TTF-1、CK7、CK5/6、P63和CK20在黏液性肺癌中的表达及意义

目的评价TTF-1、CK7、CK5/6、P63和CK20在黏液性肺癌中的表达特征并探讨其诊断价值。方法 15例黏液性肺癌手术切除标本,其中包括印戒细胞性腺癌(SRCA)5例,肠型腺癌(ITA)4例,黏液性细支气管肺泡癌(m-BAC)3例,伴有黏液的实性腺癌(SA)2例,黏液(胶样)腺癌(MCA)1例;另选取肺腺癌50例(包括非黏液性细支气管肺泡癌13例),进行免疫组织化学检测。结果黏液性肺癌和肺腺癌TTF-1阳性率分别为60.0%(9/15)和94.0%(47/50);CK7分别为100%(15/15)和96.0%(48/50);CK5/6分别为0和2.0%(1/50);P63分别为13.3%(2/15)和12.0%(6/50);CK20分别为6.7%(1/15)和0。结论与肺腺癌相比,黏液性肺癌具有较独特的免疫表型,TTF-1阳性率低而CK20可阳性表达;CK7阳性表达有助于证实原发性黏液性肺癌的诊断。

胸椎恶性血管球瘤临床病理观察

目的探讨骨内恶性血管球瘤的临床病理特征。方法对1例胸椎恶性血管球瘤的临床表现、影像学、组织学特征、免疫组化结果进行分析,并文献复习。结果患者男性,60岁。胸背部疼痛2年。术前MRI提示胸8椎体病变。镜下肿物呈结节状,由玻璃样变性的纤维结缔组织分隔,肿瘤组织呈血窦样结构,血窦衬覆内皮细胞,窦间为数层肿瘤细胞,瘤细胞上皮样,胞界较清晰,胞质淡染,胞核大小不等,核分裂象少见。免疫组化示肿瘤细胞vimentin和SMA(+)。结论椎骨内恶性血管球瘤罕见,低度恶性,具有独特的病理形态学特征。

RT-PCR法检测EWS-FLI1融合基因诊断尤文肉瘤/外周原始神经外胚层瘤

目的探讨尤文肉瘤/外周原始神经外胚层瘤(EWS/pPNET)石蜡包埋组织中EWS-FLI1融合基因表达的临床病理意义。方法采用免疫组化对1例纵隔尤文肉瘤/外周原始神经外胚层瘤进行观察,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测融合基因EWS-FLI1的表达。结果肿瘤由小圆细胞、卵圆形细胞及短梭形细胞构成,巢状、片状或列兵样排列,间质显著增生,未见典型菊形团结构。免疫组化显示CK、EMA和CD99弥漫强(+)。RT-PCR检测出EWS-FLIl融合基因的表达。结论EWS/pPNET与促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤(DSRCT)具有重叠的形态学和免疫组化特点,石蜡包埋组织中检测EWS-FLI1融合基因的表达可作为诊断EWS/pPNET的可靠指标。

艾滋病合并马尔尼菲青霉病临床病理观察

目的提高对艾滋病合并马尔尼菲青霉病的认识。方法回顾1例艾滋病合并马尔尼菲青霉病病例的临床病理资料并文献复习。结果艾滋病合并马尔尼菲青霉病以发热、咳嗽为主要症状,相对特异的临床表现为皮肤出现中心坏死性脐状丘疹,抗炎或抗结核治疗无效,白细胞计数多正常或偏低,真菌培养和病理活检可确诊。结论艾滋病合并马尔尼菲青霉病误诊率高,常进展为播散型感染。对于长期发热、咳嗽,抗炎或抗结核治疗无效,白细胞比值正常或偏低的患者应考虑此病的可能。

