基于TLR4/NF-κB通路研究益气活血药对心梗大鼠心室功能的影响

目的观察益气活血药对心梗大鼠心室功能的影响并探讨其作用机制。方法构建大鼠心梗模型(结扎左前降支),随机分组模型组、培哚普利组、益气活血组,每组8只,另假手术8只作为对照;给药28天超声心动图检测各组大鼠左室功能变化;苏木精—伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察各组大鼠心肌组织病理形态;免疫印迹法(Western blot,WB)检测梗死边缘区心肌组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量。结果(1)小动物心脏超声心动图显示:较假手术组,模型组左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd)、左室收缩末期内径(leftventricular internal dimension systole,LVIDs)均显著升高(P<0.05),左室射血分数(left ventricularejection fraction,LVEF)、左室短轴率(left ventricular fractional shortening,LVFS)均显著降低(P<0.05);较模型组,两给药组LVIDs显著性降低(P<0.05)、LVEF、LVFS均显著性升高(P<0.05)、LVIDd无明显变化(P>0.05);各给药组相比,LVIDd、LVIDs、LVEF、LVFS,各指标变化均无统计学差异。(2)WB结果显示:较假手术组,模型组TLR4、NF-κB蛋白表达显著性升高(P<0.05);较模型组,两给药组TLR4、NF-κB蛋白表达显著性降低(P<0.05);用药组间,TLR4、NF-κB蛋白表达无统计学差异。(3)ELISA结果显示:较假手术组,模型组血清TNF-α、MCP-1及IL-6的含量显著性升高(P<0.05);较模型组,两给药组血清TNF-α、MCP-1及IL-6的含量显著性降低(P<0.05);各给药组相比,血清TNF-α、MCP-1及IL-6的含量变化无统计学差异。结论益气活血药对心梗大鼠心室功能具有保护作用,可能通过TLR4/NF-κB信号通路抑制慢性炎症反应而发挥作用。

益气活血药对心梗后心肌纤维化大鼠不同亚型血小板源性生长因子表达的影响

目的探究益气活血药对心肌梗死后心肌纤维化大鼠血小板源性生长因子(platelet-derived growth factors,PDGF)表达的影响。方法结扎左前降支建立心肌梗死大鼠模型,假手术组只穿线,不结扎。术后将成模动物随机分为假手术组、模型组、培哚普利组和益气活血组,每组9只,给予相应药物灌胃治疗28天后,采用超声心动图评价大鼠心脏结构和功能的变化,马松(masson)染色法观察药物对心肌纤维化的影响,蛋白质印迹法(western blot)检测collagenⅠ、collagenⅢ及PDGFs的蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴率(left ventricular fraction shortened,LVFS)均显著降低(P<0.01),左室收缩末期内径(left ventricular internal dimension systole,LVIDs)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd)、心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)显著升高(P<0.01),collagenⅠ、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值和PDGF-B升高(P<0.05,P<0.01),PDGF-A和PDGF-C显著下降(P<0.01)。与模型组相比,两给药组LVEF、LVFS均显著升高(P<0.01),LVIDs、LVIDd、CVF显著降低(P<0.01),其中益气活血组collagenⅠ、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值和PDGF-B下降(P<0.01),PDGF-A升高(P<0.05)。结论益气活血药作用于血小板源性生长因子能够通过降低PDGF-B减轻MI大鼠纤维化水平,并可上调PDGF-A发挥保护心脏功能的作用。

益气活血方对大鼠心肌梗死后心肌肥大的影响及作用机制

目的观察益气活血方对大鼠心肌梗死后心肌肥大的影响,探究其作用机制。方法采取结扎大鼠冠状动脉的方法建立心肌梗死动物模型,将其随机分为模型组、益气活血药组、酒石酸美托洛尔组,另设假手术组,每组9只,术后第二天开始灌胃,干预治疗7天后,采用小动物超声检测大鼠心脏结构和功能的变化,苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察梗死边缘区心肌细胞形态学改变,计算心肌细胞横截面积、直径和周长,免疫组织化学法观察梗死边缘区心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)的表达,蛋白质免疫印迹(western blot,WB)法检测梗死边缘区ANP、β肌球蛋白重链(β-mysion heavy chain,β-MHC)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulated kinase1/2,p-ERK1/2)的蛋白表达情况。结果(1)模型组大鼠左心室射血分数(left venteicular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular shortening fraction,LVFS)均低于假手术组,左室收缩末期内径(left ventricular internal dimension systole,LVIDs)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVIDd)均高于假手术组(P<0.05);两用药组LVEF、LVFS均高于模型组,LVIDs、LVIDd均低于模型组(P<0.05)。(2)与假手术组相比,模型组心肌细胞横截面积、直径和周长显著升高;与模型组相比,两用药组三者均明显降低(P<0.05)。(3)Western Blot结果显示,模型组ANP、β-MHC、p-ERK1/2相较假手术组均显著升高;用药组三者相较模型组均显著降低(P<0.05)。ERK1/2蛋白在各组间无统计学差异(P>0.05)。结论益气活血方能够改善大鼠心肌梗死后心肌肥大的程度,其机制可能与抑制ERK1/2信号通路有关。