黄柏抗痛风活性部位筛选及其对腹膜炎小鼠的保护作用

目的 研究黄柏不同萃取部位抗痛风作用,筛选有效部位并初步探究其作用机制。方法 采用单钠尿酸盐(MSU)诱导小鼠腹腔巨噬细胞及骨髓来源巨噬细胞(BMDM)建立细胞痛风模型,经黄柏不同极性部位给药后,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)分泌,从而筛选出活性部位,最后研究活性部位在小鼠体内抗痛风作用及相关机制。结果 黄柏醇提液各萃取部位中,正丁醇部位能降低细胞IL-1β水平和巨噬细胞的吞噬能力(P<0.01),但对TNF-α无明显影响(P>0.05)。与模型组比较,正丁醇部位各剂量组小鼠腹腔灌洗液IL-1β、IL-6水平和中性粒细胞募集程度均降低(P<0.05,P<0.01),其中高剂量组效果最明显,但各给药组TNF-α水平无明显变化(P>0.05)。结论 正丁醇部位为黄柏抗痛风活性部位,其抗痛风机制可能是通过降低细胞吞噬MSU晶体的能力,从而减少IL-1β、IL-6等细胞因子释放,进而减少中性粒细胞募集程度,改善痛风症状。

微粒型灵芝孢子β-葡聚糖重塑免疫抑制微环境增强吉西他滨抗肺癌作用

吉西他滨(gemcitabine,GEM)为临床治疗非小细胞肺癌的常用药物。然而,用其反复化疗后依然肿瘤迁延,治疗效果不佳,究其原因是化疗使得机体免疫力下降,肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中介导免疫逃逸的细胞聚集,T细胞耗竭,使得整体偏向于免疫抑制状态,导致了肿瘤的发展。本研究中的动物实验获得江苏省中医药研究院伦理委员会的批准。在体外实验中观察了微粒型灵芝孢子粉β-葡聚糖(micro-particulate Ganoderma lucidum spore β-glucan,PGSG)对巨噬细胞的免疫调节作用,同时建立了小鼠皮下Lewis lung cancer (LLC)模型,口服PGSG联合GEM化疗给药以观察抗LLC肺癌的作用;流式细胞术分析小鼠肿瘤与脾脏中辅助性T细胞-1 (helper T cell-1,Th1)与细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的比例,以及髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)与调节性 T细胞(regulatory cells,Tregs)的比例。结果显示,PGSG上调了巨噬细胞CD40、CD86、CD80和主要组织相容性抗原(major histocompatibility antigens complex,MHC-Ⅱ)的表达,增强其对中性红的吞噬能力,增加炎症因子的释放。在体内实验中发现,与单独化疗相比,联合给药能够明显延缓小鼠肿瘤发展,显著降低肿瘤与脾脏中MDSC (CD11b+Gr-1-PE+)、M-MDSC(CD11b+Ly6G-Ly6Chigh)、Tregs (CD4+Foxp3+)和 M2 (F4/80+CD206+)细胞比例,同时 Th1 (CD4+IFN-γ+T细胞)与 CTL(CD8+IFN-γ+T细胞)明显增加。这提示PGSG能够重塑免疫抑制微环境,增强吉西他滨的抗肺癌效果。