肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

【目的】研究肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义。【方法】用免疫组织化学方法检测77例手术切除的NSCLC组织中CD133的表达,分析CD133表达与患者吸烟指数、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移、肿瘤T分期、N分期和患者预后之间的关系。【结果】77例NSCLC患者到随访结束时死亡率72.73%(56/77),术后生存时间1～84(s=19)月、3年生存率为32.47%(25/77);无淋巴结结转移组NSCLC的中位生存时间和3年生存率高于有淋巴结转移组(P<0.05)。CD133阳性表达率51.9%(40/77);CD133的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P<0.05),与患者手术后生存期呈负相关(P<0.05)。COX多因素分析仅癌肿病理类型和CD133蛋白表达为影响生存率的独立因素。【结论】NSCLC的淋巴结转移和病理类型与预后有密切关系;肿瘤干细胞标志物CD133蛋白的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关。

全胸腔镜早期非小细胞肺癌根治术临床研究

目的探讨全胸腔镜下早期非小细胞肺癌根治术的临床效果。方法选取我院2007年1月～2010年6月54例早期非小细胞肺癌患者,其中23例行全胸腔镜(C-VATS)、31行胸腔镜辅助小切口(VAMT)肺癌根治术。比较两组手术操作时间、术中出血量、清扫淋巴结数目、术后胸腔引流量、术后住院时间和术后疼痛程度等指标。结果两组患者围手术期均无死亡及严重并发症,C-VATS组和VAMT组之间手术操作时间、术中出血量、清扫淋巴结数目和术后胸腔引流量差别无统计学意义。术后住院时间C-VATS组(7.92±0.86d)较VAMT组(10.54±1.21d)短(P=0.013);术后疼痛程度评分C-VATS组(2.37±0.25)较VAMT组(4.26±1.28)低(P=0.004)。结论全胸腔镜下肺叶切除加纵隔淋巴结清扫符合早期非小细胞肺癌根治术原则,且术后恢复快、疼痛程度轻。

原代培养乳鼠窦房结细胞的形态和kir2.1蛋白表达

目的研究乳鼠窦房结细胞中kir2.1蛋白表达水平,建立一套可靠的乳鼠窦房结定位、细胞培养与鉴定技术,为进一步心脏生物起搏实验奠定基础。方法在石蜡切片中用HE染色、嗜银染色、髓鞘染色和Mallory磷钨酸-苏木素染色法(PTAH)进行乳鼠窦房结定位和形态学观察;取SD乳鼠的窦房结组织进行原代细胞培养,观察培养细胞的形态和搏动频率,免疫组织化学检测其kir2.1蛋白表达。结果综合嗜银染色、髓鞘染色和PTAH染色3种方法可准确定位乳鼠窦房结组织。在培养的窦房结细胞中观察到梭形细胞、三角形细胞和不规则形细胞3种有自发性收缩的细胞,其中梭形细胞最多且形态结构特点和搏动频率符合起搏细胞的特点,三角形和不规则细胞与心房肌细胞特征相似。乳鼠窦房结细胞的kir2.1蛋白表达低于心房和心室肌细胞。结论综合嗜银染色、髓鞘染色和PTAH染色3种方法可以准确定位SD乳鼠窦房结,乳鼠窦房结细胞中kir2.1蛋白表达水平低于心房和心室肌细胞。

肺动脉成形术对非小细胞肺癌患者预后的影响

目的研究支气管袖式肺叶切除同期行肺动脉成形术治疗非小细胞肺癌的效果。方法分析36例行袖式肺叶切除和(或)同期行肺动脉成形术治疗的非小细胞肺癌患者资料。其中支气管袖式肺叶切除12例;单纯肺动脉成形肺叶切除13例、右肺上叶动脉袖式叶切除术1例;支气管袖式切除术加肺动脉成形术8例,支气管、肺动脉双袖式肺叶切除术2例。结果全组术后并发症发生率16.7%(6/36),无围手术期死亡。全组患者3年生存率36.1%(13/36),5年生存率13.9%(5/36)。其中单纯支气管袖式肺叶切除患者3年生存率41.7%(5/12),5年生存率16.7%(2/12);肺叶切除加肺动脉成形术患者3年生存率28.5%(4/14),5年生存率14.3%(2/14);支气管袖式肺叶切除加肺动脉成形术患者3年生存率40.0%(4/10),5年生存率10.0%(1/10);三组患者之间生存率差异无统计学意义(P=0.446)。结论支气管袖式肺叶切除时期行肺动脉成形术治疗局部晚期非小细胞肺癌安全有效。

