胃康宁对功能性消化不良大鼠十二指肠黏膜神经递质变化的研究

目的通过观察胃康宁对功能性消化不良大鼠十二指肠嗜酸性粒细胞、肥大细胞、Ca2+-Mg2+-ATP酶以及相关神经递质的影响,初步探讨功能性消化不良发病与十二指肠的关系,以及胃康宁治疗FD的作用机制。方法将雄性10日龄Wistar幼鼠50只,随机分为正常组15只、模型组15只、胃康宁组10只和阳性药物组10只。采用0.1%IA灌胃法辅以隔日喂养法诱导FD模型。采用免疫组化法检测十二指肠P物质(SP)、5-羟色胺(5-HT)及血管活性肠肽(VIP)的表达。HE染色并计数嗜酸性粒细胞;甲苯胺蓝法染色观察肥大细胞浸润及脱颗粒情况。生物发光法检测Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性。结果与模型组比较,胃康宁方能够上调FD大鼠十二指肠P物质(SP)、5-羟色胺(5-HT)的表达(P<0.05),并可促进功能性消化不良大鼠十二指肠组织Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(P<0.05),亦可使升高的嗜酸性粒细胞下调(P<0.05)。应用图像分析系统,于高倍视野下未观察到明显的肥大细胞浸润。结论 FD的病理生理机制与十二指肠运动障碍及嗜酸性粒细胞浸润有关,胃康宁具有改善胃肠动力、降低胃肠感觉过敏的作用,可能与其调节十二指肠相关神经递质及免疫细胞表达有关。

胃康宁对功能性消化不良大鼠胃排空及血浆胃肠激素水平的影响

目的:本研究旨在通过观察胃康宁对功能性消化不良大鼠胃排空功能及血浆胃肠激素水平的影响,探讨其对功能性消化不良的作用机制。方法:将雄性10日龄Wistar幼鼠50只,随机分为正常组15只、模型组15只、中药胃康宁组10只和阳性药物组10只,采用0.1%IA灌胃诱导大鼠FD模型。观察胃康宁对功能性消化不良大鼠食量、体重、胃排空功能等指标的影响,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆MTL、Ghrelin、obestatin和血清GAS含量变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠摄食量、体重和胃排空率降低(P<0.05),血浆MTL、Ghrelin和血清GAS含量降低,血浆obestatin水平升高;与模型组比较,胃康宁组和多潘立酮组小鼠食量、体重和胃排空率增加,血浆MTL、Ghrelin及血清GAS含量升高,血浆obestatin水平降低。结论:胃康宁对功能性消化不良模型大鼠具有改善胃肠动力、降低胃肠感觉过敏的作用,其治疗机制可能与调节外周血MTL、Ghrelin、obestatin及GAS含量的变化有关。

胃康宁对VDAC1、ATP在能量代谢中干涉效应的影响研究

目的探讨胃康宁对细胞内电压依赖性离子通道(VDAC1)的调节和三磷酸腺苷(ATP)水平的干涉效应及其之间的联系。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞(GES-1),实验分为空白对照组、阳性对照组(多潘立酮),胃康宁低、中、高剂量组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RTPCR)和Western blot法检测VDAC1的mRNA和蛋白表达,生物发光法分别检测给药后细胞内能量ATP的含量;制备功能性消化不良大鼠模型,检测胃康宁对功能性消化不良大鼠胃组织中ATP代谢相关的Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响。结果 (1)胃康宁在基因和蛋白水平上促进VDAC1的表达和细胞内ATP含量。(2)胃康宁促进功能性消化不良大鼠胃组织Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高。结论VDAC1在基因和蛋白水平上表达增加是胃康宁诱导细胞内能量ATP水平升高的分子机制之一,并且体内实验证明胃康宁促进Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,从而对ATP的产生有一定的保护作用,胃康宁作用机制有可能通过能量代谢的途径对功能性消化不良进行治疗。

温肾健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠CCK、MOT表达的影响

目的观察温肾健脾方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠黏膜及回盲部黏膜层胆囊收缩素(CCK)、胃动素(MOT)表达的影响,从实验角度探索该方对IBS-D的疗效及作用机制。方法 48只大鼠随机分为正常组、模型组、温肾健脾方高剂量组、温肾健脾方中剂量组、温肾健脾方低剂量组和对照组等6组,各组8只。参照AL-Chaer造模方法建立IBS-D大鼠模型。造模结束后,治疗组分别予温肾健脾方免煎剂高、中、低剂量灌胃治疗,对照组予四神丸方免煎剂灌胃,模型组予等体积0.9%Na Cl溶液灌胃,给药2周。观察各组大鼠一般情况,并采用免疫组化法检测结肠黏膜及回盲部黏膜层CCK、MOT表达情况。结果治疗后各组大鼠一般情况均有不同程度的好转,温肾健脾方高、中剂量组大鼠的改善情况优于温肾健脾方低剂量组和对照组。与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜、回盲部黏膜层CCK、MOT表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,与模型组比较,温肾健脾方高、中剂量组及对照组大鼠结肠黏膜、回盲部CCK、MOT表达降低,温肾健脾方高、中剂量组结肠黏膜、回盲部CCK、MOT表达低于温肾健脾方低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05);温肾健脾方高、中剂量组结肠黏膜、回盲部CCK表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温肾健脾方对IBS-D大鼠有较好的治疗作用,其治疗机制可能是通过调控结肠黏膜、回盲部黏膜层CCK、MOT的表达而起到调节胃肠道激素的作用。

