多巴胺受体(DR2)激活对乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤的保护作用及其机制

目的:观察多巴胺受体(DR2)激活对乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤模型,细胞随机分为正常组(Control)、缺氧/再灌注组(H/R)、DR2激动剂组(溴麦角环肽,Bro)、抑制剂组(氟哌啶醇,Hal)。倒置显微镜、透射电镜、流式细胞仪检测细胞凋亡情况;检测细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;RT-PCR和Western blot方法检测心肌细胞促凋亡因子(Cyt C、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas及Fas-L)及抑凋亡因子(Bc-l 2)mRNA和蛋白表达。结果:与正常组相比,H/R组细胞凋亡率、LDH活性、MDA含量、促凋亡因子及抑凋亡因子表达均增加,唯有SOD活性降低;与H/R组比较,Bro组可减轻或逆转上述指标的变化;Hal组上述指标变化不明显。结论:DR2激活可抑制缺氧/再灌注所致的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,机制与减少氧自由基有关。

石油树脂应用与改性研究进展

介绍了C5～C9石油树脂的分类、制备、应用及发展概况，综述石油树脂的催化加氢改性技术和化学改性技术，石油树脂的催化加氢改性是近年来发展较迅速的领域，其技术的关键是针对树脂原料的不同类型找到合适的催化加氢催化剂和加氢条件，重点介绍石油树脂催化加氢工艺和使用的催化剂。目前，研究的树脂加氢催化剂主要有贵金属钯系列催化剂、负载型镍系列催化剂和新型磷化物系列催化剂，而石油树脂的化学改性技术关键在于向石油树脂分子中引入合适的活性基团。石油树脂经改性后，应用范围扩大，经济效益大幅增加。

白藜芦醇对血管紧张素Ⅱ诱导的成纤维细胞增殖的作用及其机制

目的研究白藜芦醇(Resv)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导成纤维细胞增殖的作用和机制。方法体外培养小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3),建立AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖模型。采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,Western blot技术检测Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达。结果与Control组相比,AngⅡ组NIH/3T3增殖明显,COLⅠ、COLⅢ、MMP-1和TIMP-1蛋白表达均显著增加,且TIMP-1/MMP-1增大;与AngⅡ组相比,加入10、20、30、100μmol/L白藜芦醇(Resv)对AngⅡ引起的NIH/3T3增殖有抑制作用(后期实验选用Resv的浓度为20μmol/L),COLⅠ、COLⅢ、MMP-1和TIMP-1蛋白表达明显减少,且TIMP-1/MMP-1降低;与AngⅡ组相比,AngⅡ预处理组引起的变化趋势同Resv组,强度不如Resv,且两者具有协同作用。结论白藜芦醇和AngⅡ预处理均可抑制AngⅡ引起的成纤维细胞增殖和活化,前者效果优于后者,两者合用效果更佳,其保护作用的机制与减少胶原蛋白的分泌和下调MMP-1与TIMP-1的比值有关。

双峰孔分布Al_2O_3载体的研究

采用两种不同孔径分布的拟薄水铝石干胶粉，制备呈明显双峰孔分布的Al2O3载体。考察原料粉体、孔结构调节剂种类和用量以及焙烧温度等对Al2O3载体的孔分布的影响，并采用N2物理吸附法和高压压汞法分析载体孔结构。结果表明，两种干胶粉按质量1：1混合时，能改变单一粉体的堆积状态，制得载体兼具单一原料制备载体时的孔分布，孔容达到最大，为1．58cm^3·g^-1，且孔径分布集中在（10～100）nm和300nm以上；加入不同孔结构调节剂后，对载体孔径分布调节作用相似，孔径分布更为集中；添加质量分数5％尿素后，（10～100）nm孔径分布达到62．1％；载体的比表面积随尿素含量增加依次降低，适量添加调节剂可制得所需最佳孔径分布；载体在约920℃焙烧时，晶型为1相和8相的混合相。

