贝莱斯芽孢杆菌LJ02中植物免疫蛋白的筛选及其功能

【目的】贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)LJ02菌株能够诱导黄瓜等植物产生免疫抗病反应。本研究从生防菌LJ02中分离鉴定具有激发植物免疫活性的蛋白分子,通过验证其功能,进一步解析免疫蛋白的免疫信号通路。【方法】用硫酸铵沉淀法处理LJ02菌株发酵液,离心获得LJ02蛋白粗提物,将其经凝胶层析后再利用半制备高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分离,收集不同峰值处的蛋白组分。以烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)为靶标进行活性组分的筛选,从而获得具有免疫活性的组分。液相质谱联用仪(LC-MS)检测分析活性组分后发现,在组分F-23中含鞭毛蛋白(flagellin,Flg^(LJ02))。将鞭毛蛋白Flg^(LJ02)进行原核表达并纯化,经过敏性坏死反应(hypersensitive reaction,HR)和抗病试验验证其免疫功能。为确定其主要免疫信号通路,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测水杨酸(salicylic acid,SA)和乙烯(ethylene,ET)途径的相关合成酶基因ICS1、PAL、ACS1以及免疫相关抗性基因NPR1、PR-1、EIN2和EIN3,通过免疫相关抗性基因的相对表达量解析鞭毛蛋白Flg^(LJ02)免疫信号转导途径。【结果】HPLC层析分离出贝莱斯芽孢杆菌LJ02菌液产生的60个外泌蛋白组分(F-1—F-60),免疫烟草接种TMV后,观察分析发现组分F-20、F-23、F-41、F-44具有显著的免疫抗病效应,其中组分F-23抗TMV效果最为显著,其抑制率为81.7%。经过质谱数据分析发现该组分包含鞭毛蛋白Flg^(LJ02)等7种物质。选择鞭毛蛋白Flg^(LJ02)为研究对象构建表达载体,转化大肠杆菌BL21,诱导表达后破碎细胞,获得粗提蛋白。将粗提蛋白过柱、透析纯化后的Flg^(LJ02)渗入珊西烟(Nicotiana tabacum var.xanthi)叶片,24 h后能观察到过敏性坏死反应。将Flg^(LJ02)稀释为终浓度50、100、200μg·mL^(-1)的稀释液后预处理珊西烟叶片,24 h后接种TMV,其对TMV的枯斑抑制率分别为65.6%、76.1%、88.1%。用鞭毛蛋白Flg^(LJ02)处理珊西烟,其SA途径和ET信号途径的免疫抗病相关基因ICS1、PAL、NPR1、PR-1、ACS1、EIN2、EIN3的相对表达量在24—48 h均显著上调。【结论】贝莱斯芽孢杆菌LJ02外泌的鞭毛蛋白Flg^(LJ02)可以激发珊西烟植株的免疫防御反应,提高烟草植株对TMV的抗病性。

新形势下历史教师的理念转变

随着教育改革的不断深入与发展，我国的科学发展异常迅猛，人们的思想观念也随之不断更新。

延续护理联合智能管理系统对社区老年糖尿病生活质量的影响

[目的]探讨延续护理联合智能管理系统对社区老年糖尿病患者生活质量的影响.[方法]构建并使用健康卡识别的计算机软件系统,对辖区内的130例老年糖尿病患者进行延续护理和生活质量等观察比较.130例患者随机分为两组,对照组给予常规社区管理,观察组给予延续护理联合智能管理系统干预.干预3个月后,比较两组患者的依从性、生活质量和满意度等情况.[结果]干预后观察组WHOQOL-BREF量表的生理维度、心理维度、环境维度评分明显高于对照组（P〈0.05）.干预后两组患者的客观支持评分、对支持的利用度和总分均明显高于入组时的对应评分（P〈0.05）,而对照组主观支持评分比较差异无显著性（P〉0.05）.观察组干预后的客观支持、主观支持、对支持的利用度和总分评分均明显高于对照组（P〈0.05）.干预后观察组的护理满意率,用药依从率均明显高于对照组（P〈0.05）.[结论]延续护理联合智能管理系统能改善社区老年糖尿病患者的用药依从性和生活质量,提高其社会支持情况和对社区服务的满意度.

论述水利工程施工中的地基处理技术

水利工程建设施工中,地基施工是基础,其施工质量直接影响着水利工程的整体质量。由于水利工程建设的环境较为复杂,地基地质条件不一,难以满足水利工程施工的质量要求,需要对地基进行处理,因此加强地基处理技术的研究,有着现实的意义。此文中针对水利工程施工中复杂地质环境下的地基处理技术,做了一系列的分析。

优质护理干预对等离子腭咽成形术术后止痛效果分析

目的分析优质护理干预对等离子腭咽成形术术后止痛效果。方法选取我院2017年6月~2019年6月收治的等离子腭咽成形术患者84例,随机分为观察组42例和对照组42例,对照组患者实施常规的护理干预,观察组患者则采用优质护理干预。结果观察组患者的术后疼痛分值明显低于对照组,同时观察组患者焦虑自评、抑郁自评的分值明显低于对照组,P<0.05。结论对于等离子腭咽成形术的患者,实施优质护理干预能有效降低术后疼痛感,减少病人的紧张、焦虑、抑郁等不良心理情绪对病情的影响,提高病人的治疗信心和治疗的依从性,值得临床应用和推广。