基于知识、能力、素质的三维教学内容初探

高等教育工作者不但要传授学生知识,还要培养学生的思考能力,更重要的是启迪学生如何提出具有挑战性的问题,这就要求教师在课堂中大力开展能力和素质教育。结合本科教学的经验,以"分子生物学"课程为例,以科学史经典故事为素材,结合哲学理论和科学方法论,并从全新的交叉学科的视角诠释基本概念,从多方面探讨和提出基于知识、能力、素质的三维教学内容改革和实践,可以对国内高校其他类似课程或专业的教学提供一些参考和借鉴。

限制热量对NIT-1细胞胰岛素/胰岛素样生长因子通路及胰岛素分泌功能的影响

目的研究限制热量(CR)对胰岛素β瘤细胞(NIT-1)细胞胰岛素/胰岛素样生长因子(IGF-1)信号通路及胰岛素分泌功能的影响,为2型糖尿病(T2DM)的发病机制及防治提供实验依据和理论基础。方法NIT-1细胞培养至指数生长期,分别用PI3-K的阻断剂LY294002(LY)进行干扰,实验分成4组:对照组;CR组;LY+CR组;LY组。用RT-PCR、免疫细胞化学等方法检测Foxo1及其下游基因的转录及表达,用放射免疫及免疫细胞化学法检测胰岛素的分泌及表达,用细胞计数法检测细胞倍增周期。结果①CR可使NIT-1细胞倍增周期延长;②Foxo1主要定位于胞浆,阻断PI3-K后Foxo1从胞浆移入胞核,mRNA转录减少;③CR在正常状态及PI3-K通路障碍的细胞均可使Foxo1 mRNA转录增加,并影响其下游基因p27、Bim的转录;④PI3-K通路障碍可使NIT-1细胞胰岛素分泌增加,CR则可使PI3-K通路障碍的NIT-1细胞胰岛素分泌减少。结论CR不需通过上游PI3-K/Akt,可直接或间接作用于Foxo1参与对胰岛素/IGF-1信号通路的调控,延长细胞寿命,增强NIT-1细胞的糖耐量,改善胰岛素信号的传导及NIT-1的胰岛素分泌功能;可能参与了T2DM的发生发展。

基于知识-能力-素质的生物技术专业标准改革初探

生物技术是一门涉及领域宽、涵盖范围广、基础性强的新兴生物学科,是现代生物学发展并与相关学科交叉融合的产物。从生物技术专业在社会经济发展中的人才需求定位角度考虑,合理、全面地设置高等学校生物技术专业标准(包括培养使命、培养目标、培养标准),对提高生物技术专业人才的适应性和发展生物技术对社会经济的发展和贡献具有重要意义。将布鲁姆教学目标分类法中,学习效果表达的不同等级应用于生物技术专业标准的制定,可以达到量化衡量人才培养的程度和水平的目的。

能量限制诱导的Sirt1高表达对胰岛β细胞的寿命及胰岛素分泌功能的影响

目的:研究能量限制(CR)对大鼠胰岛及胰岛β瘤细胞(NIT-1细胞)寿命和胰岛素分泌功能的影响,为2型糖尿病(T2DM)的发病机制及防治提供实验依据和理论基础。方法:①18月龄健康雄性SD大鼠12只随机分为CR组和对照组,饲养6个月后取胰尾组织进行实验,用免疫组化染色检测胰岛中Sirt1和insulin表达水平,β-半乳糖苷酶(-βGal)染色反映胰岛细胞衰老情况;②NIT-1细胞亦分为对照组和CR组;用RT-PCR、免疫细胞化学染色检测Sirt1的表达变化,用放射免疫及免疫细胞化学检测胰岛素的分泌及表达量的变化,用细胞计数法检测细胞倍增周期的变化。结果:①Sirt1在SD大鼠胰岛及NIT-1细胞的胞浆胞核中均有表达,CR组Sirt1表达量均增加;②CR可使大鼠胰岛-βGal染色阳性率下降、NIT-1细胞倍增周期延长;③CR可使大鼠胰岛及NIT-1细胞胰岛素表达量明显减少,NIT-1细胞胰岛素分泌量亦明显减少。结论:CR通过上调Sirt1基因的表达而延缓β细胞的衰老,CR还通过减少胰岛素的表达及分泌从而减少胰岛素信号的刺激,减轻β细胞的负荷并改善胰岛素的分泌功能,因此CR有利于防止T2DM的发生发展。

烟酸受体HM74A信号与2型糖尿病的相关性

目的观察外周血白细胞(WBC)中HM74A表达与2型糖尿病(T2DM)的相关性,并探讨HM74A信号对炎症因子的调节作用。方法收集健康人(对照组)与T2DM患者静脉血,提取mRNA,利用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),检测WBC中HM74A、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL)-1基因表达水平,分析对照组与T2DM组HM74A及其下游因子NF-κB、IL-1βmRNA表达的差异性。结果 RT-PCR结果显示,T2DM组HM74A、NF-κB、IL-1β基因表达水平显著高于对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示WBC中HM74A与其下游因子NF-κB、IL-1β的表达量呈正相关(r=0.402,r=0.451,均P<0.05);HM74A、NF-κB与血糖呈正相关(r=0.179,r=0.358,均P<0.05)。结论 T2DM患者外周血WBC中HM74A及炎症因子NF-κB、IL-1βmR-NA表达量显著增高,提示HM74A信号可能参与T2DM的发生和发展,且对炎症因子有一定的调节作用。

肿瘤抑制因子p53蛋白在毕赤酵母中的克隆表达

TP53基因在调控细胞信号通路和抑制肿瘤细胞中发挥着重要作用.本研究利用毕赤酵母表达系统以获得大量重组p53蛋白,为此,本文将人TP53基因克隆至表达载体p PIC3.5K,电转化进入毕赤酵母GS115,通过组氨酸筛选和G418筛选,获得高拷贝稳定转化子.SDS-PAGE和Western Blot检测结果表明p53蛋白可以在毕赤酵母中表达.本研究所获酵母菌株为今后大规模生产重组p53蛋白奠定了基础.

SIRT1与INS/IGF-1通路的关系及对NIT-1细胞胰岛素分泌的影响

目的探讨哺乳动物沉默信息调节因子沉默信息调节因子1(SIRT1)与胰岛素/胰岛素样生长因子(INS/IGF-1)通路的关系,观察SIRT1的表达是否可通过INS/IGF-1通路并影响胰岛素瘤细胞(NIT-1细胞)的胰岛素分泌,为2型糖尿病发病机制提供新的实验依据。方法利用SIRT1激活剂白藜芦醇(RE)和抑制剂尼克酰胺(NIC)分别对NIT-1细胞进行刺激,应用RT-PCR免疫细胞化学方法检测INS/IGF-1通路主要因子PI3K、AKT、FOXO1的mRNA及蛋白表达水平;放射免疫、免疫细胞化学、RT-PCR检测NIT-1细胞胰岛素分泌及表达量的变化,细胞计数法检测细胞倍增时间的变化。结果SIRT1激活剂和抑制剂分别使SIRT1在mRNA水平上出现高、低表达的同时影响了NIT-1细胞的胰岛素分泌量,并影响了INS/IGF-1通路主要因子PI3K、AKT的表达,但对FOXO1的影响,SIRT1的高表达并没有使其产生变化,提示SIRT1影响NIT-1胰岛素分泌通路的复杂性。结论SIRT1可以通过调控INS/IGF-1通路,进而影响NIT-1细胞胰岛素分泌。