人参皂苷Rg_1可下调RA滑膜成纤维细胞RANKL/OPG的表达

目的:探讨人参皂苷Rg1对RA滑膜成纤维细胞RANKL/OPG表达的影响。方法:通过Real-time PCR及Western Blot方法检测RNAKL/OPG mRNA及RANKL蛋白表达水平。结果:Rg1可促进RASFs细胞OPG mRNA的表达,下调RANKL mRNA的表达;Rg1可抑制RANKL蛋白的表达。结论:Rg1可下调RA滑膜成纤维细胞RANKL/OPG的表达,从而发挥骨保护作用。

中轴型脊柱关节炎患者外周血Leptin水平与磁共振成像测定骨髓水肿的相关性研究

目的探讨中轴型脊柱关节炎(ax-SpA)患者外周血瘦素(Leptin)水平与磁共振成像(MRI)测定的骶髂关节骨髓水肿的相关性。方法选取ax-SpA患者24例,另选取本院健康体检者12例为对照组。采用Luminex液相芯片技术检测血清Leptin水平,MRI测定骶髂关节骨髓水肿,分析Leptin水平与骶髂关节骨髓水肿、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)和疾病活动度的相关性。结果 Ax-SpA患者外周血Leptin表达显著低于对照组(P <0. 05)。相关性分析显示,Leptin与MRI测定的骶髂关节加拿大脊柱关节炎研究协会(SPARCC)评分呈负相关(r=-0. 42,P <0. 05),与患者总体评价、医生总体评价、晨僵时间、AS功能指数(BASFI)、AS疾病活动指数(BASDAI)、CRP、ESR无相关性。结论 ax-SpA患者外周血Leptin表达下降,且Leptin与骶髂关节SPARCC评分呈负相关。

内皮细胞发育调节基因-1在胶原诱导性关节炎中的作用及机制

目的 探讨内皮细胞发育调节基因-1(Del-1)对胶原诱导性关节炎(CIA)的作用及机制。方法 构建CIA小鼠模型,分为CIA组、Del-1组(Del-1干预CIA),并另设正常对照组。Del-1组给予每只小鼠尾静脉注射Del-1,2μg/次,共2次。采用关节炎指数(AI)评估关节炎病情进展;采用苏木精-伊红染色(HE染色)观察小鼠关节病变;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。结果 初次免疫后第34、36、38、40天,Del-1组AI评分依次为(3.80±1.17)、(3.80±1.17)、(4.20±1.17)、(4.20±1.17)分,低于CIA组的(6.80±1.94)、(8.80±3.19)、(9.60±3.61)、(9.40±3.61)分,差异有统计学意义(P<0.05)。初次免疫后第42天,HE染色显示Del-1组小鼠较CIA组关节局部炎症浸润和滑膜增生明显减轻,软骨破坏明显减少。初次免疫后第42天,ELISA结果显示CIA组小鼠血清IL-6、MMP-9表达较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而Del-1组小鼠血清IL-6、MMP-9表达较CIA组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Del-1能改善CIA模型小鼠关节症状,减轻炎症和骨破坏,抑制关键细胞因子IL-6和MMP-9的表达,可能在RA治疗中发挥一定的作用。

扩散加权成像ADC值在滑膜炎诊断及分级中的应用

目的探讨磁共振扩散加权成像(DWI)表观扩散系数(ADC)值在滑膜炎的诊断及分级中的应用。方法前瞻性纳入29例确诊或者疑似类风湿关节炎的患者;所有患者均行手腕关节DWI及增强磁共振扫描,分析可疑滑膜炎或积液的平均ADC值及最小ADC值;按照强化程度将病灶分为0、1、2和3分,分别代表积液、轻度滑膜炎、中度滑膜炎和重度滑膜炎。Spearman检验用于相关性分析,受试者工作特征(ROC)曲线用于分析诊断效能。结果评分0组ADC值(包括平均ADC值和最小ADC值)大于评分(1~3)组ADC值,差异均具有统计学意义(P均<0.001);平均ADC值和最小ADC值与滑膜炎强化程度呈显著负相关(r=-0.740,P<0.001;r=-0.549,P<0.001);ROC分析结果显示在鉴别评分0组与评分(1~3)组时,平均ADC值的敏感性、特异性及AUC值分别为84.9%、92.5%和0.939。结论扩散加权成像ADC值在滑膜炎的诊断及分级中具有一定潜力,有望在类风湿关节炎的早期诊断及治疗评估中提供有用信息。

