慢病毒介导长链非编码RNA XLOC_015548基因编辑的C2C12细胞模型建立

目的:探讨长链非编码RNA XLOC_015548基因敲减或过表达后C2C12小鼠成肌细胞中目的基因及成肌分化因子的表达情况。构建XLOC_015548基因编辑成肌细胞模型,为今后进一步实验提供基础。方法:根据RNA测序结果得出相关序列,拟构建XLOC_015548敲低及过表达慢病毒载体,并对C2C12成肌细胞系进行转染,制备出XLOC_015548基因编辑成肌细胞模型。使用荧光显微镜观察慢病毒感染细胞后绿色荧光蛋白质的表达。当XLOC_015548被敲除或过表达后,采用RT-qPCR及Western Blot检测XLOC_015548及成肌相关基因的表达量。结果:采用1、2、5、10、20、30的梯度感染复数(MOI)对成肌细胞进行转染,经嘌呤霉素筛选后,成功构建以MOI为20感染条件的XLOC_015548基因编辑成肌细胞模型。利用RT-qPCR初步检测出过表达XLOC_015548时,肌源性分化因子Myod的表达量升高,敲低XLOC_015548时则得到相反的结果。Western Blot实验提示过表达XLOC_015548可以提高Myod、Myogenin蛋白表达量,敲低后则得到相反的结果。结论:本研究构建了一种新的长链非编码调节因子XLOC_015548的基因编辑成肌细胞模型,初步验证了各组细胞模型中XLOC_015548的表达量,并探究其表达量与肌源性分化因子的相关性,该细胞模型可用于后续对失神经肌萎缩等骨科相关疾病的基础研究。

地舒单抗治疗绝经后骨质疏松性骨折的效果及其对骨代谢标志物的影响

目的分析地舒单抗治疗绝经后骨质疏松(PMOP)性骨折的临床效果及其对骨代谢标志物的影响。方法回顾性分析2021年5~11月北京大学深圳医院骨关节科收治的PMOP患者40例,其中20例有骨折病史。以上所有PMOP患者,给予地舒单抗60 mg,并予以碳酸钙及骨化三醇胶丸作为基础治疗。收集治疗前和治疗后6个月的腰椎和股骨颈的骨密度(BMD)、骨质疏松四项指标——前胶原Ⅰ型氨基端前肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原蛋白交联的C端末端肽(CTX)、维生素(V)D和骨钙素(Osteocalcin),并进行数据分析。此外,观察并记录地舒单抗治疗后药物不良反应。结果治疗6个月后,所有PMOP患者的腰椎及股骨颈BMD显著高于治疗前,血清中PⅠNP、CTX水平较治疗前明显降低(P<0.01,P<0.001)。根据是否曾有骨折进行亚组分析,骨折组与非骨折组PⅠNP、CTX、VD和Osteocalcin在治疗前、后均无统计学差异(P>0.05)。此外,药物不良反应发生率低(1/40,2.5%)。无骨折不愈合或延迟愈合情况出现。结论地舒单抗对PMOP的治疗安全有效,可以显著改善BMD及骨代谢异常。