胰腺癌组织中表皮生长因子受体、基质金属蛋白酶9的表达及其意义

目的探讨胰腺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测44例胰腺癌、相应癌旁胰腺组织、13例慢性胰腺炎和7例正常胰腺组织中EGFR、MMP-9的表达,并分析其与临床病理特征的相关性。结果正常胰腺组织中均无EGFR及MMP-9的表达。慢性胰腺炎组织中EGFR、MMP-9的阳性表达率分别为23.1%(3/13)和15.4%(2/13)。胰腺癌组织中EGFR、MMP-9的阳性表达率分别为61.4%(27/44)和54.5%(24/44);相应癌旁组织中的阳性表达率分别为34.1%(15/44)和29.5%(13/44)。胰腺癌组织中的EGFR及MMP-9阳性表达率均显著高于相应癌旁组织(P<0.05);胰腺癌组织及癌旁组织中EGFR及MMP-9的表达均显著高于慢性胰腺炎组织和正常胰腺组织(P均<0.05)。EGFR和MMP-9的表达与胰腺癌临床分期、分化程度、血管侵犯及淋巴结转移相关。结论胰腺癌组织中EGFR的表达与MMP-9表达密切相关,EGFR的表达与MMP-9的表达水平可作为了解胰腺癌生物学行为和判断预后的指标。

前列腺癌组织中基质金属蛋白酶9表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在前列腺癌发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR法检测MMP-9在52份前列腺癌和18份前列腺增生(BPH)组织中的表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系。结果前列腺癌组织中MMP-9的表达明显高于BPH组织,P<0.01。MMP-9表达随着前列腺癌分化程度的降低而升高,随临床分期的增高而升高,P均<0.05。结论 MMP-9过表达可促进前列腺癌的发生与发展;其水平变化可为前列腺癌的临床诊断、治疗及预后判断提供依据。

miR-218表达水平与宫颈癌侵袭转移及预后的关系

目的探讨miR-218与宫颈癌侵袭转移和不良预后因素之间的关系。方法用qRT-PCR的方法检测112例宫颈癌患者和21例正常对照的宫颈组织和外周血中miR-218的表达水平,所得数据结合临床资料进行相关分析。结果 miR-218在宫颈癌组织的表达水平明显低于宫颈正常上皮组织,差异有统计学意义(P<0.001)。miR-218的表达水平与宫颈癌FIGO分期、淋巴结转移、深间质浸润、阴道壁累及、脉管浸润有关。结论miR-218在宫颈癌组织中表达下调,且与宫颈癌侵袭转移和不良预后因素密切相关,提示miR-218在宫颈癌的侵袭转移机制中发挥了重要作用。

视网膜色素上皮细胞蛋白质组学研究中二维电泳条件的优化

目的:优化并确立一套适合视网膜色素上皮细胞二维电泳的实验方法。方法:提取视网膜色素上皮细胞可溶性蛋白,改进条件以确立对视网膜色素上皮细胞蛋白进行二维电泳的实验流程。结果:该实验条件对视网膜色素上皮细胞蛋白达到了良好的分离效果,并能通过分析找出正常与病变细胞蛋白表达差异。结论:该优化的实验流程能有效分离视网膜色素上皮细胞蛋白质,并为进一步的差异蛋白质组研究奠定基础。

武汉市江岸区中小学教师骨质疏松症患病率调查及相关因素分析

目的了解中小学教师骨质疏松症的患病率和影响因素,为针对性采取预防措施提供参考。方法检测1075例武汉市江岸区中小学教师的骨密度,采用SPSS 16.0软件包进行统计分析。结果男性中小学教师身高、体重、BMI均明显高于女性(P<0.05);40~49年龄组与50岁及以上年龄组男女中小学教师脚跟骨、腰椎总骨密度均明显低于29岁及以下年龄组(P<0.05),50岁及以上年龄组男女中小学教师脚跟骨、腰椎总骨密度明显低于30~39年龄组(P<0.05);随着男女中小学教师年龄逐渐增长,骨量流失和骨质疏松症发生率明显升高(P<0.05),且女性中小学教师骨量流失和骨质疏松症发生率明显高于男性中小学教师(P<0.05);经多因素Logistic回归分析发现,年龄为脚跟骨、腰椎总骨密度的负相关因素,身高、体重、BMI为脚跟骨、腰椎总骨密度的正相关因素。结论随着年龄增长,中小学教师脚跟骨、腰椎总骨密度明显下降,骨量流失和骨质疏松症发生率明显升高,且女性表现尤为明显,建议采取适宜运动锻炼和合理饮食配伍等多方面综合措施,早期防治骨质疏松症的发生。

