变应性接触性皮炎的免疫机制

变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)是由半抗原-特异性T细胞介导、在过敏原接触皮肤后激发产生的迟发型超敏反应(Ⅳ型超敏反应),包含致敏期和激发期。在致敏阶段,半抗原和皮肤中的内源性蛋白组成具有免疫性的抗原蛋白复合体,复合体被抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APCs)捕获后,随APCs从表皮迁移至淋巴结。随后,抗原蛋白复合体活化初始T细胞。活化的T细胞在淋巴结中增殖并分化成为抗原特异性效应T细胞并迁移至循环中。在激发阶段,效应T细胞被皮肤中的APCs再次激活,分泌多种化学介质并引起抗原特异性炎症反应。本文介绍ACD发展过程中的分子和细胞通路以及机制研究的新进展,探索肥大细胞、B细胞、自然杀伤T细胞和自然杀伤细胞等在ACD发展过程中的作用。并对现已建立的动物模型进行总结,讨论其特点和运用。

镍变应性接触性皮炎小鼠动物模型建立

目的建立镍变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)小鼠模型。方法选择30只C57BL/6小鼠,随机分为5组(阳性对照组,阴性对照组,5%-5%硫酸镍组,10%-10%硫酸镍组,10%硫酸镍单次刺激组),于第0天致敏且第2、3天激发,分别于第一次激发后的6、12、24、48 h对各组激发部位炎症进行动态评分;超声扫描表皮厚度;苏木精-伊红染剂(hematoxylin and eosin stain,HE)染色观察激发部位皮肤病理变化;对皮损部位皮肤匀浆进行细胞因子检测。结果各剂量组动物激发部位皮肤24 h炎症程度最强。各剂量组激发部位皮肤表皮增厚,超声扫描显示实验组小鼠表皮厚度为:10%-10%硫酸镍组>5%-5%硫酸镍组>10%硫酸镍单次刺激组。5%-5%、10%-10%硫酸镍组出现表皮结痂,基底层液化,真皮毛细血管扩张,真皮炎性细胞浸润,表现为急性炎症症状,与人类镍过敏的急性病理变化一致。5%-5%、10%-10%硫酸镍组皮损部位干扰素-γ、白细胞介素-4和白细胞介素-10均值水平均有升高,10%-10%硫酸镍组的白细胞介素-4均值水平与阴性对照组相比,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论 5%-5%、10%-10%硫酸镍组成功建立ACD急性小鼠模型。

决明子冻干粉对SD大鼠的长期毒性研究

目的研究大鼠连续1年长期摄入决明子冻干粉的毒性,为人体食用提供参考依据。方法实验选用SPF级SD大鼠480只,雌雄各半。随机分为4组,每组120只。分别为:溶媒对照组(纯净水)、低剂量组(0.5 g生药/kg BW)、中剂量组(2.2 g生药/kg BW)、高剂量组(10.0 g生药/kg BW)。给药体积:1 m L/100 g,每周给药6 d,每天给药1次,连续给药52周,口服(灌胃)给药。每周进行体重和摄食量的测定。动物在给药第13、26、39、52周以及给药26、52周停药恢复4周后,各组分别剖杀20只,雌雄各半。进行血液学、血清生化学测定,剖解主要脏器进行脏器重量称量,计算脏器重量及脏器系数,并对各剂量组脏器进行组织病理学检查。结果 (1)在整个试验周期中未发生因给予决明子药物本身引起的大鼠濒死和死亡的毒性反应。(2)各给药剂量组及对照组大鼠体重均增长,呈现出一定的剂量-反应关系。(3)大鼠连续灌胃给予决明子26周,中剂量、高剂量组雌性大鼠以及高剂量组雄性大鼠的总胆红素偏低(P<0.01),且恢复4周后,高剂量组雄性大鼠的总胆红素依旧偏低(P<0.01)。给药39周后高剂量组雌性与雄性大鼠的总胆红素偏低(P<0.05或P<0.01);给药52周后高剂量组雄性大鼠的三酰甘油比对照组显著性降低(P<0.05),恢复4周后恢复正常。大鼠连续灌胃给予决明子26及39周,中剂量、高剂量组雄性大鼠的肾脏系数显著性高于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)SD大鼠连续灌胃决明子26、39、52周后,在高剂量组出现毒性的靶器官是肾脏,且肾脏毒性不可逆,在低剂量组和中剂量组未出现明显的毒性反应。结论本试验室条件下,决明子冻干粉的未发生毒性反应的剂量为2.2 g生药/kg BW,在高剂量(10.0 g生药/kg BW)下的毒性靶器官主要是肾脏。

利用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠评价药物心脏毒性的初步探索

目的使用两种心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠来评价药物西布曲明(sibutramine)的心脏毒性作用,选择出在评价药物的心脏毒性中具有更高敏感性的动物模型。方法 8周龄雄性Tg(+)型小鼠、s Tg(+)型小鼠、野生型C57BL/6小鼠(WT),各50只,分别随机分成5组,每组10只,溶媒对照组(灌胃给予纯净饮用水)及4个实验组(50、100、150、300 mg/kg西布曲明)。给药过程中进行一般症状观察以及存活率的测定;给药15 d后取血并解剖取心脏,测定各组实验小鼠血生化心脏损伤指标:乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK),肌酸激酶同工酶(CK-MB)。并进行病理组织学检查,免疫组织化学方法观察心脏组织缝隙蛋白43(connexin 43,CX43)的表达情况。结果 (1)血生化指标显示,在给药剂量50 mg/kg和100 mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著高于WT型小鼠(P<0.05或P<0.01);在给药剂量50、100和150 mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著高于s Tg(+)型小鼠(P<0.05或P<0.01);而在给药剂量300 mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著低于WT和s Tg(+)型小鼠(P<0.05或P<0.01),且s Tg(+)型小鼠减小的程度最小。(2)病理组织学结果显示,Tg(+)和WT型小鼠各个给药组均表现出心脏损伤的迹象。(3)免疫组织化学染色显示,随着给药剂量的加大,Tg(+)、s Tg(+)和WT型三种小鼠CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量均逐渐下降,且染色颜色逐渐变浅;而CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量下降程度和染色颜色变浅程度由高到低分别为,Tg(+)型小鼠,其次是WT型小鼠,s Tg(+)型小鼠。结论 Tg(+)型小鼠在评价药物潜在心脏毒性试验中可能比WT型小鼠具有更高的敏感性,而s Tg(+)型小鼠则是很好的心脏毒性保护模型。