1类多巴胺受体对细胞凋亡的线粒体信号通路的影响

目的以细胞凋亡的线粒体途径为切入点,探讨1类多巴胺受体(DR1)活性变化对缺氧、复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及可能机制。方法乳鼠心肌细胞以缺氧、缺血清培养2小时,复氧、复血清培养24小时的方法建立心肌细胞缺氧、复氧损伤模型。RT-PCR和Western blotting分别检测Bcl-2、caspase-3、caspase-9和细胞色素C(Cyt c)mRNA和蛋白质的表达;TUNEL、流式细胞仪、MTT检测心肌细胞的凋亡情况;紫外分光光度计检测细胞培养液中LDH、SOD活性和MDA含量;透射电镜观察心肌细胞形态变化。结果与正常组比较,缺氧-复氧组细胞培养液中LDH活性和MDA含量增加,SOD活性降低;心肌细胞凋亡指数增加;心肌细胞超微结构损伤加重;促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达增加,抑凋亡因子(Bcl-2)表达亦增加。与缺氧-复氧组比较,DR1激动剂SKF-38393进一步增加LDH活性和MDA含量,降低SOD活性,增加心肌细胞凋亡指数,加重心肌细胞损伤,上调促凋亡因子表达,下调抑凋亡因子表达;DR1抑制剂SCH-23390对上述指标影响不明显。结论 DR1激活可促进缺氧、复氧诱导的心肌细胞凋亡,其机制与上调线粒体途径有关。

《食品安全法》视角下对我国食品安全法制监管的审视

为了确保公众享受到健康安全的饮食,必须建立一套完备的食品安全法律体系。因此,研究和分析当前的食品安全法律法规,加强食品安全法制监管,建立健全的执法保障和监督体系,就是确保公众享受健康安全饮食的前提条件。

CaSR表达在大鼠糖尿病性肝硬化损伤和纤维化发生中的作用

目的:观察钙敏感受体(CaSR)在糖尿病性肝损伤发生中的作用。方法:本实验分别制备糖尿病大鼠和高糖处理HSC系大鼠肝星形细胞模型。40只Wistar大鼠随机分为正常对照组(Control,n=10),糖尿病组(T1D,STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射,n=30),造模成功后分别在2、4、8周检测大鼠的体重、血糖、血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,观察形态学和超微结构改变,以及Western blot检测CaSR和肝纤维化相关指标表达的变化。HSC系大鼠肝星形细胞随机分为正常对照组(Control,10%FBS-DMEM+5.6 mmol/L葡萄糖),高糖组(HG,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖下培养48 h)和CaSR抑制剂组(HG+Calhex 231,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖+2.5μmol/L CaSR抑制剂(Calhex 231)下培养48 h,每组n=5)。结果:动物模型中,与正常组相比,糖尿病大鼠体重减轻,血糖、AST和ALT显著升高,CaSR和胶原Ⅰ(COⅠ)、胶原Ⅲ(COⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达上调;细胞模型结果与大体基本一致,与正常组相比,高糖组细胞分化标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达增加,表明HSC分化成肌成纤维细胞,细胞外间质(ECM)主要成分COⅠ和COⅢ表达增加,降解ECM的关键酶MMP9同样增加,Calhex 231可减轻上述变化。结论:CaSR表达上调参与大鼠糖尿病性肝损伤和纤维化的发生。

外源性精胺抑制高尔基体应激减轻高糖诱导的心肌损伤

目的:观察糖尿病心肌病(DCM)是否有高尔基体应激(GAS)参与及外源性精胺心肌保护作用是否与调控GAS有关。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常对照组(Control),糖尿病组(T1D,STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射)和精胺组(T1D+Sp,精胺5 mg/(kg·d)腹腔注射),饲养12周。H9C2系大鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Control,10%的FBS-DMEM培养)、高糖组(HG,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖)和精胺组(HG+Sp,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖+5μmol/L精胺)。ELISA检测大鼠血清心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT);Western blot测定高尔基体蛋白GOLPH3,GM130以及Cleaved Caspase3蛋白表达;免疫荧光检测GOLPH3细胞定位。结果:动物模型中,与正常组相比,糖尿病组大鼠血糖,血清心肌酶CK-MB和cTnT显著升高明显升高;体重,射血分数(EF)显著降低;心肌超微结构损伤明显(肌丝断裂,润盘消失等);同时GOLPH3和Cleaved Caspase3表达上调,GM130表达下调。细胞模型与大体结果一致,免疫荧光显示高尔基体出现应激性碎片化。外源性精胺处理可显著干预上述改变。结论:给予外源性精胺对糖尿病,诱导的心肌损伤具有干预作用,其机制与减轻高尔基体应激有关。

