非变性Ⅱ型胶原蛋白提取工艺优化及质量验证

以新鲜鸡胸软骨作为原材料,清洗灭菌后进行破碎处理,经中性盐及碱共作用的方法进行预处理后,使用酸法及酶法相结合的提取方法添加胃蛋白酶提取非变性Ⅱ型胶原蛋白。使用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定不同盐析pH值及浓度条件,和盐碱处理后材料酶解过程不同时间段光条带密度变化以确定最适条件。最后对不同盐析pH值、最佳盐析浓度条件下所获得胶原进行傅里叶红外吸收图谱,圆二色谱,紫外光谱,羟脯氨酸含量,等电点,熔融温度(T_(m)),热分解温度(T_(d)),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,氨基酸含量,扫描电子显微镜及原子力显微镜对比分析。结果表明在pH13的混合清洗液,酶解48 h及酸性条件0.75 mol/L盐析浓度条件下所获得的Ⅱ型胶原冻干产品天然纤维结构完整,产率高达68.9%,羟脯氨酸含量可达11.04%。