壳聚糖载体柔性固定化木瓜蛋白酶

采用酶柔性固定化模型,以壳聚糖为载体,双醛淀粉为柔性链,对木瓜蛋白酶进行柔性固定化. 通过对固定化条件的优化,得出选用壳聚糖、双醛淀粉制得的柔性载体(Chitosan-DAS50)在酶用量为14.4 mg/g(酶/干球)、pH 8的条件下,固定木瓜蛋白酶18 h,所得的固定化酶活力回收率达72%,相当于采用壳聚糖-戊二醛(Chitosan-GA)手臂载体的3倍. 结果表明,酶的柔性固定化模型可以改善传统共价结合法固定化及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷.

聚合物基质高效液相色谱填料在白细胞介素-2分离中的应用

聚合物型苯乙烯-二乙烯基苯（PS-DVB）微球装填的麦科菲反相高效液相色谱柱（MKF-RP-HPLC）,用于白细胞介素-2（IL-2）分离的最佳色谱条件：流动相A：0.1%三氟乙酸,流动相B：80%乙腈＋0.1%三氟乙酸。B液在30min内从0%线性增大至100%,流速1.0mL/min;检测波长：280nm。在该色谱条件下进行系统性实验,结果表明：MKF-RP色谱柱分离IL-2的柱效、分离度、重复性和拖尾因子均能达到药典要求,且柱效和分离度与SOURCE色谱柱相当;MKF-RP色谱柱的pH适用范围为1-14;柱压与SOURCE色谱柱相当,且低于Hypersil C8色谱柱和Polaris C18色谱柱的柱压,可在更高流速下操作;MKF-RP色谱柱的非极性与SOURCE色谱柱相当;MKF-RP色谱柱的超载性能优于SOURCE色谱柱,其对IL-2进样液的最大载样量为300μg。

Mannich反应制备氨基树脂及由其制备的螯合树脂的吸附性能

以乙酰化聚苯乙烯微球为原料经Mannich反应制备了氮含量达13 7mmol/g的氨基树脂,再由该氨基树脂制备了氨基羧酸型和氨基膦酸型螯合树脂,测试了两种螯合树脂对Cu2+、Zn2+、Ni2+的吸附性能。体系中乙酰基会发生多取代反应。将螯合Cu2+、Zn2+、Ni2+离子的树脂吸附牛血清白蛋白第五组分(BSA-V),结果表明氨基羧酸型树脂对BSA-V的吸附性能优于氨基膦酸型树脂。

硝基苯对傅克酰基化反应制备羧基化聚苯乙烯的影响

在常用的傅克反应溶剂二氯甲烷中添加另一种傅克反应溶剂硝基苯,且酰基化试剂邻苯二甲酸酐(PA)与硝基苯的摩尔比为1时,可大大提高PA的转化率.研究发现,作为傅克酰基化反应的常用溶剂,二氯甲烷和硝基苯的作用是不同的,硝基苯可能参与了傅克酰基化反应的中间过程;研究还发现,硝基苯的加料方式对反应结果的影响,与PA与硝基苯的摩尔比例有关.通过傅克酰基化反应制备了羧基化交联聚苯乙烯微球.

高聚物型色谱柱在高效液相色谱法分离测定有机酸中的应用

考察高聚物型色谱柱(聚苯乙烯-二乙烯基苯,PS-DVB)分离5种有机酸标准品以及琥珀酸发酵液中5种成分的适用性。采用MKF-YJS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.02mol·L-1磷酸二氢铵溶液(用磷酸调pH至2.5)与乙腈以体积比97比3组成的混合溶液;流量1.0mL.min-1;柱温25℃;检测波长为210nm。结果表明:5种有机酸标准品以及琥珀酸发酵液中5种成分均达到了良好的分离效果;琥珀酸质量浓度在0.05～12.0g.L-1范围呈线性,琥珀酸的检出限(3S/N)为0.005g.L-1;进样精密度0.63%(n=5);发酵液中琥珀酸平均回收率为91.8%。

多西环素及有关物质测定的HPLC方法研究

目的建立一种快速而全面的测定多西环素及有关物质的高效液相色谱法。方法色谱柱：高聚物型苯乙烯—二乙烯基苯（PS-DVB）装填的反相高效液相色谱柱（MKF-RP-ZH）;流动相：磷酸二氢钾,四丁基硫酸氢铵,EDTA,叔丁醇混合的水溶液,用1mol/L氢氧化钠溶液调pH到9.5±0.1;检测波长为270nm;流速为1.0mL/min;柱温60℃。结果多西环素保留时间7min左右;在1.25-40μg/mL的浓度内r=0.9993（n=6）,线性关系良好。结论该法可以快速测定多西环素及有关物质土霉素、6-表多西环素、美他环素和4-表多西环素的含量,各杂质的分离度≥1.5,相对于USP32及中国药典2005版该品种项下的色谱条件,系统适应性强。