年轻男男性行为人群自杀意念及相关因素的随访研究

目的:了解年轻男男性行为人群(YMSM)自杀意念的发展轨迹特征及其相关因素。方法:于2017年9月-2018年1月招募YMSM515例,分别于2018年7-9月、2019年6-7月、2020年10-12月完成随访调查。采用歧视感知量表、心理韧性量表(CD-RISC-10)和领悟社会支持量表(PSSS)分别测量因性取向而感受到的歧视、心理韧性和社会支持水平。本次纳入分析的YMSM有448例,采用轨迹分析模型(GBTM)分析自杀意念发展轨迹的异质性。结果:三次随访显示,分别有16.7%、20.3%、15.6%的YMSM在过去6个月内曾有过自杀意念。GBTM模型将样本分为持续性低自杀意念风险组(86.4%)和持续性高自杀意念风险组(13.6%)。Logistic回归分析显示,不认同自身生理性别(OR=4.69)、向同性恋朋友出柜(OR=2.89)、歧视感知程度高(OR=3.30)的YMSM更可能表现为持续性高自杀意念。年龄更大(OR=0.84)、心理韧性(OR=0.24)及社会支持(OR=0.16)等级高的YMSM较小可能表现为持续性高自杀意念。结论:YMSM年轻男男性行为人群自杀意念存在不同的发展轨迹,较低年龄、具有性别认同问题、向同性恋朋友出柜、歧视感知程度高易出现持续性高自杀意念。

DKK-1在胃癌患者血清和组织中的表达及其临床意义

胃癌是常见的恶性肿瘤之一,其预后尚不理想。DKK-1（dickkopf-1）是Wnt信号通路的一种拮抗剂,但DKK-1在胃癌发生中的生物学效应尚未阐明,研究旨在通过检测胃癌患者血清及组织中DKK-1的表达,探讨其在胃癌诊断中的意义。一、资料与方法1.对象：选取本院2012年3月至2013年10月,拟手术切除胃癌患者78例,术前未接受放、化疗。

循环微小RNA-500在丙型肝炎肝硬化到肝癌病程中的表达

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-500在丙型肝炎肝硬化到肝癌病程中的动态表达，探讨miR-500表达变化在丙型肝炎肝硬化再到丙型肝炎相关性肝癌病变过程中的作用机制。方法选取本院收治8例丙型肝炎肝硬化患者为肝硬化组，8例丙型肝炎病毒感染相关性肝癌患者为肝癌组，另选取8名健康体检者为对照组，利用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）法测定上述3组人群血浆中miR-500的含量。结果肝硬化组中血浆miR-500表达水平为5．72±2．28，高于对照组的0．95±0．48，两者差异有统计学意义（P〈0．05）；肝癌组患者血浆中miR-500表达水平为18．62±8．13，高于对照组和肝硬化组，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-500可能参与内型肝炎肝硬化到肝癌的发生发展过程。

沉默Annexin-A1对小胶质细胞BV-2生长和迁移能力的影响及其机制

目的 探讨沉默Annexin-A1（Anxa1）基因对小胶质细胞系BV-2细胞生长、迁移能力的影响及其可能机制.方法 采用RT-PCR和Western blot法从基因和蛋白水平验证小干扰RNA（siRNA）对小胶质细胞系BV-2细胞内Anxa1的沉默效率,采用MTT法检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞增殖的作用,膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶（AnnexinⅤ/PI）双染流式细胞术检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞凋亡的影响,应用Transwell小室检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞迁移能力的影响,Western blot法检测细胞周期和迁移相关信号通路蛋白的表达.结果 Anxa1 siRNA干扰组在24 h、48 h、72 h细胞生长抑制率分别为（16.9±2.1）%、（23.1±3.6）%和（42.4±1.7）%,与siRNA-NC组[分别为（1.35±0.5）%、（2.06±0.7）%和（8.65±0.9）%]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,沉默Anxa1对BV-2细胞的增殖发挥抑制作用;转染后48 h Anxa1 siRNA组细胞凋亡率为（18.4±2.1）%,明显高于siRNA-NC组（5.2±0.3）%和空白对照组（4.3±0.2）%;Anxa1 siRNA干扰组细胞迁移能力（28.7±5.2）明显低于siRNA-NC组（173.4±11.4,P〈0.01）,Anxa1 siRNA干扰可显著下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达水平和激活p38与JNK信号通路.结论 siRNA沉默Anxa1基因可抑制小胶质细胞的生长、迁移能力,分别通过下调Cyclin D1和激活p38与JNK信号通路来实现.