抑郁症之“调枢启神”理论构建与发微

根据抑郁症的临床诊疗特点,将传统针灸和现代医学相结合,提出"调枢启神"治疗抑郁症。分别从"调枢"和"启神"的内涵与外延进行阐释,认为调枢是调控抑郁及其病理变化的关键环节,即包括调节神明之枢——心脑、调节开阖之枢——少阳;启神既是治疗抑郁症的目的也是治疗手段,临床针刺百会、印堂和耳穴治疗抑郁症即是调枢启神理论的具体运用。

“调枢通胃”理论的探讨与构建

脾胃学说是中医理论中的重要组成部分,自《黄帝内经》以来不断丰富发展。结合当代病证结合的临床诊疗特点,根据脾胃学说及现代医学理论,提出"调枢通胃"理论。阐释"调枢""通胃"的内涵与外延,认为"调枢"即调控疾病及其病理变化过程的关键环节,可包括调节脏腑脾胃、神明之枢心脑、开合之枢少阳;"通胃"既是治疗目的也是治疗手段,即通过调节脏腑之枢脾胃,治疗脾胃功能失调引发的消化系统疾病以及其他脏腑失调引发的疾病。探讨"调枢通胃"理论的构建与意义,为传统中医理论与现代医学的有机结合探索新模式。

温肾健脾法对腹泻型肠易激综合征大鼠血清T细胞亚群表达的影响

目的观察温肾健脾法对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)大鼠血清T细胞亚群CD45+%、CD3+%及CD4+/CD8+表达的影响。方法参照AL-Chaer造模方法联合夹尾及番泻叶灌胃制备IBS-D大鼠模型,造模后30只SD大鼠按随机数字表法分为模型组、四神丸方组及温肾健脾方高、中、低剂量组,每组6只,同时设正常组SD大鼠6只。温肾健脾方高、中、低剂量组分别给予温肾健脾方免煎剂3.100、1.550、0.775 g/(kg·d)灌胃治疗,四神丸方组给予四神丸方免煎剂0.736 g/(kg·d)灌胃,同时正常组和模型组分别给予等体积生理盐水灌胃,持续灌胃2周。观察各组大鼠一般情况、血清T细胞亚群CD45+%、CD3+%及CD4+/CD8+表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清中CD45+及CD3+均升高,CD4+/CD8+值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,温肾健脾方高、中、低剂量组及四神丸方组大鼠血清中CD45+及CD3+均降低,CD4+/CD8+值升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与四神丸方组比较,除温肾健脾方低剂量组CD45+外,其他各指标差异均有统计学意义(P<0.05);与温肾健脾方低剂量组比较,温肾健脾方高、中剂量组及四神丸方组大鼠血清中CD3+均降低,四神丸方组及温肾健脾方高剂量组CD4+/CD8+值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论温肾健脾方对IBS-D大鼠有较好治疗作用,而温肾健脾法治疗IBS-D其机制可能是通过调控血清T细胞亚群CD45+%、CD3+%及CD4+/CD8+比值而起到调节免疫的作用。

中医药治疗功能性便秘优势初探

功能性便秘（functional constipation,FC）是临床上常见的、病因学不明确的顽固难治性疾病,由多种病因引起的,临床以粪便干结、排便困难或不尽感、排便次数减少等为主要表现的一类疾病,并已经排除了肠易激综合征的诊断标准[1]。随着社会老龄化、生活节奏及饮食习惯的改变,功能性便秘的发病率仍在增加,所有年龄均可发生,以女性和非白种人最常见,且向年轻化发展。

胃康宁对人胃黏膜上皮细胞电压依赖性阴离子通道沉默与过表达后细胞能量代谢的作用

目的从能量代谢方面探讨胃康宁治疗功能性消化不良的可能作用机制。方法人胃黏膜上皮细胞GES-1采用3条靶向电压依赖性阴离子通道蛋白1（VDAC1）的siRNA转染细胞后检测其沉默效率;转染DDK-Myc质粒、VDAC1-DDK-Myc质粒检测VDAC1的过表达效率。GES-1细胞以1×10^4个细胞铺96板,分为空白对照组、阳性对照组和胃康宁低、中、高剂量组,每组5个平行孔。空白对照组不加任何药物,阳性对照组细胞沉默或过表达后加多潘立酮片2.5μmol,胃康宁低、中、高剂量组细胞沉默或过表达后分别加0.025、0.100、0.300μg/μl。24 h后利用生物发光法检测各组沉默或过表达前后细胞ATP的含量。结果siRNA1转染能降低VDAC1基因和蛋白水平,DDK-Myc质粒、VDAC1-DDK-Myc质粒转染能均能升高VDAC1蛋白水平,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。各组细胞沉默VDAC1后ATP含量均较本组沉默前降低（P〈0.05或P〈0.01）。各组细胞过表达VDAC1后ATP含量较本组转染前明显升高（P〈0.05）;与空白对照组VDAC1-DDK-Myc转染后比较,胃康宁中剂量VDAC1-DDK-Myc转染后细胞中ATP含量明显升高（P〈0.05）。结论胃康宁可能通过促进胃上皮细胞能量代谢治疗功能性消化不良。