大黄素干预高糖培养大鼠肾小球系膜细胞的凋亡

背景:前期工作已经证实中药复方消可宁(制大黄、制附子、生黄芪)能有效防治早期糖尿病肾病并获得国家专利(专利号:200410064899X)。目的:观察大黄主要活性成分大黄素对高糖培养的SD大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法:用20,40,80μmol/L大黄素刺激高糖培养的SD大鼠肾小球系膜细胞,苏木精-伊红染色观察凋亡细胞形态,4',6-二脒基-2-苯基吲哚荧光染色观察细胞核凋亡情况,流式细胞仪观察细胞凋亡率。结果与结论:苏木精-伊红染色及4',6-二脒基-2-苯基吲哚染色结果显示大黄素对高糖培养的肾小球系膜细胞的凋亡有影响,且与浓度与时间成正相关,细胞凋亡率组间差异有显著性意义(P<0.05)。提示大黄素可诱导肾小球系膜细胞凋亡,且与药物浓度及时间成正相关。

耳针、体针、耳体针结合治疗单纯性肥胖病临床疗效比较

目的 观察耳针、体针、耳体针结合治疗单纯性肥胖病的疗效。方法 将 1 95例单纯性肥胖病人分为耳针组、体针组、耳体针结合组分别施治 ,并视不同证型施以相应补泻手法。结果 体针组与耳体针结合组疗效明显优于耳针组 ,体针组证型与疗效无明显关系 ,而耳针组胃肠实热型疗效高于脾虚湿阻型、肾气不足型和肝郁气滞型。

单纯性肥胖病的针灸治疗机理研究进展

单纯性肥胖病为常见病、多发病。针灸治疗本病疗效显著 ,其作用机理有两个方面 ,一方面是针灸能够抑制患者过亢的食欲 ,抑制亢进的胃肠道消化吸收机能 ,从而减少能量的摄入 ;另一方面针灸可以促进能量代谢 ,增加能量消耗 ,促进体脂的动员与分解 ,最终实现减肥效应。其作用是通过对神经、内分泌功能的调整来实现的。本文从临床和动物实验两个方面对针灸治疗单纯性肥胖病的机理研究进行了综述 ,并对今后研究的方向作了展望。

中药复方制剂消可宁对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:观察中药复方制剂消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用。方法:实验于2004-04/11在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成。①中药复方制剂消可宁(由制大黄、制附子、生黄芪组成,南京军区南京总医院制剂科生产,药品批号:院临(2003)第01017号,规格为90mL/袋)。大鼠系膜细胞株HBZY-1购自武汉大学中国典型培养物保藏中心。②将购入的系膜细胞株消化培养,取培养4～8代的细胞,吸去培养瓶中的上清液,消化离心后混匀,锥虫蓝染色观察细胞活性。③不同刺激时间系膜细胞增殖实验设立3组,正常糖浓度组每孔加入5.6mmol/L葡萄糖溶液200μL,高糖对照组每孔加入30mmol/L葡萄糖溶液200μL,高糖+消可宁组每孔加入30mmol/L葡萄糖与0.06g/mL消可宁混合液200μL,6孔/组。各组分别于培养24,48,72h后向板孔中加5g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20μL,于酶标仪492nm波长处检测吸光度值。④不同浓度消可宁刺激高糖环境下系膜细胞增殖实验设立7组,高糖对照组每孔加入30mmol/L葡萄糖溶液200μL,消可宁20,40,60,80,120,200g/L组每孔加入30mmol/L葡萄糖+对应浓度的消可宁混合液200μL,6孔/组。培养72h后各组向板孔中加5g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20μL,同法检测吸光度值。结果:①系膜细胞活性观察:原代培养的4～8代系膜细胞,经锥虫蓝染色,着色的死亡细胞数<5%,未着色活细胞数>95%。②不同刺激时间各组系膜细胞增殖情况的比较:与正常糖浓度组比较,高糖对照组于高糖刺激24h即可促进系膜细胞的增殖,且这种作用在刺激48h时最为明显,至72h细胞数量开始减少,但仍明显高于正常糖浓度组(0.527±0.047,0.659±0.018,P<0.05)。与高糖对照组比较,高糖+消可宁组在24h内并未表现出抑制系膜细胞增殖的作用,而刺激48h后显示出抑制趋势,但差异无显著性意义,于72h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的效应(0.659±0.018,0.538±0.023,P<0.05)。③不同浓度消可宁刺激对高糖环境下系膜细胞增殖的影响:刺激72h后与高糖对照组比较,20,40g/L的消可宁能够部分阻止系膜细胞的增殖;60,80g/L的消可宁则表现出明显阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,且随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强;浓度升至120g/L时出现细胞脱落死亡,高达200g/L时则不见存活的细胞。结论:消可宁能够有效抑制高糖诱导的系膜细胞增殖,可能是其早期防治糖尿病肾病的细胞学基础。