微小RNAl81b在人肝癌中的表达及其意义

目的观察微小RNAl81b（miR．181b）在正常胚肝细胞株和肝癌细胞株中的表达，检测该微小RNA在正常肝组织及肝癌组织中的表达，探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）法检测miR-181b在l株人正常肝细胞（L02）及2株人肝癌细胞（HepG2、SMMC7721）中的表达，同时收取35例肝细胞癌手术患者正常组织、癌周组织、癌组织，检测其表达并分析；细胞计数试剂盒（CCK-8）实验及细胞生长曲线检测miR-181b抑制剂对肝癌细胞增殖能力的影响。结果miR-181b在肝癌细胞（HepG2、SMMC7721）中的表达比正常肝细胞L02显著增高（0．582±0．032、0．716±0．045、0．255±0．039，P〈0．05），在癌组织中表达显著高于正常组织与癌周组织（0．636±0．038、0．156±0．005、0．167±0．023，P〈0．05），正常组织及癌周组织比较差异无统计学意义（P〉0．05）；miR．181b抑制剂使肝癌细胞增殖能力减弱。结论miR-181b在肝癌细胞及肝癌组织中的高表达，可能与肝癌发生发展密切相关，抑制miR-181b的表达能够抑制肝癌细胞增殖。

长链抗分化非编码RNA在肝癌肝内转移组织的表达及其临床意义

目的探讨长链抗分化非编码RNA(DANCR)在肝癌肝内转移患者血浆和肿瘤组织的表达及临床意义。方法收集确诊为肝癌肝内转移并手术切除的24例患者的肿瘤组织和术前、术后血浆样本,24例肝癌患者的肿瘤组织和血浆样本,以及24例健康受试者的血浆样本。采用定量聚合酶链反应(qPCR)法测定肿瘤组织及血浆样本中DANCR mRNA的表达,并分析DANCR mRNA表达与临床病理特征的关系。结果 肝癌肝内转移患者肿瘤组织(2.85±0.23比1.63±0.16,P<0.01)与血浆中DANCR mRNA表达均高于肝癌患者(0.043±0.007比0.018±0.005,P<0.01),术前血浆中DANCR mRNA表达低于术后(0.035±0.006比0.012±0.004,P<0.05)。肝癌肝内转移患者肿瘤组织DANCR mRNA的表达与原发灶肿瘤大小(P<0.05)、乙肝病史(P<0.05)、Child-Pugh分级(P<0.05)明显相关。结论DANCR的表达水平与肝癌发展明显相关。

PPARα对糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞的作用

目的:观察氯贝特对糖基化终产物(AGEs)刺激下的离体大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用以及对过氧化物酶体增生物激活受体α(PPARα)基因及蛋白表达水平的影响,探讨PPARα在AGEs诱导VSMCs增殖中的作用。方法:体外培养大鼠VSMCs,应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,采用MTT法观察不同浓度的AGEs对VSMCs增殖的影响及氯贝特与AGEs共孵育对VSMCs增殖的干预作用,并用流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR检测PPARα的mRNA表达,Western blotting分析PPARα的蛋白表达。结果:AGEs增加DNA的合成促进平滑肌细胞的增殖,氯贝特激活PPARα,使PPARα的表达量增加,抑制AGEs诱导的细胞增殖和DNA合成。结论:AGEs诱导平滑肌细胞增殖与平滑肌细胞PPARα表达相关,PPARα表达下调可能是产生糖尿病动脉粥样硬化的重要原因之一。

应用二维电泳法对视网膜色素上皮细胞光损伤后蛋白质组学的初步研究

目的应用二维电泳法观察光损伤后视网膜色素上皮细胞蛋白质组的表达。方法运用冷白光以（2200±300）LX光照人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）6h，建立光损伤模型；提取细胞可溶性蛋白并通过二维电泳分离和凝胶图像分析，寻找光损伤细胞的蛋白质谱变化。结果软件分析显示全细胞可溶性蛋白在图谱上出现（390±10）个清晰斑点，11个蛋白斑点有明显表达差异。光损伤细胞内8种蛋白表达上调，1种下凋，2种蛋白表达缺失。讨论二维电泳实验能够找出光损伤RPE细胞与正常细胞的蛋白表达差异，为进一步研究在此改变中发挥重要作用的蛋白质奠定基础。