精胺对高糖引起的大鼠心肌纤维化的影响及其机制

目的:观察精胺对糖尿病心肌病(DCM)及高糖处理的心肌成纤维细胞(CFs)的保护作用并探讨其机制。方法:①动物实验:24只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(Control),糖尿病组(T1D)和精胺组(T1D+Sp),每组8只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg)复制1型糖尿病大鼠模型,精胺组在STZ注射前两周每天腹腔注射精胺(Sp,5 mg/(kg·d)),随后隔天注射,饲养至12周。检测各组大鼠血糖、胰岛素水平、射血分数(EF)和缩短分数(FS),并对大鼠心脏组织进行Masson染色和Sirius red染色。②细胞实验:出生1~3 d的大鼠心脏提取原代CFs,随机分为正常组(Control),高糖组(HG)和精胺组(HG+Sp,每组n=6)。高糖(HG,40 mmol/L)处理CFs复制细胞模型,精胺组在高糖处理前给予Sp(5μmol/L)预处理30 min。CCK8检测细胞活性,ELISA法检测培养基中胶原含量,Western blot测定细胞周期相关蛋白(PCNA、CyclinD1及P27)的表达。结果:与Control组相比,T1D大鼠血糖显著上升,胰岛素水平和心脏功能降低;染色结果显示心肌胶原含量增加。同时,HG组细胞活力与培养基中胶原含量明显增加,PCNA、CyclinD1表达上调,而P27表达下调。精胺能减轻上述变化,表现为改善心脏功能,调节细胞周期蛋白表达和减轻心肌纤维化水平。结论:精胺可减轻糖尿病心肌病心肌纤维化的发生,其机制可能与调节细胞周期有关。

外源性精胺对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的:观察外源性精胺对缺氧所致的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型(使用pH=6.8的Hank's平衡盐溶液作为细胞培养基,排出氧气,然后在缺氧箱中培养24 h),细胞随机分为正常对照(Control)组、缺氧(Hypoxia)组和精胺干预(Hypoxia+Sp)组。Western blot检测心肌细胞多胺代谢关键酶(ODC、SSAT)蛋白质表达;CCK-8,Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况;光吸收法检测细胞(或培养液)内T-SOD和Caspase-3/-9活性,MDA、GSH含量;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)生成。结果:与正常组相比,Hypoxia组SSAT蛋白质表达、细胞凋亡率、MDA含量以及细胞内ROS生成增加,而ODC蛋白质表达、SOD活性、GSH含量降低;与Hypoxia组比较,Sp处理可减轻上述指标的变化。结论:外源性精胺可减轻缺氧引起的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,其机制与恢复多胺稳态和清除活性氧有关。

外源性H_2S恢复老龄大鼠心肌缺血后适应对I/R损伤的缓解作用

目的探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺血后适应(PC)对老龄大鼠心肌的保护作用及相关机制。方法将青年和老龄大鼠随机分别分为对照组、缺血/再灌注(I/R)组和PC组,老龄大鼠另加Na HS干预组。用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤和PC模型。比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性、MDA含量及H_2S产率;透射电镜检测心肌超微结构;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果无论青年还是老龄大鼠,与对照组比较,I/R降低H_2S产率、SOD活性和CSE表达,增加LDH和CK活性、MDA含量、心肌损伤、细胞凋亡、心肌梗死面积、caspase-3、caspase-9及Bcl-2的表达(P<0.01);与I/R组比较,青年大鼠的PC减轻I/R损伤及细胞凋亡(P<0.01),而老龄大鼠的PC丧失了对心肌的保护作用;外源性H_2S恢复了老龄大鼠的PC对I/R损伤的保护作用。结论外源性H_2S能够恢复老龄大鼠PC对心肌的保护作用,其机制与抗氧化、清除自由基、抑制细胞凋亡有关。