消可宁对早期糖尿病肾病患者体内转化生长因子β_1水平的调节

目的:观察消可宁对早期糖尿病肾病的临床疗效,分析其与尿转化生长因子β1变化的关系。方法:于2003-09/2004-06选择南京医科大学第一附属医院内分泌科收治经临床诊断为2型糖尿病早期肾病属气(阳)虚血瘀证住院患者69例。均符合1999年WHO的糖尿病诊断标准和2002版《中药新药临床研究指导原则》中气(阳)虚血瘀证标准。69例患者随机分为消可宁组37例和对照组32例。对照组给予常规饮食、运动及降糖治疗,消可宁组在此基础上给予消可宁口服液(90mL,袋装,由制大黄、制附子、生黄芪组成,国家专利号:200410064899X),每日1包,分早晚两次口服。治疗3个月后评定疗效(显效:24h尿总蛋白排泄量较治疗前下降≥50%,有效:24h尿总蛋白排泄量较治疗前下降<50%,≥15%,无效:24h尿总蛋白排泄量较治疗前下降<15%或无下降甚至反见上升)。测定两组患者治疗前后24h尿总蛋白与转化生长因子β1的排泄量。结果:69例患者均进入结果分析。①消可宁组临床总有效率84%(31/37),明显高于对照组50%(16/32)(χ2=7.2071,P<0.05)。②消可宁组尿24h总蛋白质排泄量治疗后较治疗前显著减少[(102.8±98.3)mg/d,(157.4±77.6)mg/d,t=2.6519,P<0.05],24h转化生长因子β1排泄量治疗后较治疗前也有所下降,差异有显著性意义[(336.65±75.99)ng/d,(380.04±64.28)ng/d,t=2.6518,P<0.05]。对照组尿24h总蛋白质排泄量和24h转化生长因子β1排泄量也有下降趋势,但与治疗前比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:消可宁对早期糖尿病肾病有较好的治疗作用,这可能与消可宁下调转化生长因子β1的分泌有关。

针刺对单纯性肥胖症远期疗效观察

目的 :观察针刺治疗单纯性肥胖症的远期疗效 ,为进一步研究其作用机理提供临床依据。方法 :98例单纯性肥胖症患者分为胃肠实热 (6 3例 )、脾虚湿阻 (2 4例 )、肝郁气滞 (5例 )和肾气不足 (6例 )等 4型 ,视不同证型施以相应补泻手法减肥。结果 :98例患者均接受 1个疗程的治疗。经 3年随访 ,总有效率 88.8%。结论 :单纯性肥胖症患者的辨证分型不同 ,合并症各异 ,但只要按照中医辨证治疗 ,均可获得良好疗效。

消可宁早期防治糖尿病肾病的临床观察

目的观察消可宁早期防治糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的临床疗效。方法对符合纳入标准的患者,随机分为消可宁治疗组(以下简称消可宁组)和DN对照组(以下简称对照组)。对照组给予常规饮食、运动及降糖治疗,消可宁组在此基础上同时给予消可宁口服液治疗,两组均观察治疗前后24h尿白蛋白排泄量。结果消可宁组临床总有效率显著高于对照组(P<0.05),24h尿白蛋白排泄量治疗后较治疗前明显减少(P<0.05),对照组无显著改变。结论消可宁可阻止或延缓早期糖尿病肾病的发生与发展。