误诊为恶性肿瘤的IgG 4相关疾病7例分析

目的总结IgG 4相关疾病(IgG 4-RD)的疾病特征,分析该类疾病早期发病过程中容易被误诊的客观原因。方法回顾性分析7例误诊为恶性肿瘤行手术治疗的IgG 4-RD患者的临床资料、实验室检查、影像学结果、病理表现、治疗和预后情况,并进行随访。结果 7例IgG 4-RD患者中,男5例,女2例,中位年龄为60岁;其中消化系统受累共5例(胰腺3例、胆管2例),甲状腺1例,前列腺1例。实验室检查中,3例患者检测血清IgG 4水平,最高达22.6 g/L,影像学检查均表现为占位性病变;7例患者手术切除组织病理学特征主要为多量淋巴细胞及浆细胞浸润和部分纤维组织增生、免疫组化浆细胞表达IgG 4(+)。部分患者加用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,病情改善。结论 IgG 4-RD临床表现多样,且主要表现为器官或组织占位性病变,易被误诊为恶性肿瘤。组织病理学特征以病变组织IgG 4阳性的浆细胞浸润和纤维化为其突出特点。组织活检病理学检查对辅助诊断和鉴别诊断意义较大。

新型抗风湿药艾拉莫德抑制Th17细胞分化的调节作用

通过研究艾拉莫德抑制Th17细胞分化的调节作用,为临床治疗Th17相关性炎症与自身免疫病提供理论与实验依据。取C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞,磁珠分选CD4+CD62L+T细胞(nave T细胞),以anti-CD3、anti-CD28活化T细胞,同时加入IL-6、TGF-β及IL-23诱导nave T细胞向Th17细胞分化。在上述培养体系中加入艾拉莫德(53.4mmol/L)刺激细胞,并以空白组和MTX(0.3mmol/L)组作为对照。培养3d后收集细胞,流式细胞仪检测CD4+IL-17+Th17细胞的表达;酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)水平;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞IL-17和视黄酸相关的孤儿受体-γt(ROR-γt)基因表达水平。结果提示:在细胞水平,艾拉莫德对Th17细胞的抑制作用强于MTX;在蛋白水平,艾拉莫德对IL-17的抑制作用明显强于MTX(P<0.05);在基因水平,与MTX相比,艾拉莫德对ROR-γt mRNA和IL-17mRNA表达的抑制作用更强(P<0.05)。结果说明,艾拉莫德对Th17细胞的抑制作用强于MTX,艾拉莫德在控制RA病情中的作用可能优于MTX。

人脐带间充质干细胞与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞共培养上调可溶性血管内皮生长因子受体1表达

目的探讨人脐带间充质干细胞（HUCMSC）在炎性细胞因子刺激及与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLSs）共培养条件下表达可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt1）水平。方法①单独培养HUCMSC，或分别以TNF-α、IFN-γ、TNF-α＋IFN-γ刺激HUCMSC，24 h、48 h和72 h后收集上清，ELISA检测各组sFlt1水平。②将RA-FLSs与HUCMSC通过Transwell体系共培养72 h，以RA FLSs和HUCMSC单独培养为对照，ELISA检测各组sFlt1水平。2组间比较采用t检验，多组比较采用单因素方差分析。结果① 24 h和48 h时间点，TNF-α＋IFN-γ组sFlt1浓度较对照组显著升高[24 h（5.4±0.4）ng/ml和（2.8±1.7）ng/ml，t=0.942，P=0.026；48 h（7.2±0.8）ng/ml和（4.3±1.0）ng/ml，t=4.285，P=0.005]。72 h时间点，TNF-α＋IFN-γ组sFlt1浓度高于对照组（9.1±1.7）ng/ml和（7.0±1.4）ng/ml，t=0.683，P=0.52），但差异无统计学意义。TNF-α组和IFN-γ组sFlt1浓度较对照组差异无统计学意义。② HUCMSC表达sFlt1水平高于RA-FLSs（8.19±3.64）ng/ml和（0.19±0.08）ng/ml，t=7.280，P〈0.01）。RA FLSs与HUCMSC共培养后，共培养组sFlt1浓度显著高于HUCMSC组[（17.26±6.92）ng/ml和（8.19±3.64）ng/ml，t=3.985，P=0.000 7]。结论HUCMSC在炎性细胞因子TNF-α联合IFN-γ刺激下表达sFlt1升高。RA FLSs可能通过分泌炎症因子促进共培养HUCMSC上调sFlt1表达。