NSCLC中EMMPRIN表达与淋巴结转移和预后的关系

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）蛋白的表达与非小细胞肺癌（NSCLC）淋巴结转移和预后的关系。方法用免疫组织化学方法检测77例手术切除的NSCLC组织中EMMPRIN的表达。分析EMMPRIN表达、患者吸烟指教、肿瘤T分期、N分期、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转、术后化疗周期教和患者预后之间的关系。结果77例NSCLC患者到随访结束时死亡率72．73％（56／77），术后生存时间1—84个月、中位生存时间为19月、三年生存率为32．47％（25／77）；EMMPRIN的阳性表达率为67．53％（52／77）；EMMPRIN的表达与淋巴结转移呈正相关（P=0．001。r=0．371），与患者手术后生存期呈负相关（P=0．000）。无淋巴细结转移组NSCLC的中位生存时间和三年生存率高于有淋巴结转移组（P=0．001）。在COX多因素分析中，癌肿痛理类型、EMMPRIN蛋白表达和肺癌术后化疗周期数均为影响生存率的重要因素。结论NSCLC的淋巴结转移、病理类型和术后化疗周期与预后有密切关系；EMMPRIN蛋白的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关。

食管鳞癌RhoC和OPN蛋白的表达及其对患者预后的影响

目的研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系。结果(1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P<0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P>0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P<0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P<0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P<0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P<0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P<0.001)。结论食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标。

肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶对非小细胞肺癌预后的影响

目的研究肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶(ECE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义。方法用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中CD133和ECE的表达,分析其与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果77例NSCLC组织中CD133与ECE的阳性表达率分别为51.9%(40/77)和45.5%(35/77)。CD133和ECE的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P<0.05;r=0.339,P<0.05);CD133和ECE的表达均与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。CD133和ECE的表达与肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度均无关(P>0.05)。CD133与ECE的表达之间呈正相关(r=0.249,P<0.05)。结论肿瘤干细胞标志物CD133和ECE的表达与NSCLC的淋巴转移和预后密切相关,它们的高表达提示患者预后不良。

Ras-MAPK通路在食管癌中的研究进展

Ras蛋白是调节细胞生长和增殖信号通路的重要元件。当Ras变异时，将信号转导到下游信号元件可能引起细胞的异常增殖，导致肿瘤发生。抑制Ras及其下游信号可抑制细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡，研究表明Ras信号通路在食管肿瘤的发病过程中起着重要作用。

电喷雾萃取电离质谱直接检测人体呼出气体中的乙腈

人体呼出气体携带大量的生理病理信息,在临床诊断和代谢组学研究中发挥着日益重要的作用。本研究在未对样品进行预处理条件下,采用电喷雾萃取电离质谱(EESI-MS)技术直接测定呼出气体中乙腈分子。在优化的实验条件下,结合多级串联质谱,有效地获得了人体呼出气体中乙腈含量的信息。对气相乙腈的检出限为5.71 pL/L,线性范围为76.4～1910 pL/L。以两名健康志愿者呼出气体为实例,实际检测了其中乙腈的含量分别为134.49和104.40 pL/L,相对标准偏差(RSD)分别为6.3%和7.2%。结果表明,本方法灵敏度高、精密度好、分析速度快、特异性强,能够承受呼出气体中复杂基体的影响,适合于呼出气体中痕量乙腈的直接半定量检测,也可为呼出气体中其它小分子物质的检测提供新思路。

非小细胞肺癌血管内皮生长因子-C和Survivin蛋白的表达及其对患者预后的影响

【目的】研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和survivin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌生物学行为的关系。【方法】应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中VEGF-C和survivin蛋白的表达,分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度(LVD)、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床复发情况和患者术后生存时间的关系。【结果】77例NSCLC组织中,有45例VEGF-C蛋白表达呈阳性(58.4%);有41例survivin蛋白表达呈阳性(53.2%)。VEGF-C蛋白的阳性表达组肿瘤大小和LVD均高于阴性组(P<0.05),VEGF-C蛋白的表达与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。Survivin蛋白的阳性表达组的LVD高于阴性组(P<0.05),survivin蛋白的表达与NSCLC淋巴结转移(r=0.324,P<0.05)和临床复发呈正相关(r=0.233,P<0.05),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。VEGF-C和survivin蛋白在NSCLC组织中的表达之间呈正相关性(r=0.266,P<0.05)。【结论】VEGF-C和survivin蛋白的表达与非小细胞肺癌的生物学行为具有相关性,它们的高表达提示非小细胞肺癌患者预后不良。

