英语口语的教学之中,期望这一方法的应用能够使大学生的英语口语水平达到预期值。该文将对交际教学的概念以及使用原则进行介绍,并就交际教学在高校口语中的现状以及优化方式开展论述,旨在为各高校英语教学同仁予以一定的启示。

论酒店管理专业操作实践课程考试改革及优化策略

在高校课程改革期间,实践类课程受到传统实践教学体制的影响,体现为形式单一,内涵缺失,而且在课程内容上,实践与理论大相径庭;课程考核方式上,难免出现以课程和教材的难度、深度和考试的分数来衡量学生。为促进实践课程的时效性,本文侧重探索了酒店管理专业操作实践课程考试改革及优化策略。

英语课堂教学质量的制约因素及改进对策

自从我国加入世贸组织之后,对外交流机会越来越多,且社会对专业型外语人才需求程度也越来越高,面对如此形势,高校必须加大对高素质外语人才的全面培养工作。然而,当前在众多大学英语课堂中,却是因受到各种因素的影响而表现出这样或是那样的问题,直接影响到大学英语课程的教学水平与质量。为此,文章从分析当前大学英语课堂教学特点入手,对影响其课堂质量的相关因素展开有效分析,进而提出相应的改进措施。

香加皮杠柳苷联用TRAIL对胃癌SGC-7901和MGC-803细胞的作用及其机制

目的:探讨香加皮杠柳苷(cortex periplocae,CPP)联用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对胃癌细胞的作用及其机制。方法:人胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803培养完成后,采用50、100、200 ng/ml的CPP和1μg/ml的TRAIL单用或联合处理。MTS法检测SGC-7901和MGC-803细胞的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡率,Western boltting检测pro-BID、Mcl-1、cleaved caspase-3、DR4、DR5的表达水平。结果:SGC-7901和MGC-803细胞经CPP(50、100、200 ng/ml)和TRAIL(1μg/ml)联合处理24 h后,细胞增殖率明显低于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(P<0.05或P<0.01)。SGC-7901和MGC-803细胞凋亡率均明显高于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(P<0.05或P<0.01)。SGC-7901和MGC-803细胞中pro-BID、Mcl-1表达水平明显降低(均P<0.05),cleaved caspase-3表达水平明显升高(P<0.05),DR4和DR5受体的表达水平升高(均P<0.05)。结论:CPP协同TRAIL可明显诱导人胃癌SGC-7901和MGC-803细胞凋亡,增强人胃癌细胞对TRAIL的敏感性。

情景模拟及“脚手架”教学法在专门用途英语口语教学中的应用

本文首先对笔者教学背景和专门用途英语口语教学中的教学难题进行了阐述:学生在酒店行业英语面试和用英语对客服务中有困难,自信不足。其次结合文献综述,通过事例介绍了情景模拟和“脚手架”教学法在解决上述两个困难中的应用,指出其既有利于提高学生英语口语的自信,提高学生酒店行业面试中的英语口语能力又能促进学生的对客服务能力,对专门用途英语口语教学有一定的启示。

非小细胞肺癌组织中高表达的miR-1269对肺癌细胞A549生物学行为的影响

目的:探讨miR-1269在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)组织中的表达和对人NSCLC A549细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法:选取2017年1月至2018年1月在河北医科大学第四医院胸外科进行首次手术切除的34例新鲜NSCLC癌组织及相应的癌旁组织,应用qRT-PCR检测NSCLC癌组织及相应的癌旁组织中miR-1269的表达水平。将miR-1269 mimics和mimics NC转染至A549细胞后,应用MTS实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,流式细胞术检测其细胞周期的变化。生物信息学软件预测miR-1269的靶基因,并通过Western blotting和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269对靶基因的调控作用。采用Western blotting检测已转染的A549细胞的细胞周期依赖性激酶抑制剂p21、细胞周期蛋白D2以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白ZEB2和E-cadherin的表达情况。结果:NSCLC癌组织中miR-1269的表达水平显著高于对应的癌旁组织(2.81±2.27 vs 1.61±1.36,P<0.05)。miR-1269 mimics转染组A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著高于空白对照组和mimics NC转染组(均P<0.01)。转染miR-1269-mimics的A549细胞S期细胞比例明显高于mimics NC转染组[(46.54±1.57)%vs(23.32±3.15)%,P<0.01]。miR-1269可与FOXO1基因3’端非翻译区的结合位点相结合,且过表达miR-1269后,A549细胞中FOXO1的表达水平及荧光素酶报告基因的活性均明显降低(均P<0.01)。miR-1269 mimics转染组A549细胞中p21、E-cadherin蛋白表达水平降低(均P<0.05),而CyclinD2、ZEB2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论:miR-1269在NSCLC组织中表达上调,并且能够促进A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力和影响细胞周期进程;其作用机制可能与靶向调控抑癌基因FOXO1的表达有关。

云南边远地区中小学教师远程培训网络课程技术与设计元素研究

本论文在对调查数据进行统计分析的基础上,对云南边远地区中小学教师远程培训课程的技术与设计元素进行探讨,以期促进符合云南边远地区实际的远程培训网络课程构架。