微小RNA-34a在肝癌组织的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-34a在肝癌组织中表达及其与临床病理特征的关系。方法应用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）技术检测59例肝癌及其癌旁组织中miR-34a的表达量，并分析miR-34a在不同组织中的表达差异及其与肝癌临床病理特征间的关系，探讨miR-34a在肝癌发生与进展中的重要作用。结果肝癌组织中miR-34a的相对表达量（0．52±0．21）明显低于正常肝组织（5．57±1．48，P〈0．05），病理分级Ⅲ-Ⅳ级（0．32±0．12）和TNM分期Ⅲ-Ⅳ期（0．35±0．13）的肝癌患者组织中miR-34a的表达水平明显低于Ⅰ-Ⅱ级（0．69±0．22，0．72±0．19；P〈0．01）。结论miR-34a表达水平与肝癌发生发展及恶性程度密切相关。

微小RNA-181b及其靶基因肝癌缺失基因-1在肝癌发生中的作用

目的 探讨微小RNA（miRNA,miR）-181b对肝癌缺失基因-1（DLC-1）的调控及其在肝癌发病中的作用.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot检测4份正常肝脏组织,17份癌旁组织、肝癌组织及肝癌SMMC7721细胞、胚肝LO2细胞中miR-181b和DLC-1的mRNA和蛋白质表达水平.应用miR-181b抑制剂下调肝癌细胞SMMC7721中miR-181b表达后,实时定量聚合酶链反应和Westem blot检测SMMC7721细胞中DLC-1表达水平的变化.结果 miR-181b在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.162 ±0.004、0.175±0.021和0.656±0.034,肝癌组织高于正常肝组织（P＜0.05）.miR-181b在SMMC7721细胞中的表达较LO2细胞上调（0.723±0.042和0.262±0.037,P＜0.01）.DLC-1 mRNA在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.392±0.094、0.187 ±0.043和0.081 ±0.012,肝癌组织低于正常肝组织（P＜0.05）；DLC-1蛋白在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.423±0.026、0.214±0.029和0.112±0.021,差异有统计学意义（P＜0.01）.miR-181b抑制剂转染SMMC7721细胞后,DLC-1蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为0.132±0.027、0.379±0.019和0.125±0.015,转染组较其他两组明显升高（P＜0.05）.结论 miR-181b在肝癌组织中表达上调,其抑制DLC-1的表达可能是肝癌发生的重要机制.

Annexin-A1模拟肽Ac2-26对大鼠星形胶质细胞活化的影响

目的评价Annexin-A1模拟肽Ac2-26对大鼠星形胶质细胞活化的影响。方法原代培养大鼠皮层组织星形胶质细胞,按随机排序的方法分为4组(n=24):对照组(C组)、LPS组、LPS+乱序肽对照组(LPS+Src组)和LPS+Ac2-26组。LPS组加入LPS终浓度1 mg/ml;LPS+Src组加入LPS终浓度1 mg/ml和乱序肽终浓度3.3 mmol/L;LPS+Ac2-26组加入LPS终浓度1 mg/ml和Ac2-26终浓度3.3 mmol/L。孵育24 h后采用CCK-8法测定细胞存活率,采用Transwell小室测定细胞迁移率,ELISA法测定上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1-β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)浓度,Western blot检测星形胶质细胞神经胶质酸性蛋白(GFAP)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、c-Jun N-末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达水平。计算p-ERK/ERK比值、p-JNK/JNK比值、p-p38MAPK/p38MAPK比值。结果与C组比较,LPS组GFAP表达上调,迁移率、上清液TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-1α浓度、p-ERK/ERK比值、p-JNK/JNK比值和p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P<0.05),细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,LPS+Ac2-26组GFAP表达下调,迁移率、上清液TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-1α浓度、p-JNK/JNK比值和p-p38MAPK/p38MAPK比值降低(P<0.05),LPS+Src组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ac2-26可抑制大鼠星形胶质细胞活化,产生抗炎作用。