双波长法用于磺酸型树脂吸附BSA和trypsin的研究

考察了H+ 和Na+ 变化对紫外吸收单波长法、双波长法和考马斯亮蓝法的影响。结果表明双波长法比考马斯亮蓝法和单波长法稳定性要好。选择双波长法用于磺酸型离子交换树脂吸附胰蛋白酶 (trypsin)和牛血清白蛋白(BSA)的检测 ,结果表明 :交换容量为 4 88mmol/g的树脂对BSA和trypsin的吸附速率和饱和吸附量均高于交换容量为 3 17mmol/g的树脂。

双醛淀粉柔性固定木瓜蛋白酶研究

提出“柔性固定化酶”的模型 ,即 :用一亲水、柔性高分子链接枝于载体表面制得柔性固定化载体 ,再用其以共价键合的方式进行酶的柔性固定化。其特点是 :柔性固定可改善因直接固定化及手臂固定化使酶失活的缺陷 ,并提高固定化酶的自由度 ;如选用粒径单分散微球可改善固定化反应及固定化酶催化反应的均一性。以双醛淀粉 (DAS)为柔性链对羧基化聚苯乙烯载体进行柔性化修饰后 ,固定木瓜蛋白酶 ,其活力回收率可达 5 0 % ,相当于用戊二醛进行手臂固定化的活力回收率的

胺化聚苯乙烯载体柔性固定化木瓜蛋白酶

提出酶的“柔性固定化”模型,并以Mannich反应得到担载量为0.4～6.0mmolNH2·g-1的胺化聚苯乙烯树脂为载体,以双醛淀粉为柔性链,对木瓜蛋白酶进行柔性固定化,酶活回收率可达40%～50%,相当于手臂固定化酶活力回收率的1.8～2.4倍,且柔性固定化酶稳定性较好.该结果说明,酶的“柔性固定化”模型可以改善传统共价结合固定化酶及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷.

亲水梳状环氧聚合物载体柔性固定化脂肪酶

以氯乙酰化聚苯乙烯微球载体为大分子引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和亲水性丙烯酰胺为共聚接枝单体,以氯化亚铜及2,2′-联吡啶为催化体系,采用原子转移自由基聚合法接枝合成了具有柔性链的亲水梳状环氧聚合物载体PS-acyl-P（AM-co-GMA）,并将其用于耐有机溶剂YCJ01脂肪酶的共价柔性固定化.结果表明,固定化酶催化对硝基苯酚棕榈酸酯水解的最适温度为45~55oC,pH=8.5,此时酶活为16.6U/g;在80oC以下,pH=5~10时,酶的活性稳定;连续进行7次间歇操作,固定化酶保留初始活性的73.5%;于4oC保存60d,酶活仍剩余86.8%.经亲水梳状环氧载体柔性固定化后,该脂肪酶对有机溶剂的耐受性有所提高.

新型弱碱性阴离子交换树脂对Cr(Ⅵ)的吸附性能

用氯乙酰化聚苯乙烯树脂(PS-Acyl-Cl)代替传统的氯甲基化聚苯乙烯树脂(PS-CH2-Cl),通过其与二乙胺(DEA)的胺化反应得到一种新型弱碱性阴离子交换树脂(PS-Acyl-DEA)。研究了该树脂对C(rⅥ)的静态吸附性能,以期处理含铬废水及铬的富集回收提供理论和实验依据。结果表明,该树脂对C(rⅥ)的吸附量随pH的降低而增加;吸附过程在实验浓度范围内符合Langmuir和Freundlich方程,且最大吸附量达263mg/g,大于文献报道。动力学和热力学研究表明,吸附过程为液膜扩散控制,自发且放热过程。

新型二乙胺阴离子交换树脂制备方法的研究

通过Friedel-Crafts反应在交联聚苯乙烯微球上进行氯乙酰化反应引入氯乙酰基,再经胺化得到弱碱性叔胺型阴离子交换树脂。该方法避免了使用氯甲醚等致癌物质,也避免了二次交联及多取代等副反应。今讨论了不同溶剂对胺化反应的影响,并用数学软件Statistica6.0对反应时间、反应温度、试剂用量等条件进行了优化,得到的最佳条件为:溶剂量5mL·g-1,温度70℃,二乙胺与氯乙酰基摩尔比12:1,反应时间2h。担载量可达3.5mmol·g-1树脂。

草甘膦的邻硝基苯磺酰氯柱前衍生高效液相色谱分析

以邻硝基苯磺酰氯（NBSC）为衍生化试剂，建立了柱前衍生草甘膦的反相高效液相色谱紫外检测法，并对衍生化条件进行了优化。最佳衍生化条件为：衍生温度25℃，反应时间10min，硼砂缓冲溶液浓度0．25mol／L（pH9．0），草甘膦与NBSC的摩尔比为1：5。HPLC分析条件为：采用Lichrospher C18柱，流速1．0mL／min，柱温30℃，检测波长230nm，流动相为体积比20：80的甲醇-0．05mol／L磷酸盐缓冲溶液（pH5．5）。实验结果表明，草甘膦的质量浓度在0．05～1．0g／L范围内线性关系良好，相关系数（r^2）为0．9993，检出限为6．25mg／L。该方法反应条件温和，操作简单，衍生产物稳定。

