致病性大肠杆菌毒力基因调控的研究进展(一)

本文就致病性大肠杆菌毒力因子协调表达的调控机理和一些对环境条件有反应的毒力相关基因以及球状调控子 (持家调节子、毒力调节子、特异调控子 )对毒力决定簇表达的调控进行了评述 ,以期为研究抗感染治疗提供一定的理论基础。

猪巴氏杆菌病疫苗生产菌种保存期试验

对 3个不同冻干年代 2～ 8℃保存 1 0年以上的猪源多杀性巴氏杆菌 C44- 1、C44- 8、679-2 30冻干菌种按《中华人民共和国兽用生物制品规程》有关规定进行了冻干菌种存活情况检查和全面系统鉴定 ,结果表明此 3株冻干菌种在 2～ 8℃保存 1 0年 ,其菌体形态、菌落特征、生化特性、血清学特性、毒力 (安全性 )、免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》

大肠杆菌毒力因子的分泌

致病性大肠杆菌 (E.coli )与宿主作用时 ,主要利用 、 、 、 型分泌系统分泌一些能改变宿主细胞新陈代谢的毒力因子。 型分泌系统是由 3种在内外膜之间能形成一通道的蛋白质组成 ,是一步分泌 ,如 E.coli的溶血素 ; 、 型分泌系统 ,穿过内膜时伴随 N端氨基酸序列的断裂 ,穿过外膜时包括形成通道 ,由 型分泌系统分泌的蛋白使用通用分泌途径到达胞周间 ,然后再通过通道蛋白穿越外膜 ; 型分泌必须有胞浆蛋白、内外膜蛋白等 2 0多种蛋白的参与 ,这是一种多成分分泌系统 ,利用 ATP提供的能量 ,能把效应分子直接从胞质输送到细胞表面。

伪狂犬病病毒蛋白在毒力、致病机理及传染中的作用

伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）与人单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、水痘－带状疱疹病毒、马、牛疱疹病毒同属于疱疹病毒亚甲科。ＰＲＶ是导致猪神经紊乱的一种高度亲神经性病毒，该病的发生取决于猪的年龄、主动、被动免疫水平，以及导致感染的病毒株毒力和病毒数量。主要通过呼吸道引...

致病性大肠杆菌毒力基因调控的研究进展(二)

本文接上文[1] 继续就致病性大肠杆菌毒力因子协调表达的调控机理和纤毛表达。

旋毛虫抗原的研究进展

本文就旋毛虫的表面、排泄／分泌、菌体三种抗原和磷酰胆碱、糖蛋白、抗原决定簇以及旋毛虫的抗原变异进行了概述。

兽用DNA疫苗的研究进展及应用

本文主要介绍了DNA疫苗的特点、组成、免疫途径、免疫反应的机制、DNA疫苗的捕捉、细胞活素/共同刺激分子和兽用DNA疫苗的研究进展以及应用。

旋毛虫抗原的研究进展

本文就旋毛虫的表面、排泄 /分泌、虫体三种抗原和磷酰胆碱、糖蛋白、抗原决定簇以及旋毛虫的抗原变异进行了概述。

禽多杀性巴氏杆菌病疫苗生产用菌种保存期试验

对三个不同冻干年代 2～ 8℃保存 1 0年以上的 C48- 1、C48- 2以及保存二个不同年代1 50 2冻干菌种按《中华人民共和国兽用生物制品规程》有关规定进行了冻干菌种存活情况检查和全面系统鉴定 ,结果表明 C48- 1、C48- 2、1 50 2冻干菌种在 2～ 8℃保存 1 0年以上 ,其形态、菌落特征、生化特性、血清学特性、毒力、免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》规定标准。

朊病毒的分子生物学研究进展

编者按将Ｐｒｏｎ株称为朊病毒不妥，因Ｐｒｉｏｎ不具备病毒的基本特性，即Ｐｒｏｎ没有核酸结构。编者赞同廖延雄先生１９９８．１１在“中国微生物学会七届二次理事会全体会议暨‘二十一世纪的微生物学’学术研讨会”所作报告中将其译为·朊·粒的提法。朊病毒（Ｐｒｉ...

