发酵床养猪的优势和劣势分析

发酵床饲养模式是养猪业中的一种新型优质、安全、高效的饲养方式,不仅可减少养猪业的粪尿排放,提高猪肉品质和动物的免疫功能,同时在促进猪只生产性能,改善养殖环境等方面有重要意义。本文从发酵床的类型、优势和存在的问题等方面进行探讨,旨在指导养猪生产。

四川地区奶牛乳房炎初步调查

本次试验采用临诊检查法、病原菌分离、B.M.T试剂检查、体细胞计数法对四川地区4个奶牛场的80头泌乳奶牛进行了乳房炎的检测。结果表明临床型乳房炎阳性率为18.8%,隐性乳房炎头数阳性率为73.8%。

规模化鸡场种蛋蛋壳、蛋内容物的总菌数、大肠杆菌数、沙门氏菌数测定

用稀释滴种法对四川四个万只以上父母代种鸡场送检新鲜种鸡蛋,每个鸡场随机抽检20枚进行了蛋壳、蛋内容物总菌数、大肠杆菌数、沙门氏菌数的定量计数测定。结果表明:不同鸡场的不同种蛋的蛋壳、蛋内容物的总菌数、大肠杆菌、沙门氏菌检出率有较大变化范围,但不同鸡场间带菌对数值平均数和检出率差异都不显著(P>0.05)。各规模化种鸡场的种蛋所带大肠杆菌在蛋壳上及蛋内容物中均为优势菌。

仔猪腹泻性大肠杆菌多黏菌素耐药基因mcr-1筛查及其多重耐药基因检测

为了摸清四川地区致仔猪腹泻性大肠杆菌多黏菌素耐药基因mcr-1流行状况及阳性菌株多重耐药基因携带情况,试验采用含多黏菌素E(2μg/mL)的伊红美蓝琼脂培养基筛选多黏菌素E耐药性大肠杆菌,并通过PCR方法检测多黏菌素E耐药基因mcr-1及mcr-1阳性菌株的β-内酰胺酶类、磺胺类、四环素、喹诺酮类、氯霉素类等多重耐药基因的共存状况。结果表明:获得的84株多黏菌素E耐药性大肠杆菌中有49株携带mcr-1耐药基因,阳性率为58.33%。49株mcr-1阳性菌株中磺胺类耐药基因sul1、sul2、sul3检出率为(100%,49/49);氯霉素类耐药基因FLOR检出率为(100%,49/49);四环素类耐药基因tetA的检出率最高(100%,49/49),其次为tetM(63.27%,31/49);β-内酰胺酶类耐药基因以blaTEM与blaCMY为主,检出率分别为75.51(37/49)和61.22%(30/49);喹诺酮类耐药基因以qnrS(87.76%,43/49)、acc-ib-cr(61.22%,30/49)、oqxAB(75.51%,37/49)为主,而qnrA、qnrC、qnrD的检出率均为0。说明携带多黏菌素E耐药基因mcr-1的阳性菌株的多重耐药情况非常严重,从而导致耐药基因的广泛存在以及高水平的传播,威胁人类的健康。

川藏黑猪与长白猪仔猪猪瘟母源抗体消长规律比较研究

为探索川藏黑猪和长白猪的猪瘟免疫方法,本研究采用猪瘟阻断ELISA对0、1、4、7、10、20、25、30、35日龄时川藏黑猪与长白猪仔猪的猪瘟母源抗体水平进行了检测。结果显示,川藏黑猪仔猪和长白猪仔猪出生后哺母乳前的猪瘟母源抗体均为0,哺母乳后d1,猪瘟母源抗体分别为>210和28.2,合格率分别为100%和87%。4日龄和7日龄时,川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体仍为≥210,合格率100%;长白猪仔猪的猪瘟母源抗体为28.4和27.4,合格率100%和83%;随后川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体呈下降趋势,35日龄达到保护临界值(24.0);长白猪仔猪的猪瘟母源抗体下降更迅速,25日龄时其母源抗体水平已达临界值(24.0)。检测结果表明无论是母源抗体水平还是母源抗体持续时间,川藏黑猪与长白猪仔猪之间有较大差异,川藏黑猪仔猪猪瘟疫苗的首免时间应为35日龄,而长白猪仔猪猪瘟疫苗的首免时间应为25日龄。