肝肿瘤细胞DNA倍体分析中选择参照细胞核的依据

目的 利用细胞图像分析仪测量小鼠肝细胞涂片的 DNA含量 ,探讨细胞图像光度术 (ICM)和流式细胞光度术 (FCM)分析肝肿瘤细胞核 DNA倍体时 ,选取参照细胞核的原则。方法 本文选取 10只成年健康雄性小白鼠的肝组织涂片 ,Feulgen染色 ,TIGER细胞图像分析仪测量单个完整肝细胞核的 DNA含量与倍体。结果 (1)不同小鼠同一倍体的肝细胞核 DNA含量大致相同 ;(2 )二、四、八和十六倍体肝细胞单个核 DNA含量间的比值接近 2、4、8,它们的 CV<8.0 %;(3)当仅出现二倍体和四倍体时 ,以二倍体的细胞核为主 (80 .4%) ,伴随八倍体和十六倍体的出现 ,四倍体肝细胞核所占百分率大于二倍体。结论 由于肝细胞具有多核和多 DNA倍体的特点 ,分析和计算肝脏肿瘤细胞核 DNA倍体和其它指标时 ,不能简单地遵循以同种属、同个体、同源的正常二倍体肝细胞核作为参照细胞核 ,正常四倍体和八倍体甚至十六倍体肝细胞核作为参照细胞核也应该加以考虑。

光衍射现象对细胞核DNA含量检测的影响

利用图像分析仪测量小鼠肝细胞涂片内单个肝细胞核的DNA含量 ,探讨图像分析仪在测量显微图像的光度时光衍射现象所导致的测量误差。本文选取 10只成年健康雄性小鼠的肝组织涂片 ,Feulgen染色 ,TIGER细胞图像分析仪测量单个肝细胞核的DNA含量并分析其DNA含量倍体 ;结果显示 ,( 1)涂片内肝细胞核分布均匀 ,轮廓清晰 ,呈紫红色 ;( 2 )不同小鼠同一DNA含量倍体的肝细胞核的DNA含量大致相同 ;( 3)二、四、八倍体肝细胞核的DNA含量比值均大于 /〔Dept.1〕等于 2或 4 ,二、四、八倍体肝细胞单个核DNA含量的CV值均小于 10 % ;( 4 )同一小鼠不同DNA含量倍体肝细胞核的平均光密度值差异较小。结论 :光衍射现象可导致DNA含量的测量结果偏低 。

组织切片对细胞核DNA含量检测的影响

目的探讨组织切片对图像分析仪测量细胞核DNA含量的影响。方法选取10只成年健康雄性小鼠,制备肝细胞涂片和肝组织切片,肝组织切片分成两部分,分别用于Feulgen染色和石蜡包埋,包埋后的组织采用垂直切片,图像分析仪测量切片实际厚度,依据切片机标识厚度和测量厚度分别分组,TIGER细胞图像分析仪分别测量肝细胞涂片和组织切片内肝细胞核的积分光密度(IOD)。结果肝细胞涂片内各DNA含量倍体肝细胞核IOD间的比值接近2和4,IOD之变异系数(CV值)<3.5,肝组织切片IOD间比值明显偏离2和4,IOD之CV值均>6;切片机标识厚度为4、6、8和10μm组织切片平均测量厚度分别为6.75、7.18、6.96和7.59μm,测量厚度最大值为9.25μm,最小值为4.62μm;依据切片机标识厚度分组中不同切片厚度相同DNA含量倍体肝细胞核的IOD值差异均无统计学意义;依据测量厚度重新分组后5、6微米组与7、8、9微米组IOD值间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论组织切片的实际厚度与切片机标识厚度间存在明显差异,本实验方法可较准确地判断组织切片厚度;厚组织切片测量结果优于薄组织切片,但与细胞涂片相比,厚组织切片仍难以准确测量细胞核DNA含量,DNA含量检测时应优先采用细胞涂片。

染色质浓缩对细胞核DNA含量检测的影响

目的利用三种不同方法制备小鼠肝细胞涂片,探讨染色质浓缩对图像分析仪测量DNA含量的影响。方法本文选取10只成年健康雄性小鼠,采用传统涂片、液基制片法和甲醛固定后液基制片法制备小鼠肝细胞涂片,Feulgen染色,TIGER细胞图像分析仪分别测量三种涂片内肝细胞核的积分光密度、平均光密度和面积。结果三种涂片内肝细胞核分布均匀,轮廓清晰,呈紫红色,与传统涂片法相比,液基法内肝细胞核面积明显减小,染色质高度浓缩;相同倍体的肝细胞核在传统涂片中面积最大,平均光密度最低,各倍体间的比值最接近2和4,积分光密度CV值最低(<3.5)。固定法和液基法平均光密度明显升高,各倍体间比值明显偏离2和4,积分光密度CV值>6。结论不同制片方法可导致同一类型、处于相同功能状态的细胞核染色质浓缩程度产生明显差异,染色质浓缩可导致平均光密度值升高,积分光密度值降低,测量结果的精确性和准确性降低。