针刺治疗单纯性肥胖病的实验研究

目的 :通过自制高热量饲料喂养 SD大鼠制造肥胖模型 ,观察针刺对其治疗作用。 方法 :用自制高热量饲料喂养雄性 SD大鼠 ,并以普通饲料喂养作为对照。观察针刺前后大鼠摄食量、饮水量、体重、体长、L ee指数、腹股沟和肾周脂肪、血中 TG、TC、BG等指标的变化。 结果 :以高热量饲料喂养的大鼠体重超过普通饲料喂养大鼠的2 0 %作为肥胖标准 ,致肥率为 5 6 %。针刺一疗程后 ,上述指标均有不同程度变化 ,而且具有统计学意义。 结论 :营养过剩是肥胖病的原因之一 ,使用的高热量饲料制造肥胖动物模型是合理的 。

针刺配合耳穴压籽治疗2型糖尿病(肥胖型)67例

目的 :观察针灸治疗 2型糖尿病的临床疗效 ,为进一步研究其作用机制提供临床依据。方法 :6 7例患者分胃肠实热 (34例 )、脾虚湿阻 (13例 )、肝郁气滞 (12例 )、肾气不足 (8例 ) 4型 ,视不同证型施以相应补泻手法 ,比较治疗前后血糖、胰岛素、血脂等的变化。结果 :针灸在调整患者糖脂代谢的同时 。

耳针、体针、耳体针结合治疗单纯性肥胖(英文)

目的:探讨针灸减肥的机制和疗效。方法:将1996-08/1999-07月间就诊的195例患者随机分为体针组(64例)、耳针组(55例)、耳体针结合组(76例)。140例须体针治疗者分胃肠实热(88例)、脾虚湿阻(34例)、肾气不足(11例)、肝郁气滞(7例)4型治疗,视不同证型施与相应补泻手法。131例须耳针治疗者分胃肠实热(85例)、脾虚湿阻(31例)、肾气不足(9例)、肝郁气滞(6例)4型治疗。结果:体针组总有效率81.3%、耳体针结合组总有效率93.4%、耳针组总有效率49.9%;体针组、耳体针结合组临床疗效明显优于耳针组(P<0.05),体针组与耳体针结合组比较,差异无显著性意义(P>0.05),但耳体针结合组总有效率明显高于体针组;体针组四型间总有效率差异无显著性意义(P>0.05);耳针组胃肠实热型与脾虚湿阻、肾气不足、肝郁气滞三型比较P均<0.05,疗效较好。结论:针灸治疗肥胖病取效的关键是辨证取穴,应该多经脉多穴位结合起来考虑问题。有些穴位在不同证型看来似有重复,但由于配穴不同,手法有异,针刺治疗作用也就不同。耳针治疗肥胖对某些证型疗效较好,但若配合体针治疗则相得益彰。

针刺对肥胖大鼠脑干中缝核群单胺类神经递质作用的研究

方法 :用自制高热量饲料喂养刚断乳SD雄性大鼠造成肥胖模型。观察针刺对肥胖大鼠脑干中缝核群单胺类神经递质水平的影响。结果 :肥胖组较正常组中缝核群组织中色胺酸 (Tryp)、5 羟引哚乙酸 (5 HIAA)含量升高 ,5 羟色胺 (5 HT)及 5 HT/ 5 HIAA水平低下。针刺在取得减肥疗效的同时 ,还可以升高中缝核群组织中 5 HT及 5 HT/ 5 HIAA水平 ,降低Tryp、5 HIAA含量 ,针刺前后各组多巴胺 (DA)、去甲肾上腺素 (NE)水平均无显著变化。结论 :针刺对中缝核群 5 HT及其代谢的良性调整作用可能是针刺减肥的因素之一。

