具核梭杆菌激活Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌细胞化疗耐药

目的探讨具核梭杆菌(Fn)对人结直肠癌细胞株化疗耐药性的影响及相关的调控机制。方法本研究建立4个实验组,常规培养HCT-116细胞设为对照组;采用Fn标准株与HCT-116细胞共培养建立细菌—细胞共培养组(BCC组);分别在对照组和BBC组基础上通过5-氟尿嘧啶(5-FU)干预,建立5-FU组和BCC+5-FU组。MTT试验检测各组细胞活力,细胞集落形成实验检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。Western blot检测各组细胞化疗耐药相关蛋白MDR1、P-gp表达及Wnt2/β-catenin信号通路蛋白表达。结果5-FU干预能有效降低结直肠癌细胞活力,抑制集落形成,并促进细胞凋亡,差异均有统计学意义(P<0.05);与Fn共培养可以增强细胞活力,促进集落形成,减少细胞凋亡,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组相比,BBC组结直肠癌细胞中MDR1、P-gp、Wnt2、β-catenin蛋白表达均明显增高(P<0.05);5-FU干预处理后,BCC+5-FU组和5-FU组上述蛋白表达呈不同程度降低,但BCC+5-FU组上述蛋白表达明显高于5-FU组(P<0.05)。结论与Fn共培养可以促进结直肠癌细胞增殖,减少凋亡,并诱导5-FU化疗耐药,其潜在分子机制可能与Wnt/β-catenin信号通路过度激活有关。

用Morris水迷宫分析银杏叶提取物干预的乏运动大鼠的学习和记忆能力

目的:建立乏运动大鼠模型,研究银杏叶提取物(GBE)注射后的乏运动大鼠在Morris水迷宫中的学习和记忆能力。方法:选用24只健康环境中成长的SPF级别的雄性SD大鼠,将其随机分为正常组、乏运动组和银杏叶提取物干预组(干预组),每组8只。正常组每4只放入535 mm×390 mm×200 mm笼子内,配304不锈钢网盖一个,双水瓶喂养,保证有足够的活动空间和食物及水。乏运动组和干预组单只单独关入285 mm×178 mm×150 mm笼子内,配一个304不锈钢网盖,单瓶水喂养,只保证能够翻身及足够的吃食和喝水,干预时间为8周,后按照6 mg/kg对干预组大鼠腹腔注射给药(银杏叶提取物),单只给药不超过1 mL,其余给予相应剂量的生理盐水。8周后测量三组大鼠在Morris水迷宫中的学习和记忆能力。结果:Morris水迷宫中,正常组大鼠找到平台的时间最短,乏运动大鼠找到平台的时间最长,银杏叶提取物干预后的大鼠找到平台的时间相对于乏运动大鼠有所减少。结论:银杏叶提取物可以有效改善大鼠在迷宫中的学习和记忆能力。

银杏叶有效成分的提取及对糖尿病大鼠体重的影响

通过对银杏叶进行有效成分提取,将银杏叶提取物作用于链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠的模型,采取灌胃银杏叶提取物的方式给药,给药时间为8周,观测大鼠体重的变化。方法:用适量浓度的乙醇在80℃提取温度下,料液比1∶10,提取时间3h,提取制得银杏叶提取物。所得银杏叶提取物用于糖尿病大鼠的干预实验。雄性SD大鼠30只,随机分为正常组、糖尿病组、银杏叶提取物的给药组,每组各10只,正常组和给药组通过腹腔注射链脲佐菌素试液建立模型,第三天空腹测得血糖,以血糖值高于11mmol/L为成模标准,连续八周给药组灌胃银杏叶提取物试液,给另外糖尿病组相应刺激,灌胃生理盐水。结果:银杏叶提取物中的有效成分可作用于糖尿病大鼠,经连续灌胃银杏叶提取物试液的大鼠体重先降低后回升趋于平衡没有再下降,没有灌胃银杏叶提取物试液的大鼠体重下降趋势明显。

APEX1和Vimentin在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:通过检测APEX1和Vimentin在原发性肝细胞癌(Hepatocellular Carcino-ma,HCC)中的表达,探讨二者与HCC侵袭转移的相关性及其意义。方法:采用免疫组化Eli Vision二步法检测APEX1和Vimentin在HCC及其癌旁肝组织、正常肝组织中的表达,分析二者与HCC临床病理资料的相关性。结果:APEX1和Vimentin在HCC中表达明显增强,在HCC中表达率分别为69.52%及75.2%,而在癌旁肝组织及正常肝组织表达明显减弱,差异均具有统计学意义(P<0.05)。APEX1高表达与HCC组织分化程度、门静脉癌栓及肝被膜侵犯相关(P<0.05)。Vimentin高表达与HCC门静脉癌栓和肝被膜侵犯相关(P<0.05)。APEX1和Vimentin二者在HCC表达呈正相关(P<0.05)。结论:APEX1和Vimentin的过表达与肝癌的恶性生物学行为有关。二者在HCC进展及侵袭转移中,可能起协同作用。

二甲双胍对具核梭杆菌与结直肠癌的影响

目的 探讨二甲双胍对具核梭杆菌(Fn)与结直肠癌(CRC)细胞增殖和E-cadherin蛋白表达的影响。方法 采用MTT法测定CRC细胞24 h、48 h、72 h的增殖能力。用Western blotting检测法检测各组E-cadherin蛋白表达情况。结果 二甲双胍与联合组SW480细胞增殖活力明显下调(24 h:P=0.002;48 h:P=0.000;72 h:P=0.000),二甲双胍组和联合组E-cadherin蛋白表达量较对照组和Fn组均明显升高(P<0.05)。结论 二甲双胍可能通过促使肿瘤细胞与E-cadherin结合,抑制Fn附着和侵入上皮细胞,从而降低CRC的发生和浸润转移。