微小RNA188-3p靶向调节N-myc下游调节基因1抑制肝癌细胞的增殖

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-188-3p在肝癌发生发展中的作用及其机制。方法收集2018年2月至2019年10月武汉市中心医院肝胆胰外科经手术切除并病理证实的21例原发性肝癌组织标本及对应的13例癌旁组织标本,细胞培养肝癌细胞,用生物信息学预测miR-188-3p和N-myc下游调节基因1(NDRG1)的靶向匹配关系,并用双荧光素酶报告基因系统鉴定。Lipo3000转染miR-188-3p摸拟物后,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time qPCR)检测miR-188-3p和NDRG1 mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测NDRG1蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖。组间比较采用t检验。结果miR-188-3p和NDRG1匹配良好,miR-188-3p能够结合NDRG1 mRNA 3’端非编码区(3’UTR),并有效抑制其mRNA及蛋白表达水平(0.56±0.04比1.12±0.13,t=10.777,P<0.01;0.43±0.07比0.88±0.15,t=9.123,P<0.05)。miR-188-3p能够负向调控NDRG1表达和肝癌细胞增殖(0.76±0.07比1.26±0.19,t=7.509,P<0.05)。结论miR-188-3p可以通过下调靶向癌基因NDRG1的表达来抑制肝癌细胞的增殖。

微小RNA-34a靶向X连锁凋亡抑制蛋白基因对肝癌细胞增殖的影响

目的 观察微小RNA-34a（miR-34a）及其靶基因X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）对肝癌细胞增殖活力和细胞凋亡的影响及其能机制.方法 通过脂质体将人工合成的miR-34a模拟物及其阴性对照以终质量浓度200 nmol/L转染人肝癌SMMC7721细胞,采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测转染后SMMC7721细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡,并进一步采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot分析XIAP的表达水平.结果 转染miR-34a模拟物的实验组细胞的增殖抑制率在24、48、72 h均显著高于对照组细胞（P＜0.01）,并且在72h转染组细胞凋亡率（6.98±0.13）％高于阴性对照组（4.89 ±0.12）％和空白组（4.02±0.21）％（P＜0.05）.miR-34a模拟物转染SMMC7721细胞后,XIAP蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为0.942±0.028、0.489±0.033和0.982±0.032,转染组较其他两组明显降低（P＜0.05）.结论 miR-34a可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其下调XIAP的表达有关.

基于轨迹模型的青少年男男性行为者HIV感染风险及影响因素

目的 探究青少年男男性行为者(young men who have sex with men, YMSM)HIV感染风险发展轨迹,并分析HIV感染风险的影响因素。方法 基于在湖北省、湖南省、江西省3地开展的动态随访队列,运用基于群组轨迹模型(group-based trajectory model, GBTM)分析YMSM人群HIV感染风险的发展轨迹,使用广义估计方程(generalized estimation equation, GEE)分析与HIV感染风险相关的因素。结果 2017年9月20日―2018年1月21日共460名HIV阴性YMSM被纳入随访,GBTM识别出3组HIV感染风险发展轨迹,分别为低风险组、中风险组、高风险组,风险越高组的YMSM首次同性性行为年龄越低、农村户口比例更高,差异均有统计学意义(均有P<0.05)。GEE结果显示首次性行为年龄、抑郁量表得分、同性恋歧视、心理韧性均与HIV感染风险存在关联(均有P<0.05)。结论 YMSM人群普遍存在HIV感染风险且感知歧视水平高者HIV感染风险高,应关注YMSM人群的心理健康。

青少年女同性恋人群抑郁状况及与领悟社会支持关系

目的了解青少年女同性恋人群抑郁状况,并分析其与领悟社会支持的关系,为预防女同性恋抑郁提供参考。方法2018年7—12月,由北京Lespark组织(女同性恋组织)联系并招募研究对象,通过问卷星进行匿名网络问卷调查。结果160名青少年女同性恋中,报告有抑郁症状的占56.9%(91人);总社会支持得分为(58.25±13.39)分,领悟社会支持高水平者占45.6%(90人),其中家庭支持、朋友支持和其他支持得分分别为(17.96±5.64)分、(20.64±4.86)分和(19.65±5.28)分。领悟社会支持水平与抑郁状况有关(OR=0.930,95%CI=0.898~0.964)。结论青少年女同性恋者抑郁症状普遍,且抑郁与领悟社会支持水平有关,其家庭、朋友和社会应积极关注女同性恋者,给予足够的社会支持和心理辅导,预防其抑郁问题的产生。