中轴型脊柱关节炎患者MRI测定骨髓水肿与炎症细胞因子的相关性

目的探讨中轴型脊柱关节炎(ax-SpA)患者MRI测定骶髂关节骨髓水肿与外周血炎症细胞因子的相关性。方法采用MRI检测24例ax-SpA患者骶髂关节骨髓水肿情况,并分析骶髂关节加拿大脊柱关节炎研究协会(SPARCC)评分与患者临床资料的关系。结果 ax-SpA患者骶髂关节SPARCC评分与IL-6、CRP、ESR和强直性脊柱炎疾病活动度评分均呈正相关(r=0.509、0.442、0.453和0.429,P<0.05),而与IL-8、IL-17、IL-21、IL-23、TNF-α、Bath强直性脊柱炎功能指数和Bath强直性脊柱炎疾病活动指数无关(r=0.016、0.147、0.196、0.049、0.096、0.333和0.224,P>0.05)。结论 ax-SpA患者骶髂关节SPARCC评分与IL-6水平和疾病活动度呈正相关;IL-6可作为监测骶髂关节病变的血清标志物。

自身免疫病患者乳汁中羟氯喹的浓度及其影响因素分析

目的检测自身免疫病患者乳汁中羟氯喹及其活性代谢物去乙基羟氯喹(DHCQ)的浓度,结合观察随访,评价哺乳期服用羟氯喹对婴儿的安全性,并探讨导致患者乳汁中药物浓度个体差异的因素。方法纳入服用羟氯喹至少6个月且处于哺乳期的自身免疫病患者,通过建立一种新的高效液相色谱法来检测患者服药前(0 h)、服药后2、4、6 h乳汁样本和服药后6 h全血中羟氯喹及DHCQ的浓度。其次通过测定患者与羟氯喹代谢相关的细胞色素酶P450(CYP)的CYP3A4*1G(rs2242480)、CYP3A5*3(rs776746)、CYP2D6*10(rs1065852、rs1135840)的基因型,分析代谢酶基因多态性与患者乳汁中药物浓度个体差异的相关性。随访哺乳患者的婴儿的视力、听力及一般生长状况。统计学方法采用单因素方差分析、独立样本t检验、χ2分析及Pearson相关性分析。结果共纳入15例患者,服用200 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为(520±261)ng/ml、(177±112)ng/ml;服用400 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为(1036±374)ng/ml、(397±271)ng/ml。全血中羟氯喹平均浓度为(661±308)ng/ml,DHCQ平均浓度为(267±73)ng/ml。其中,4例患者服药后2 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰,11例于服药后4 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰。不同CYP基因型与患者乳汁中药物浓度和达峰时间的个体差异未见相关性。随访服用含有羟氯喹的乳汁5~10个月的婴儿的听力、视力、一般生长状况均无异常。结论乳汁羟氯喹、DHCQ浓度与患者服药剂量呈正相关,乳汁中羟氯喹、DHCQ浓度在服药后4 h达到高峰,服药6 h后乳汁中羟氯喹、DHCQ的浓度和血液浓度相近。建议哺乳期服用羟氯喹的患者可于服药4 h后进行哺乳,减少婴儿通过乳汁摄取的羟氯喹及其活性代谢物。但是,羟氯喹对于婴儿的安全性和CYP基因多态性对于乳汁浓度的影响未来仍需扩大样本和进行长期随访来进一步验证。

