基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定的凹叶景天正丁醇部位差异性研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)法建立凹叶景天正丁醇部位的指纹图谱,并测定其中没食子酸、原儿茶酸、异槲皮苷的含量。方法Thermo ODS-2 HYPERSIL色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(D)-0.12%磷酸水(B),梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),检测波长为260 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。以异槲皮苷为参照峰,建立10个不同产地凹叶景天药材正丁醇部位的指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析对指纹图谱进行差异性分析。同法测定凹叶景天正丁醇部位的没食子酸、原儿茶酸、异槲皮苷的含量。结果10个不同产地凹叶景天的正丁醇部位共标定18个共有峰,相似度为0.702~0.974,指认出3个色谱峰,分别为没食子酸、原儿茶酸和异槲皮苷。聚类分析将样品聚为3类,筛选主成分4个,累计的总方差贡献率为93.447%。没食子酸、原儿茶酸和异槲皮苷在测定范围内(7.07~106.08,1.51~22.68,22.86~342.80μg·mL^(-1))呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.43%,97.38%,100.25%,RSD值分别为3.02%,1.38%,2.59%。10个不同产地的凹叶景天药材正丁醇部位的没食子酸、原儿茶酸和异槲皮苷的含量分别为0.2754~2.3050,0.0320~0.3419,0.6477~5.4040 mg·g^(-1)。3种成分的含量高低顺序整体上呈现出:异槲皮苷>没食子酸>原儿茶酸,原儿茶酸、异槲皮苷含量最高的产地为浙江宁海,没食子酸含量最高的产地为广西隆安县。结论该研究建立的方法稳定可靠、重复性良好,为凹叶景天质量控制与评价提供科学依据。