外源性精胺对糖尿病肾病小鼠肾纤维化的影响及其机制

目的:观察外源性精胺对糖尿病肾病(DN)肾纤维化的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57小鼠随机分为正常组(Control)、糖尿病组(T1D)和精胺预处理组(T1D+Sp,每组n=8)。一次性注射STZ(60 mg/kg)复制1型糖尿病小鼠模型,精胺预处理组在STZ注射前两周每天腹腔注射精胺(Sp,5 mg/(kg·d)),随后隔天注射精胺,第12周处死小鼠,检测血清肌酐、尿素氮判断肾功能变化,HE、PAS和Masson染色观察肾组织损伤和纤维化水平。Western blot法检测小鼠肾组织中基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)、Ⅳ型胶原(Coll-Ⅳ)蛋白的表达。结果:与Control相比,T1D组血糖(5.67±0.22 vs 28.40±0.57 mmol/L)、肌酐(14.33±1.22 vs 30.67±4.73μmol/L)、尿素氮(6.93±4.94 vs 22.00±1.04 mmol/L)明显升高(P<0.05),肾组织基底膜增厚,胶原含量明显增加,MMP-2、MMP-9和Coll-Ⅳ蛋白表达均升高(分别为0.57±0.07 vs 1.06±0.20、47.00±0.04 vs 1.29±0.09和0.42±0.16 vs 0.95±0.18,P<0.05),精胺预处理明显减轻上述变化。结论:外源性精胺预处理通过调节MMPs与胶原的平衡减轻DN小鼠的肾纤维化。

钙敏感受体在高糖诱导的人眼小梁网细胞损伤中的作用

目的:观察钙敏感受体(CaSR)在高糖(HG)诱导的人眼小梁网细胞(HTMC)损伤中的作用和机制。方法:将HTMC随机分为:对照(control)组(10%胎牛血清-DMEM)、HG组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖)、HG+CaSR激动剂NPS R568组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖+10μmol/L NPS R568)和HG+CaSR抑制剂Calhex231组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖+3μmol/L Calhex231),培养72 h。CCK-8法测量不同浓度的葡萄糖刺激下HTMC活力;试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测CaSR、SOD2、凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3和Bcl-2)及自噬相关蛋白(ATG7、P62、LC3-I和LC3-Ⅱ)表达;免疫荧光染色观察CaSR细胞定位和表达。结果:葡萄糖浓度为50 mmol/L时,HTMC相对活力由1.00±0.03下降至0.60±0.07(P<0.05);与control组相比,HG使HTMC中CaSR、cleaved caspase-3和P62表达以及MDA含量增加(P<0.05),而SOD活性,SOD2、Bcl-2和ATG7表达,以及LC3-Ⅱ/LC3-I比值下降(P<0.05);NPS R568进一步促进HG诱导的细胞损伤,而Calhex231可减轻上述变化(P<0.05)。结论:CaSR表达参与HG诱导的HTMC损伤,其机制与促进细胞凋亡和氧化应激以及抑制自噬有关。

大黄提取物对高糖所致心肌成纤维细胞增殖的作用和机制

目的观察大黄提取物对高糖引起的心肌成纤维细胞增殖的影响并探讨其可能机制。方法心肌成纤维细胞随机分为正常组、高糖组和大黄提取物处理组(1、2.5、5、7.5、10、20、30和40μg/m L)。用cck-8(cell counting kit-8)试剂盒检测细胞活力,选择大黄提取物的最适浓度。Western blot法检测促凋亡蛋白bax、抗凋亡蛋白bcl-2、胶原蛋白Ⅰ以及cleaved-caspase3的表达。结果与正常对照组相比,高糖组的细胞活力增强,胶原蛋白Ⅰ、bcl-2表达明显增加,bax变化不明显;与高糖组相比,大黄提取物处理组胶原蛋白Ⅰ、bcl-2表达下调,bax和cleaved-caspase 3表达增加。结论大黄提取物可抑制高糖引起的成纤维细胞增殖和活化,其机制与激活线粒体凋亡通路有关。