抗黑色素瘤分化相关基因5相关无肌病性皮肌炎合并严重射血分数保留型心力衰竭一例

临床无肌病性皮肌炎(CADM)一种以皮肌炎典型皮损为主要表现,至少6个月或更长时间没有肌炎表现或者肌肉磁共振、肌电图等实验室检查轻度异常的一种疾病。抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体相关CADM临床症状以皮肤、肺受累较为多见,心脏受累较少。本文报道1例抗MDA5抗体相关CADM合并重症射血分数保留型心力衰竭病例。

血清25羟基维生素D水平在结缔组织病相关肺动脉高压患者中的临床意义

目的探讨CTD相关肺动脉高压(PAH)患者血清25羟基维生素D[25(OH)D]的水平和临床意义。方法回顾性分析2009年1月至2021年6月南京鼓楼医院风湿免疫科收治的CTD患者,分为CTD相关PAH组(CTD-PAH)以及无PAH的CTD组(CTD-non-PAH)。记录2组人口学特征资料、血清25(OH)D水平及相关结果。采用t检验、Mann-Whitney U检验、χ^(2)检验、Spearman相关性分析及Logistics回归分析。结果①CTD-PAH组的血清25(OH)D水平低于CTD-non-PAH组[(14±8)ng/ml与(20±8)ng/ml,t=-5.94,P<0.001]。②CTD-PAH组的血清25(OH)D缺乏率86.2%(112/130)高于CTD-non-PAH组[57.7%(75/130),χ^(2)=26.07,P<0.001];CTD-PAH组25(OH)D不足率10.0%(13/130)低于CTD-non-PAH组[32.3%(42/130),χ^(2)=19.39,P<0.001]。③SLE、SSc相关PAH组的血清25(OH)D水平分别明显低于无PAH的SLE[[14(8,17)ng/ml与19(15,23)ng/ml,Z=-3.66,P<0.001]、SSc[11(8,17)ng/ml与24(18,30)ng/ml,Z=-4.97,P<0.001]。④CTD-PAH青年组、中年组患者的血清25(OH)D水平分别明显低于CTD-non-PAH青年组、中年组[(12±8)ng/ml与(19±8)ng/ml,t=-4.36,P<0.001;(14±7)ng/ml与(21±8)ng/ml,t=-3.75,P<0.001]。⑤25(OH)D[OR值(95%CI)=1.100(1.058,1.144),P<0.001]、尿酸[OR值(95%CI)=0.996(0.993,0.998),P=0.003]、免疫球蛋白G[OR值(95%CI)=1.123(1.057,1.194),P<0.001]与CTD患者并发PAH有相关性。⑥CTD-PAH组患者血清25(OH)D与血清钙(r=0.24,P=0.007)呈正相关,与免疫球蛋白M呈负相关(r=-0.34,P<0.001)。结论CTD相关PAH的发生发展可能与25(OH)D水平降低程度有关,血清25(OH)D与CTD患者并发PAH有相关性。

Rg1对IL-1β诱导滑膜成纤维细胞表达细胞因子的调节作用

目的研究Rg1对IL-1β诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)表达细胞因子的调节作用。方法将RASFs分为空白对照(A)组、IL-1β20ng/ml对照(B)组、IL-1β20ng/ml+Rg1 0.4μg/ml(C)组、IL-1β20ng/ml+Rg1 4μg/ml(D)组、IL-1β20ng/ml+Rg1 40μg/ml(E)组,采用RT-PCR检测RASFs中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-17、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和MMP-13的mRNA表达水平。结果与A组相比,B组TNF-α、IL-6、IL-8、IL-17、MMP-3和MMP-13mRNA水平升高(P<0.05),而Rg1呈浓度依赖性地抑制TNF-α、IL-6、IL-8和IL-17mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。结论 Rg1抑制RASFs表达炎症因子,减轻关节炎症,也能抑制RASFs表达MMPs,改善骨侵蚀。