滤光片对细胞核DNA含量检测的影响

目的探讨滤光片对图像分析仪测量DNA含量的影响。方法选取10只成年健康雄性小鼠,制备肝细胞涂片,Feulgen染色和天青B染色,显微镜与摄像机之间分别插入400 nm、560 nm、590 nm、600 nm、626 nm、670 nm带通滤光片和中灰滤光片,利用TIGER细胞图像分析仪测量肝细胞核的积分光密度(IOD)与平均光密度(AOD)和面积。结果肝细胞核在Feulgen染色法中呈紫红色,天青B染色法呈蓝色。Feulgen染色和天青B染色分别采用560 nm和600 nm的带通滤光片时,能够测得最大的IOD值,不同倍体肝细胞核间的比值接近2、4,CV值最低。与天青B染色方法相比,Feulgen染色法中不同倍体间的比值更接近2、4,CV值更低。结论适宜的滤光片可提高细胞核DNA含量测量结果的精确性和准确性。Feulgen染色测量结果精确性和准确性明显高于天青B染色,应作为首选的染色方法。

应用肝细胞涂片评估DNA染色方法的可靠性

目的探讨应用肝细胞涂片评估DNA染色方法的可靠性。方法选取10只成年健康雄性小鼠,制备肝细胞涂片,Feulgen染色和天青蓝染色,TIGER细胞图像分析仪测量肝细胞核的DNA含量与倍体。结果涂片内肝细胞核分布均匀,轮廓清晰;Feulgen染色法中肝细胞核呈紫红色,天青蓝染色法呈蓝色;作为参比的Feulgen染色涂片中不同倍体间IOD的比值比天青蓝染色标本更接近倍体数的比值,其CV值也低于天青蓝染色法。结论小鼠肝细胞涂片可应用于评估显示DNA染色方法的可靠性。

浆细胞骨髓瘤并发胸腔积液1例

患者女性,58岁。9个月前无明显诱因出现心慌、胸闷,3个月前确诊为强直性脊柱炎,此后症状反复且逐渐加重。近日以行走不畅、双下肢无力就诊。血清学检查：IgM 1.03g/L,IgG 7.60 g/L,IgA 0.94 g/L,C4补体0.22 g/L,C3补体1 g/L均正常范围。尿酸727μmol/L、CA125 173.1 U/ml和CA199 134.3 U/ml均明显高于正常。血红蛋白90 g/l、红细胞3.13×1012/L均低于正常。胸部CT示双侧后胸膜及沿脊柱旁走行胸膜不均匀明显增厚,双侧胸腔可见积液影。

基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2在子宫剖宫产疤痕中的表达和相关性

目的研究基质金属蛋白酶9（MMPs-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2（TIMP-1，2）在子宫剖宫产疤痕愈合中的影响。方法收集2009年8月～2011年11月在我院收治的有严重并发症的疤痕子宫妊娠病人22例（子宫刮宫产疤痕早期8例妊娠（CSP）、因胎盘粘连或植人而行子宫切除术的疤痕子宫足月妊娠病例14例）；选择同期孕期检查正常无并发症疤痕子宫足月妊娠病人38例作为对照1组；同期孕期检查正常、无任何并发症因社会因素要求剖宫产的足月妊娠病人32例作为对照2组。采用免疫组织化学EnVision二步法检测3组中MMPs-9和TIMP—1，2的表达，并对其表达进行相关性分析。结果MMPs-9、TIMP-1在3组间的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。TIMP-2在3组间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。Spearman等级相关分析显示，在疤痕组织中MMPs-9的表达随疤痕愈合不良呈正相关，相关系数分别是0．309、0．643。随着疤痕愈合不良程度加重，MMPs-9的表达逐渐增强，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论子宫疤痕愈合不良、CSP可能和损伤修复中MMPs-9、TIMP—1的表达失衡有关。