胸腔镜下不同节段交感神经切断术治疗手汗症的Meta分析

目的系统评价胸腔镜下不同节段交感神经切断术治疗手汗症的治疗效果。方法利用计算机检索比较不同节段胸腔镜下交感神经切断术(VTS)治疗手汗症的文献。对纳入的12篇文献进行资料提取和质量评价。根据最高手术节段将患者分为T_2组(含T_2、T_2~T_3、T_2~T_4节段)、T_3组(含T_3、T_3~T_4节段)和T_4组,采用Rev Man5.3、STATA软件比较T_2与T_3、T_3与T_4组的疗效差异,采用Review Manager 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入12篇随机对照研究、1 561例患者,其中T_2组542例、T_3组767例、T_4组252例。Meta分析结果显示,T_2组与T_3组手术有效率和术后复发率无统计学差异,T_3组患者满意度(95%CI为0.13~0.63,P<0.01)高于T_2组,代偿性多汗(95%CI为0.03~0.17,P<0.01)、中重度代偿性多汗(95%CI为1.40~3.28,P<0.01)的发生率低于T_2组;T_3组与T_4组手术有效率、满意度和术后复发率无统计学差异,T_4组代偿性多汗(95%CI为1.93~4.26,P<0.01)、中重度代偿性多汗(95%CI为1.67~7.52,P<0.01)、手过干(P<0.05)的发生率低于T_3组。结论在胸腔镜下交感神经切断术中,切断T_4节段与切断T_2、T_3节段比较,在保证手术效果的同时,能明显降低术后并发症的发生,是治疗手汗症更好的选择。

Wnt5a在肺癌A549细胞球增殖和上皮间质转化中的作用及机制研究

目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-catenin、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达变化,并利用MTT和裸鼠成瘤实验观察Wnt5a shRNA慢病毒感染前后A549细胞球的生长抑制率和成瘤能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为60.5%;Wnt5a蛋白在Wnt5a组和Wnt5a+p38组中的表达较对照组明显下调(P<0.05),p-p38蛋白、β-catenin蛋白、Vimentin蛋白在Wnt5a组、p38组和Wnt5a+p38组的表达明显低于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白在上述3组中的表达显著高于对照组(P<0.05)。Wnt5a shRNA慢病毒感染A549细胞球12、24 h和48 h时抑制率显著高于对照组(P<0.05),并且该细胞的成瘤能力较对照组显著下调。结论下调Wnt5a表达可抑制A549细胞球的增殖及EMT能力,可望成为治疗非小细胞肺癌的靶点。

直接获取生物组织内部磷脂类物质的质谱分析方法

选择肺癌组织等多种生物组织为代表性样品,在正离子检测模式下,以磷脂类物质丰度、信号强度高为目标,考察了21种不同组成的CH3OH/H2O溶剂体系,获得了最佳溶剂(CH3OH-H2O,30∶70,V/V),建立了一种无需破坏、研磨即可获取组织内部样品中磷脂类物质信号的内部萃取电喷雾电离质谱(i EESI-MS)方法,并成功应用于肺癌、食管癌、猪肉、牛肉、猪肺、猪心等不同生物组织样品中磷脂类物质的直接质谱分析。本方法无需样品预处理,可通过选择合适的萃取溶剂来提高方法的分析灵敏度和选择性,单个样品的平均分析时间少于1 min,样品耗量少,有望为生物组织样品中磷脂类物质的研究提供一种质谱学新方法。

多层螺旋CT诊断胸食管异物损伤的临床价值

目的探讨MSCT诊断胸食管异物损伤的临床价值。方法 22例胸食管异物损伤患者均接受MSCT平扫,其中13例接受增强薄层扫描及后处理成像。依据MSCT特征、结合临床表现决定诊断及治疗方案。结果 MSCT平扫及后处理影像诊断与临床诊断的总符合率分别为68.18%(15/22)和76.92%(10/13),结合临床特征均确诊。22例中,痊愈20例,死亡2例。结论 MSCT是诊断胸食管异物损伤的最具临床价值的影像学方法,结合临床特征可确诊,对制定科学、合理的治疗方案具有指导意义。

不停跳心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响

【目的】评价不停跳体外循环心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响和探讨其临床意义。【方法】停跳心内直视手术患者25例(A组),不停跳心内直视手术患者20例(B组),取心肌组织作TUNEL细胞凋亡检测,比较分析术前和术后心肌细胞凋亡率并参照围手术期肌钙蛋白T(cTnT)检测。【结果】两组患者均无低心输出量综合征的发生。心肌细胞凋亡指数A组(0.003±0.002)和B组(0.004±0.003)术前无明显差别(P>0.05);术后心肌细胞凋亡指数A组(0.012±0.008,P<0.001)和B组(0.006±0.004,P<0.001)均高于术前;A、B两组术后心肌细胞凋亡指数差别有明显差别(P<0.05)。围手术期cTnT水平A组在CPB末和术后2 h明显高于B组(P<0.05)。【结论】本实验提示不停跳体外循环心内直视手术引起心肌细胞凋亡和心肌损害小于停跳手术。