三甲铵型阴离子交换树脂的制备及其对Cr(VI)的吸附性能

用氯乙酰化聚苯乙烯树脂代替传统的氯甲基化聚苯乙烯树脂,通过与三甲胺反应得到一种新型的三甲铵型强碱性阴离子交换树脂,对该树脂进行了红外光谱表征、元素分析及微孔结构的测定,同时研究了其对Cr(VI)的静态吸附性能.结果表明,该树脂对Cr(VI)的吸附量随pH的降低而增加,pH=2时最大吸附量达117mg/g.吸附过程在实验浓度范围内符合Langmuir和Freundlich方程,相关系数分别为0.9988和0.9769.动力学研究表明,吸附过程符合Boyd液膜扩散方程,相关系数为0.9927.热力学函数ΔG0<0,表明该吸附过程为自发过程;ΔH0=-3648.16J/mol,说明该吸附过程为放热过程,同时ΔS0=3.98J/(K·mol),说明吸附过程熵增加占主导作用.吸附后用5%的NaOH可以将Cr(VI)洗脱,洗脱率达96%以上.

一种新型胺基树脂的制备

以乙酰化聚苯乙烯微球为原料经Mannich反应制备了一种新型胺基树脂,该树脂可替代氯甲基树脂制备的阴离子交换树脂及酶固定化胺基载体,因此,避免了氯甲基树脂生产中使用氯甲醚等致癌物质及多取代、二次交联等副反应的问题.讨论了反应温度和时间、物料比、加料方式、介质中的水量等因素的影响.最佳反应条件为无水乙醇介质,胺:醛:盐酸:乙酰基(摩尔比)=10:10:3.3:1,反应温度100℃,反应时间12h,制备的胺基树脂氮含量为13.7mmol/g.机理研究显示乙酰基发生a-多取代反应.

Friedel-Crafts反应制备乙酰化聚苯乙烯型载体

通过Friedel-Crafts酰基化反应制备了功能化乙酰基聚苯乙烯(PS)载体.该载体经Mannich反应胺化后可替代氯甲基树脂制备的胺基树脂用作酶的固定化载体及制备离子交换树脂.此法避免了氯甲基树脂生产中使用氯甲醚等致癌物质及多取代、二次交联等副反应的问题.考察了反应时间、催化剂和酰基化试剂用量、溶剂体系及溶剂用量等对PS乙酰化反应的影响,优化了反应条件,制得乙酰基PS最大担载量可达5.9mmol/g,并在此范围内可定量获得预期担载量的乙酰基PS载体.

聚(苯乙烯-二乙烯基苯)反相高效液相色谱填料在胸腺素α_1分离中的应用

采用高聚物型苯乙烯-二乙烯基苯（PS—DVB）麦科菲反相高效液相色谱柱（MKF—RP—MH）分离胸腺素α1，优化色谱条件为：流动相A：0．01mol／L磷酸盐缓冲液（pH7．0或8．0），流动相B：乙腈，梯度洗脱条件0～20min，0％～10％乙腈，20～40min，10％～30％乙腈；温度：30℃；流速：0．8mL／min；检测波长：214nm。在优化条件下分离了胸腺素α1标准品和样品。样品浓度在0．05～4g/L时，线性方程为C=0．0099A-0．0798（r=0．9994），胸腺素α1最大载样量为120μg（6g／L）。

一种新型的聚苯乙烯二乙醇胺树脂对铜离子的吸附性能

用氯乙酰化聚苯乙烯树脂(PS-Acyl-Cl)取代常用的原料氯甲基化聚苯乙烯(PS-CH2-Cl)树脂,固载二乙醇胺(DEA)得到一新型的聚苯乙烯二乙醇胺(PS-Acyl-DEA)树脂.用这种PS-Acyl-DEA树脂对铜离子进行吸附,并研究了其吸附动力学和吸附等温线.结果发现,树脂对铜离子的吸附量随DEA担载量的增加而增加,对铜离子的最大吸附量可达3.79mmol/g,且在pH5.6～10.5范围内树脂对铜离子均有稳定的吸附量,树脂的吸附率达到93.8%.

丙交酯交替溶剂重结晶纯化法及其对聚合的影响

研究了交替溶剂重结晶丙交酯的纯化方法。首先优化了重结晶时间:在乙酸乙酯体系中,每百克溶剂中溶解丙交酯45～75g,重结晶最佳时间为3～5h;在乙醇体系中,每百克溶剂中溶解丙交酯30～45g,重结晶最佳时间为1～3h,结果表明,通过控制重结晶时间可达到最佳重结晶效果。以聚合效果比较了以上两种溶剂重结晶的结果,结果表明,乙醇体系重结晶率可高出乙酸乙酯体系约10%,但其纯化的丙交酯经聚合获得的产物分子量却远远低于乙酸乙酯体系。为此,采用交替溶剂重结晶法,即先使用乙醇重结晶丙交酯以获得高结晶率,再以乙酸乙酯重结晶则可在高得率的条件下获得高分子量聚丙交酯。用该法纯化得到的丙交酯经聚合后,产物的分子量可达43×104。