单纯性肥胖病的针灸治疗及机理研究进展

本文对单纯性肥胖病针灸治疗的临床概况和作用机理研究进行了综述，并对针灸减肥疗效与机理作了展望。

非胰岛素依赖性糖尿病针刺辨治探要

非胰岛素依赖性糖尿病的病理改变是津液代谢失调 ,而脾胃功能失常是重要的致病因素 ,肾气不足亦不可忽视。辨证分为胃肠实热、脾虚湿阻、肾气不足和肝郁气滞四型 ,主要治疗方法有清泻胃肠实热、平调脾胃功能、补益肾气、通调水道。

消可宁对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控效应(英文)

背景:中药对早期糖尿病肾病有较好的防治作用,这一作用是基于中药有效成分的多样性而作用于糖尿病肾病不同靶点所引起的。目的:观察消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增生的影响,并探讨其可能的作用机制。设计:对照观察。单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科。材料:实验于2003-07/2004-05在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成。大鼠系膜细胞株HBZY-1:购自武汉大学中国典型培养物保藏中心。方法:系膜细胞按说明进行传代培养备用。①不同刺激浓度分组:高糖+消可宁组(消可宁分别取20.0,40.0,60.0,80.0,120.0,200.0g/L);正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L,分别刺激72h进行观察。不同刺激时间分组:正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L;高糖+消可宁组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L,消可宁浓度为60g/L;3组分别在刺激24,48,72h给予观察。②将配置好的细胞悬液放入96孔培养板,每孔加200μL。培养板放置体积分数为0.05CO2,37℃孵箱24h后,取出弃上清,加入各组含不同药物及浓度的细胞液,每孔200μL。将96孔板放入37℃含体积分数为0.05的CO2空气和100%湿度培养箱中孵育。不同刺激浓度组别于72h后分别向板孔中加20μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),不同刺激时间组别于24,48,72h后分别向板孔中加20μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),之后均在37℃培养箱中温育4h,置镜下观察4-甲基偶氮四唑蓝掺入细胞内,吸出上清,加入150μL二甲基亚砜使用甲醇溶解,用平板摇床摇匀振荡30s,于酶标仪492nm波长读数,并记录吸光度值。主要观察指标:不同培养时间及不同消可宁培养浓度下系膜细胞增殖情况(吸光度值)。结果:①不同刺激时间各组系膜细胞增殖的情况:(下转第201页)高糖对照组刺激24,48,72h系膜细胞吸光度值分别为0.685±0.010,0.750±0.087,0.659±0.018,高于正常糖对照组(0.586±0.054,0.598±0.040,0.527±0.047,P<0.05),高糖对照组及正常糖对照组葡萄糖刺激系膜细胞48h吸光度值高于24h(P<0.05),刺激72h吸光度值低于48h,(P<0.05)。高糖+消可宁组药物刺激72h后系膜细胞吸光度值为0.538±0.023,低于高糖对照组(P<0.05)。②不同浓度消可宁刺激系膜细胞增生情况:消可宁自浓度为60.0g/L起,可明显的阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,并随着浓度的增加,这种作用逐渐增强,但过高的浓度(120.0g/L)则出现细胞脱落死亡,极高的药物浓度(200.0g/L)则不见存活的细胞。结论:高糖培养的系膜细胞在消可宁刺激72h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的作用,在一定范围内呈剂量依赖的方式,但过高的药物浓度又表现出很强的细胞毒性。

针刺对肥胖大鼠瘦素水平和瘦素受体基因表达的作用

目的 :探讨针刺减肥的细胞分子作用机制。方法 :采用RT PCR技术测定瘦素受体 (OB R)基因表达水平 ,放射免疫分析测定血清和下丘脑中瘦素 (Leptin)和胰岛素 (INS)的含量 ,观察针刺治疗前后肥胖大鼠体重、李氏 (Lee s)指数、体脂、血清和下丘脑中瘦素和INS的含量以及下丘脑OB R基因表达的变化。结果 :肥胖的大鼠体重、Lee s指数、体脂及血清瘦素和INS水平均显著高于正常大鼠 ,而下丘脑瘦素和INS水平及OB R基因表达水平均明显低于正常大鼠。针刺治疗取得良好减肥疗效的同时 ,肥胖大鼠血清瘦素和INS均明显回降 ,而下丘脑瘦素和INS水平以及OB R基因表达水平却明显升高。结论 :针刺对肥胖机体中枢和外周瘦素和INS水平的良性调整作用以及促进下丘脑OB R基因表达可能是针刺减肥的细胞分子重要机制。