常规吻合器行微创Ivor Lewis中下段食管癌根治术的临床研究

目的探讨使用常规吻合器胸内吻合在Ivor Lewis式胸腹腔镜联合中、下段食管癌根治术中的可行性、安全性及近期疗效。方法回顾性分析我院2014年6月-2016年4月间20例使用常规吻合器胸内吻合全腔镜Ivor Lewis中、下段食管癌根治术患者的临床资料。结果全组手术顺利,手术时间(270±30)min;淋巴结清扫个数(12±4)枚;手术失血量(150±40)ml;术后胸管拔管时间(7±2)d;术后住院时间(12±2)d。本组1例中转行胸腔镜辅助小切口Ivor Lewis手术,1例出现术后吻合口瘘(经保守治愈),无围手术期死亡、无中转开胸开腹、无其他术后严重并发症。近期随访无死亡。结论通过细节处理,使用常规吻合器行胸内吻合在Ivor Lewis式胸腹腔镜联合中、下段食管癌根治术治疗上是可行的、安全的,能完成所有开放Ivor Lewis手术的步骤,近期疗效满意,远期疗效仍需前瞻性的随机对照临床试验验证。

非小细胞肺癌中EMMPRIN和HGF的表达及其对淋巴结转移和预后的影响

目的:研究细胞外基质蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)和肝细胞生长因子(HGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中EMMPRIN与HGF的表达,分析其与患者吸烟情况、肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中EMMPRIN与HGF的阳性表达率分别为68%和44%。EMMPRIN与HGF的表达均与淋巴结转移呈正相关(r=0.371和0.339,P<0.01),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.01)。EMMPRIN与HGF的表达均与患者吸烟、肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度无关(P>0.05)。EMMPRIN与HGF的表达之间呈正相关(r=0.281,P<0.01)。结论:EMMPRIN和HGF的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关,它们的高表达提示NSCLC患者预后不良。

miR-21抑制物对A549细胞球增殖的影响及机制

目的研究miR-21抑制物在A549细胞球增殖的作用及其相关机制。方法在无血清培养基中培养A549细胞球,形成细胞球后进行CD133+CD44+表达检测。实验分为A549细胞球组:未经处理;IHN组:miR-21抑制物转染A549细胞球组;IHN-NC组:miR-21抑制物阴性对照物转染A549细胞球组。Western印迹检测A549细胞和A549细胞球中DKK2、β-catenin蛋白以及QPCR检测miR-21在两种细胞中的表达;合成miR-21抑制物和阴性对照,分别转染A549细胞球48 h后,应用QPCR检测转染前后miR-21的表达变化,以及使用Western印迹分析DKK2、β-catenin蛋白的表达变化,利用噻唑蓝(MTT)检测12、24、48 h细胞的增殖能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为65.800%;IHN组miR-21的表达以及β-catenin蛋白的表达较A549细胞球组和IHN-NC组显著下调(P<0.05),而DKK2蛋白表达显著升高(P<0.05);MTT结果示IHN组和IHN-NC组在12、24、48 h时抑制率显著高于A549 sphere组(P<0.05),IHN组在24、48 h时相点抑制率明显高于IHN-NC组(P<0.05)。结论miR-21抑制物可有效抑制A549 sphere的增殖,其可能成为治疗肺癌的潜在靶点。

Survivin蛋白在非小细胞肺癌组织表达及与COX-2蛋白的关系

目的研究Survivin和COX-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达及与NSCLC生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中Survivin和COX-2蛋白的表达情况,分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度(LVD)、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床复发情况和术后生存时间的关系。结果77例NSCLC组织中,Survivin蛋白表达呈阳性41例,阳性率为53.2%。Survivin蛋白的表达与NSCLC的LVD、淋巴结转移、临床复发呈正相关(P<0.05),与患者术后生存期呈负相关(P<0.05)。COX-2蛋白表达阳性29例,阳性率为37.7%;COX-2蛋白的表达与LVD呈正相关(P<0.05),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。Survivin和COX-2蛋白在肿瘤中的表达之间呈正相关(r=0.438,P<0.001)。结论Survivin和COX-2蛋白的表达与NSCLC患者的预后密切相关;二者在NSCLC中的抑制癌细胞凋亡方面可能存在共同的激活机制。