实时超声造影在经直肠前列腺穿刺活检中的应用

目的：探讨实时超声造影技术提高经直肠超声引导下前列腺穿刺活检阳性率的应用价值。方法：PSA异常升高（4-20μg/L）、直肠指检（DRE）异常或前列腺MRI异常的男性患者,经积极肠道准备后进行前列腺穿刺活检,穿刺方案为12＋X针（左右侧叶前列腺尖部、中部及基底部腺体各穿刺1针＋可疑结节靶向穿刺X针）。穿刺前先对前列腺进行常规超声检查,然后进行超声造影。比较超声造影前后发现前列腺结节内可疑前列腺癌结节数目差异,以及常规超声引导和实时超声造影引导下前列腺穿刺活检前列腺癌检出率的差异。结果：常规经直肠超声发现可疑结节86个,检出前列腺癌57个,阳性率为66.3%。超声造影发现异常结节118个,其中108个检测出前列腺癌,阳性率91.5%。超声造影诊断前列腺异常结节效率明显高于常规经直肠超声（P〈0.01）。超声造影引导下穿刺检出前列腺癌39例（42.8%）,而常规经直肠超声检查仅能检出28例（30.8%）,两者差异显著（P=0.033）。结论：实时超声造影可提高前列腺可疑结节的检出率,为前列腺靶向穿刺提供更精确定位。靶向穿刺可有效提高前列腺癌的检出率,有利于早期发现前列腺癌。

HIF-1α、MMP-2在退变腰椎间盘髓核中的表达及相关意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人类退变腰椎间盘髓核组织中的表达变化情况。方法对照组为取自青壮年腰椎爆裂性骨折患者的正常椎间盘髓核组织;实验组为腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘髓核组织,依据术前MRI影像表现分为3组。分别进行免疫组织化学染色,比较4组椎间盘组织中HIF-1α、MMP-2表达。结果 HIF-1α在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(8.92±3.41)%、(46.81±3.63)%、(66.88±4.60)%、(89.63±2.27)%;MMP-2在对照组、轻度退变组、中度退变组、重度退变组椎间盘髓核组织中的表达分别为(9.61±3.03)%、(47.31±4.41)%、(69.54±5.96)%、(90.05±3.16)%。HIF-1α、MMP-2在实验组退变的椎间盘中的表达显著高于对照组(P<0.05),而且不同退变程度的表达也不同(P<0.05),统计学分析均有显著差异,HIF-1α和MMP-2在退变的椎间盘组织中的表达呈正相关关系。结论 HIF-1α、MMP-2均可能参与了人类腰椎间盘组织的退变过程,且HIF-1α、MMP-2在人类退变腰椎间盘组织中有相同的增高趋势,HIF-1α可能作为MMP-2的一个重要调节因素,与MMP-2相互协调、共同促进椎间盘退变。

骨肿瘤标本规范化处理

近几年临床上对骨肿瘤的治疗取得重要进展,许多新的治疗方法不断出现,迫切要求骨肿瘤的病理诊断规范化[1-4]。不规范的病理标本处理和取材导致病理诊断不准确、不全面,从而影响了临床精准治疗和患者的预后评估[5-7]。目前国内对骨肿瘤标本处理尚缺乏统一的规范,期望该项工作有助于骨肿瘤标本处理的规范化,更好地指导临床对骨肿瘤患者的治疗和提高疗效。

引产方法与胎盘血管生成素Ⅰ和Ⅱ的关系研究

目的探讨3种不同方法引产后的胎盘粘连及其与胎盘血管生成素Ⅰ(Ang-Ⅰ)和Ang-Ⅱ表达的关系。方法孕14～24周要求终止妊娠的86例孕妇,按知情同意原则分为3组,A组38例,米非司酮200mg分次口服,配伍米索前列醇0.4mg阴道给药;B组30例,依沙吖啶100mg羊膜腔内注射;C组18例,水囊法。比较3种方法引产后胎盘粘连与胎盘Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ表达的关系。结果 A组胎盘粘连率低于B、C两组(P<0.05);胎盘粘连者胎盘Ang-Ⅰ的表达高于无胎盘粘连者,Ang-Ⅱ的表达低于无胎盘粘连者(P<0.05),A组的胎盘Ang-Ⅰ低于其他两组,B组高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 3种引产方式中米非司酮配伍米索前列醇方案的胎盘粘连率低;米非司酮通过阻断孕激素受体,抑制胎盘血管网形成,使黄体酮水平下降的同时,可能使呈黄体酮依赖性的Ang-Ⅰ也下降,与之拮抗的Ang-Ⅱ的升高,从而促进胎盘血管的退化,导致胎盘更加易于剥离。