针刺对单纯性肥胖瘦素和胰岛素抵抗的影响研究

目的 :探讨针灸对单纯性肥胖病瘦素和胰岛素抵抗的作用。方法 :采用RT -PCR和NorthernBlot技术测定瘦素受体 (OB -R)基因表达水平 ,放射免疫分析测定血清和下丘脑瘦素 (Leptin)和胰岛素 (INS)的含量。观察针灸治疗前后单纯性肥胖患者血清瘦素、INS、脂质水平的变化 ;还观察针刺治疗前后肥胖大鼠体重、Lee’s指数、体脂、血清和下丘脑瘦素和INS的含量以及下丘脑OB -R基因表达的变化。结果 :单纯性肥胖患者瘦素、INS、总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白—胆固醇 (LDL -C)的含量均显著高于正常人水平 ;而高密度脂蛋白———胆固醇 (HDL -C)却显著低于正常人水平 ,针灸治疗后患者瘦素、INS、TC、TG、LDL -C的含量均明显回降 ,而HDL -C含量却明显回升 ,这种变化与减肥疗效有关。肥胖大鼠体重、Lee’s指数、体脂及血清瘦素和INS水平均显著高于正常大鼠 ,而下丘脑瘦素和INS水平及OB -R基因表达水平均明显低于正常大鼠。针刺治疗取得良好减肥疗效的同时 ,肥胖大鼠血清瘦素和INS均明显回降 ,而下丘脑瘦素和INS水平以及OB -R基因表达水平却明显升高。结论 :针灸对肥胖机体中枢和外周瘦素和INS水平的良性调整作用以及促进下丘脑OB

针刺对肥胖大鼠下丘脑腹内侧核作用的研究

观察针刺对肥胖大鼠下丘脑腹内侧核(VMH)神经细胞自发放电和单胺类神经递质水平的影响。结果显示,肥胖组较正常组VMH中酪氨酸(Tyr)、多巴胺(DA)水平均低下,5-羟色胺(5—HT)和5-羟吲哚乙酸(5—HIAA)水平升高;VMH神经细胞自发放电频率显著低下。针刺在取得减肥效果的同时,可以显著提高VMH神经细胞自发放电频率;还可以升高VMH组织中Tyr、DA、色氨酸(Trp)、5—HT/5—HIAA水平,回降5—HT水平。提示什刺对VMH的良性调整作用可能是针刺减肥关键性因素之一。

针刺对非胰岛素依赖性糖尿病大鼠渴中枢的作用

目的 :探讨针刺对非胰岛素依赖性糖尿病 (NIDDM)的中枢神经作用机制。方法 :采用神经电生理和生化技术观察针刺治疗前后NIDDM大鼠的变化。结果 :NIDDM大鼠空腹血糖 (FBS)、空腹胰岛素 (FINS)和渴中枢神经细胞自发放电频率及去甲肾上腺素 (NA)、多巴胺 (DA)含量明显高于正常大鼠 ,而胰岛素敏感性指数 (IAI)水平明显低于正常大鼠。针刺治疗后NIDDM大鼠FBS、FINS和渴中枢神经细胞自发放电频率及NA和DA含量均明显回降 ,而IAI水平明显回升。渴中枢神经细胞自发放电频率与FBS呈高度正相关 ,与FINS呈中度正相关 ,与IAI呈高度负相关。结论 :针刺对NIDDM大鼠渴中枢的调整作用可能是纠正胰岛素抵抗 (IR) ,调整其异常内分泌代谢的一个重要环节。