高职法律专业困境的现状分析

高职法律专业教育认真研究当前存在的困境，找到背后的深层次原因，并提出有针对性的改革策略，切实培养实践型职业人才，增强学生就业竞争力，促进高职可持续发展。

外源性H_2S恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及机制

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及相关机制。方法:H9C2细胞(心肌细胞系)用30μmol/L过氧化氢(H_2O_2)处理2 h后再培养3 d,诱导生成衰老细胞。衰老H9C2细胞被随机分5组(n=8):正常组(Control)、缺氧/复氧组(H/R)、H/R+NaHS组、缺氧后适应(PC)组、PC+NaHS组。缺氧/复氧(H/R)模型:衰老H9C2细胞用缺氧液(无血清、无糖培养基,p H=6.8)培养3 h,然后正常培养6h;缺氧后适应(PC)模型:方法同H/R模型,缺氧结束复氧前连续进行3次5 min间隔的复氧/再缺氧处理,随后复氧6 h。ELISA试剂盒分别检测大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)含量和caspase-3活性; CCK-8试剂盒检测细胞活力; DCFH-DA染色检测活性氧(ROS)水平; Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率; Real-time PCR检测相关基因m RNA水平。结果:30μmol/L H_2O_2可诱导H9C2细胞衰老但不会导致其凋亡;与Control组比较,H/R和PC均降低细胞活力,增加细胞凋亡率、ROS水平及caspase-3、caspase-9和Bcl-2 m RNA水平(P<0.01);且PC组与H/R组比较,上述指标变化无明显差异;在H/R和PC组加入NaHS,可显著提高细胞活力,降低细胞凋亡率和氧化应激; PC+NaHS对上述指标的作用明显强于H/R+NaHS。结论:外源性H_2S能够恢复PC对衰老H9C2细胞的保护作用,其机制与抑制氧化应激和细胞凋亡有关。

探析幼儿园教师家园合作能力的现状及培养

家园合作作为幼儿园教学的重要组成部分引起极大的关注度,这在很大程度能够促进教师的专业成长,同时也能促进幼儿全面 发展,强化家长与幼儿园之间的联系,加深彼此的沟通和交流,共同促进幼儿的健康成长,文章从多个层面阐述了幼儿园教师家园合作能 力的现状,并且在此基础上提出具有建设性的改革策略,以促进幼儿园家园合作能够达到预期的效果。

中国种业监管的法律和法规困境与解决途径

本研究旨在探讨中国种业监管的法律和法规困境,并提出解决途径。系统论述了中国种业的重要性和监管的必要性,以及法律和法规在监管中存在的问题和矛盾,对中国种业监管的法律和法规现状进行了概述,并通过具体案例分析,揭示了种子生产企业的合规困境、种子研发机构的知识产权保护难题、种子流通环节的监管漏洞以及营销单位的虚假宣传和欺诈行为。针对这些问题,本研究提出了解决途径,包括加强法律和法规制定与修订、建立行业自律机制、加强监管机构间的协调与合作以及提高公众参与和监督力度。此外,本研究通过分析国际和国内的成功案例,探讨了种业监管经验的借鉴意义。本研究的主要贡献在于对中国种业监管的法律和法规困境进行了深入分析,并提出了具有可行性和实用性的解决途径和建议。这对于促进中国种业的发展、保护农民权益和保障公众健康具有重要意义。

精胺调节POU3F1/PPAR/HMGCS2减轻糖尿病小鼠心肌损伤

目的基于RNA-seq对精胺干预的糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)小鼠心肌组织进行转录组分析,探究其心肌保护作用及其相关机制。方法 60只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(CK组),糖尿病心肌病组(DCM组,STZ,60 mg/kg,腹腔注射)和精胺干预组(SPM组,1 mg/(kg·d),腹腔注射),每组20只。饲养至12周,检测各组小鼠血糖、体重、射血分数(ejection fraction, EF)和缩短分数(fractional shortening, FS),并提取小鼠心肌组织的RNA进行转录组学测序,检测差异表达基因(DEGs),筛选其中的转录因子(transcription factors, TF)进行KEGG富集分析,并用Western blot进行验证。结果与CK组相比,DCM组小鼠的血糖显著上升,体重和心脏功能降低;上述指标在SPM组有所改善。RNA-seq结果显示,DCM组与CK组相比,共有373个DEGs,其中有99个表达上调而274个表达下调(其中,HMGCS2变化最为显著);SPM组与DCM组相比,上调253个和下调33个基因的表达。通过对比CK和DCM组的DEGs,筛选到POU3F1等在内的28个TF,KEGG富集分析显示,受其调控的DEGs主要在PPAR等信号通路中显著富集。Western blot结果显示,DCM组POU3F1、PPAR和HMGCS2蛋白表达增加,而SPM抑制上述蛋白表达。结论精胺可减轻糖尿病小鼠的心肌损伤,其机制可能与调节POU3F1/PPAR/HMGCS2有关。