广东首例肾移植术后甄氏外瓶霉致皮肤及皮下组织暗色丝孢霉病

报道广东首例肾移植术后甄氏外瓶霉致皮肤及皮下组织暗色丝孢霉病临床、实验研究和治疗结果。患者男,66岁,右中指、腕部、前臂皮肤结节、脓疱5月余,无痒痛。脓液涂片显微镜下见分隔、分支,淡棕色菌丝;组织病理见炎性肉芽肿囊性变,其内散在真菌菌丝,PAS、六胺银染色亦见真菌菌丝;沙堡培养基26℃培养菌落呈榄黑色绒毛样,玻片小培养符合甄氏外瓶霉;对所分离菌株进行ITS序列分析,与甄氏外瓶霉同源性为100%;采用Etest法检测了6种抗真菌药物的MIC值,其中二性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、氟康唑敏感,5-氟胞嘧啶、卡泊芬净耐药。局部注射二性霉素B与口服伏立康唑联合抗真菌治疗,及时切除好转较慢及新发皮疹,治疗效果满意。本病例为广东省内首次报道甄氏外瓶霉所致暗色丝孢霉病,亦为肾移植术后所致该病的国内首次报道。

中孕引产中胎盘粘连者胎盘血管生成素1,2的表达

目的:探讨中孕引产后胎盘粘连与胎盘血管生成素1(Ang-1)和血管生成素2(Ang-2)表达的关系。方法:孕13～24周来我院要求终止妊娠的孕妇中,入院后按知情同意的原则选择利凡诺引产及水囊引产的61例分为两组,A组:利凡诺组40例;B组:水囊组21例,采用免疫组化方法检测胎盘中Ang-1和Ang-2的表达情况,比较胎盘Ang-1、Ang-2与胎盘粘连的关系。结果:A组与B组的胎盘粘连发生率分别为50%及47.62%,两者间差异无显著性(P>0.05);两组中胎盘粘连者Ang-1的表达均高于无粘连者,Ang-2的表达粘连者低于无胎盘粘连者,差异有显著性(P﹤0.05)。结论:中孕引产后胎盘粘连可能与胎盘Ang-1的表达增强、Ang-2的表达减弱有关,可能与Ang-1/Ang-2的比率改变有关。

特发性膜性肾病患者血清中小麦蛋白抗体的水平变化及意义

目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者血清中小麦蛋白抗体的水平变化及意义。方法运用液氮研磨丙酮提取法粗提取小麦总蛋白,以此蛋白作为抗原,采用ELISA双抗体间接法检测40例IMN患者(IMN组)、34例其他肾小球肾炎患者(其他肾炎组)和40例健康人(对照组)血清中小麦蛋白特异性抗体IgG、IgA和IgE水平,并对患者进行食物过敏情况问卷调查,观察小麦蛋白特异抗体水平明显变化患者的临床特征。结果 IMN组血清中小麦蛋白特异性IgG水平低于对照组(P<0.01)、其他肾炎组(P<0.05);其他肾炎组与对照组比较,P﹥0.05;各组血清中小麦蛋白特异性IgA水平比较,P>0.05;各组血清中均未检测到小麦蛋白特异性IgE。与其他肾炎组比较,IMN组血清肌酐、24 h尿蛋白定量升高,血浆白蛋白降低(P均<0.05);两组e GFR比较,P﹥0.05。20例血清中小麦蛋白特异性IgG抗体水平明显降低(低于中位数)的IMN患者中12例尿蛋白大于5 g/24 h,且血清白蛋白水平<20.0 g/L。结论 IMN患者血清中小麦蛋白特异性IgG升高,IgA、IgE无变化,IgG可能与IMN发生、发展有关。