副猪嗜血杆菌四川株生物学特性及药物敏感性研究

为了解副猪嗜血杆菌四川分离株的生物学特性及耐药性情况,本研究采用微生物及分子生物学技术对副猪嗜血杆菌（Hps）四川分离株从生物学特性、16SrRNA基因PCR扩增和耐药性方面进行了研究。结果显示,Hps四川分离株具有一定的微厌氧性,能产生＂卫星现象＂,分离株与其他地区分离株生化特性基本一致;所有分离株均扩增出821bp的特异性16SrRNA基因片段。药物敏感性试验结果显示,分离株对头孢拉定、氨苄西林、头孢氨苄、阿莫西林、头孢克洛、氧氟沙星、头孢噻肟、呋喃妥因具有较高的敏感性,敏感率为75.61%~87.80%;对林可霉素、羧苄青霉素、恩诺沙星、阿米卡星、磺胺甲唑均表现出较高的耐药性,且多重耐药严重,5~8种耐药占比最多,为21.95%~30.49%,有7株可耐受多达13种药物。结果表明,Hps四川分离株存在严重的耐药性现象。

我国兔出血症病毒2型全基因组测序与遗传进化分析

为了研究兔出血症病毒2型(RHDV2)的基因组特性及遗传进化关系,试验对四川省某兔场死亡兔的组织病料进行RHDV2鉴定,采用RT-PCR方法扩增RHDV2全基因组分段序列,经DNAStar拼接获得病毒全基因组序列;采用MegAlign软件将分离株的全基因组、NSPs、VP60及VP10基因核苷酸序列和氨基酸序列与经典RHDV、RHDVa、RHDV2(RHDVb/GI.2)株进行了比对分析,并基于GenBank中44株RHDV的VP60基因构建分离株的系统发育树。结果表明:从病料组织中鉴定到RHDV2型毒株,命名为RHDV2-CHN/SC2020株,RHDV2-CHN/SC2020株与经典RHDV株、RHDVa株和RHDV2(RHDVb/GI.2)株的核苷酸序列相似性分别为84.6%~84.9%、83.4%~83.8%和92.0%~98.2%,与RHDV2型的相似性最高;RHDV2-CHN/SC2020株与荷兰株(RHDV2-NL2016)处于同一分支,亲缘关系最近。说明RHDV2已经传入我国,而遗传关系证实该病可能是从欧洲国家荷兰引种传入。

猪细小病毒疫苗株NS1基因克隆及生物信息学分析

为进一步开展猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NS1蛋白功能研究,根据GenBank登录的PPV参考株NADL-2(登录号:NC001718)的NS1基因序列设计1对特异性引物,采用PCR技术扩增PPV疫苗株NS1基因,将PCR扩增产物克隆入pTA2载体构建重组质粒pTA2-NS1,并进行测序鉴定。测序结果显示,构建的pTA2-NS1质粒含有一个开放阅读框(ORF),全长1989bp,共编码662个氨基酸,与GenBank登录的PPV参考株NADL-2、Kresse株的NS1基因的核苷酸同源性分别为99.85%和99.65%,氨基酸同源性分别为99.70%和99.70%。上述结果表明试验成功构建了含有PPV NS1基因的重组质粒pTA2-NS1。应用DNAStar软件及在线ProtScale、SignalP 4.1、TMHMM、Scansite、PSORTⅡ等生物信息学软件对NS1基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,结果显示NS1蛋白分子质量为75.7ku,等电点PI为6.82,是弱酸性蛋白;NS1蛋白不含信号肽序列,无跨膜区,为可溶性蛋白,主要定位于细胞核内,T199、Y309、T338、T512、S631、T635为其潜在磷酸化位点。以上研究为进行PPV NS1蛋白表达,进一步开展NS1蛋白功能研究奠定了基础。

恩拉霉素人工抗原合成工艺的优化

为制备恩拉霉素(Enramycin)抗体及建立恩拉霉素残留检测方法提供参考,采用L9(34)正交试验设计优化恩拉霉素-牛血清白蛋白人工免疫抗原(Er-BSA)的合成工艺条件,通过紫外光谱对合成效果进行鉴定。结果表明:最佳合成反应条件为反应物质量比(mBSA∶mER)为1∶1,反应溶剂比(VPBS∶V二氧六环)为2∶1,pH 6.7和反应温度28℃,其合成物的偶联率为25.70。反应物质量比和反应温度是影响反应的主要因素。

四川黑猪仔猪猪瘟母源抗体及免疫抗体消长规律研究

猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种猪的急性、烈性传染病,被国际兽疫局（OIE）列为A类传染病。我国每年因猪瘟死亡的猪占病死猪的1/3以上,直接经济损失有数十亿元。目前,治疗该病尚无特效药物,疫苗免疫仍是预防猪瘟的主要手段。四川黑猪是四川省畜牧科学研究院经过多年育种培育而成的猪种,现已通过国家畜禽品种审定委员会现场审查。

家兔“流行性腹胀病”的病因和防治研究初报

对近3年四川发生的兔腹胀病的流行特点、临床症状、剖解病理变化、病因和防治进行了初步的研究。结果,该兔腹胀病主要引起断奶后至3月龄左右的兔发病,发病率一般在30%～60%,死亡率达90%以上,具有一定传染性和区域流行性。病兔出现明显腹胀,胃膨胀,胃内充满食物或水样稀薄的内容物,部分胃粘膜有黑色溃疡斑点,结肠内多充满白色胶冻样半透明状物。从69例病死兔中,分离到38株魏氏梭菌(55%)、13株大肠杆菌和2株沙门氏杆菌,大多数菌株都有致病力。添加霉菌毒素吸附剂或抗球虫药物不能有效控制该病,而使用恩拉霉素和蒽诺沙星可在1周内控制该病的发生。初步的研究结果表明:该病可能是一种细菌性传染病,其病原菌有可能是以魏氏梭菌为主,还有大肠杆菌、沙门氏菌等细菌,为单一或混合感染所致。

恩拉霉素人工抗原的合成与鉴定

建立酶联免疫方法以检测食品中恩拉霉素的残留,采用戊二醛法,偶联半抗原恩拉霉素(Er)和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备人工免疫抗原和人工包被抗原,分别为Er-BSA和Er-OVA。经紫外光谱鉴定,在紫外270～280 nm波长处得到Er-BSA和Er-OVA特征性偶联吸收峰。试验结果表明人工合成的2个人工抗原均偶联成功。人工免疫抗原和人工包被抗原的偶联比均达到26∶1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了基础。

规模化养猪的寄生虫病控制技术探讨

本次试验采用“漂浮法”和“廖氏法”等调查了10个养猪场的寄生虫病,结果有7个猪场的粪便虫卵呈阴性,1个猪场的结节虫病很轻微,1个猪场的蛔虫病有流行,1个猪场有4类寄生虫病,但10个猪场均有不同程度的疥螨病。据其结果,应将目前的传统“定期驱虫”改为“科学防虫”,即母猪产前3周驱一次虫和商品仔猪购进时隔离驱一次虫,以后每2-4月检查一次粪便中虫卵或卵囊,根据结果确定是否驱虫。

家兔须癣毛癣菌对8种抗真菌药物敏感性研究

采用丹麦ROSCO药敏纸片扩散法,检测12株家兔须癣毛癣菌对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、特比萘酚、克霉唑、氟胞嘧啶、沃尔康唑和制霉菌素等8种抗真菌药物的敏感性。结果:特比萘酚对须癣毛癣菌的抑菌圈直径最大(平均73 mm),而且12株菌100%对其敏感,抗菌效果最好;其后依次是沃尔康唑、克霉唑和伊曲康唑,按ROSCO严格判读标准12株菌对其敏感率分别为83.3%、83.3%和8.3%;抑菌效果最差的是氟胞嘧啶和氟康唑,按ROSCO基本判读标准其耐药(不敏感)率分别为100%和83.3%。

一种适合检测养殖场环境中链球菌的PCR检测方法

根据溶菌酶释放蛋白的编码序列特点设计引物,以建立养殖场环境中链球菌的PCR快速检测方法。结果在链球菌参考株都扩增到885 bp特异性目的片段,而肠毒素性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等均不能检出;10倍系列稀释结果显示,本方法敏感性可达到检测单个菌株;对处理环境样品时,能检测到4×103CFU/g的环境链球菌。该方法具有简单、快速、准确的特点,大大缩短了检测环境中致病性猪链球菌的时间。

中国西南区畜禽寄生节肢动物名录(三)

本文收集了中国西南区(四川、重庆、云南、贵州和西藏)寄生于鸡、鸭、鹅、兔、猪、山羊、绵羊、黄牛、水牛、牦牛、奶牛、马、驴、骡、犬、猫的寄生节肢动物,共发现310个种,它们分布于20个科,53个属。

猪蓝耳病与猪链球菌、副猪嗜血杆菌混合感染的诊治

2017年10月份,四川省某规模化猪场育肥猪发生死亡,经临床诊断及实验室确诊为猪蓝耳病与副猪嗜血杆菌病、猪链球菌混合感染导致。发病猪群采用七清败毒散拌料、黄芪多糖饮水,肌注头孢噻呋钠,仔猪肌注倍健+倍康肽组合治疗,发病猪群很快得到有效控制。

养殖场环境中链球菌胞外蛋白因子PCR检测方法建立

为了快速检测养殖场环境中链球菌的污染情况,试验利用链球菌胞外蛋白因子核苷酸特异序列设计引物,建立养殖场环境中链球菌的PCR快速检测方法。结果表明:从链球菌标准阳性株中获得大小为197 bp的特异性目的片段,而肠毒性大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌等均不能检出;10倍系列稀释结果显示该方法敏感性可达到单个菌株;在处理环境样品时,能检测到4×103cfu/g的环境链球菌。说明该方法具有简单、快速、准确的特点,大大缩短了检测环境中致病性猪链球菌的时间。

宏基因组法研究不同堆肥处理下猪粪微生物动态结构特征

试验旨在应用宏基因组测序技术探究两种堆肥处理方式下猪粪中微生物的结构组成与分布特征。试验采集同一粪池中的新鲜猪粪,随机分成添加有效微生物(EM)菌的F组和未添加EM菌的K组,每组粪堆各1堆,堆成圆锥形粪堆,粪堆高1.2 m,底部直径2 m;采集堆肥第0、7、14和21天的粪便样本并提取粪便总DNA,运用宏基因组高通量测序技术,比较F组和K组的微生物多样性(组成及结构)差异,并对功能基因进行注释。结果表明,猪粪便中的细菌共测序获得1083607个有效开放阅读框(ORFs);共鉴定出147个门、118个纲、258个目、593个科、2343个属和13193个种;在门水平上,相对丰度前十的细菌界优势菌门有:变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、绿弯菌门(Chloroflexi)、柔壁菌门(Tenericutes)、浮霉菌门(Planctomycetes)、螺旋体门(Spirochaetes)和酸杆菌门(Acidobacteria);在属水平上,两组平均丰度值排名前三十五的属分别属于变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门和疣微菌门;通过KEGG功能预测分析,新陈代谢通路是最丰富的,氨基酸代谢通路和碳水化合物代谢通路是包含功能基因数量最多的二级通路。两组的菌群结构多样性差异表明添加EM菌后会促进堆肥前期的菌群变化。