奶牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定及其毒力基因的检测

本研究旨在分离鉴定来自北京某奶牛场死亡奶牛肺脏的1株疑似病原菌CVCC 3982,并测定其致病性。通过分离培养获得疑似病原菌,采用Biolog鉴定系统和16SrDNA序列分析对其进行了鉴定,人工接种CD-1小鼠测定了其致病性,合成引物对其主要毒力基因进行了检测。结果显示,该疑似病原菌为革兰氏阳性杆菌,β溶血,Biolog鉴定结果显示其为化脓隐秘杆菌,其16SrDNA序列与化脓隐秘杆菌模式菌株NCTC 5224的同源性达100%,系统发育分析显示其与化脓隐秘杆菌处于同一分支。腹腔注射该菌可致小鼠死亡。分离菌株基因组中含有溶血素(PLO)基因,神经氨酸酶H(NanH)基因,神经氨酸酶P(NanP)基因,菌毛基因(fimA、fimC和fimE),但缺失胶原结合蛋白(CbpA)基因和菌毛fimG基因。结果表明该分离菌株为化脓隐秘杆菌且具有致病性。

致猪水肿病大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及应用

本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法。分别针对大肠埃希菌16SrDNA、志贺毒素Stx2eA亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测。结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313bp。特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875CFU。利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e。结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值。

产气荚膜梭菌毒素型菌落多重PCR方法的建立及应用

根据产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因cpa、cpb、etx、iA设计并合成4对特异性引物,建立快速鉴定产气荚膜梭菌毒素型的多重PCR方法。结果显示:产气荚膜梭菌A、B、C、D和E型参考菌株均扩增出相应的片段,而肉毒梭菌、气肿疽梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌的扩增均为阴性;将产气荚膜菌株单个菌落稀释100倍,仍能扩增出相应的目的片段。利用此多重PCR方法对16株不同动物来源的产气荚膜梭菌进行分型鉴定,并与毒素中和试验鉴定结果进行比较,结果显示2种方法具有较高的符合率。该方法可有效进行产气荚膜梭菌的快速检测和分型,对产气荚膜梭菌感染与食品安全问题的研究具有参考价值。

溶血巴斯德杆菌的毒力因子

溶血巴斯德杆菌主要有4种毒力因子:菌毛、多糖荚膜、内毒素(LPS)及白细胞毒素(LKT)。菌毛能促使其在上呼吸道的定居;溶血巴斯德杆菌荚膜抑制补体参与血清的杀灭作用以及吞噬作用和该菌细胞内的杀死,荚膜加强中性粒细胞的直接移居和该菌在肺泡上皮的吸附;溶血巴斯德杆菌的LPS能改变牛白细胞功能,对牛内皮细胞直接产生毒性,调节心、肺的血液动力供应,提高循环中类前列腺物质、血清促进素、cAMP、cGMP;LKT是由所有溶血巴斯德杆菌株产生的一种细胞溶解素,影响反刍动物白细胞和血小板,改变其低水平的功能,但导致高水平的溶解。

环介导等温扩增技术结合横向流动试纸条检测猪链球菌2型的应用研究

目的建立一种猪链球菌2型的快速检测方法。方法以猪链球菌2型cps2J基因序列为检测靶标设计6条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,其中2条促环引物分别标记异硫氰酸荧光素(FITC)和地高辛(Dig),用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物,建立猪链球菌2型LAMP-LFD检测方法。结果所建立的检测方法能够特异性的检测出猪链球菌2型,与试验对照菌株不存在交叉反应,其最低检测限为76cfu/mL,在对100份样品的检测中,LAMP-LFD方法检测出14份阳性样品,培养法检测出12份阳性样品,LAMP-LFD方法检测阳性率略高于病原培养法,两者间的P>0.05无统计学差异。结论所建立LAMP-LFD检测方法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速等特点,适合于动物食品中猪链球菌2型的检测。

猪源多杀性巴氏杆菌荚膜分型及外膜蛋白H基因序列分析

为了解国内猪源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因的变异情况及与荚膜型之间的相关性,本试验采用PCR方法对44株猪源多杀性巴氏杆菌进行荚膜分型和ompH基因的扩增测序。结果显示,44株菌株中22株为荚膜A型,17株为荚膜B型,5株为荚膜D型;44株菌株的ompH基因开放阅读框在1 002~1 056bp之间;SignaIP 4.1预测结果显示,信号肽为N端20个氨基酸残基;ProtParam分析结果显示,成熟蛋白氨基酸残基数量在313~331aa之间,推测的分子质量在33.83~36.46ku之间。序列分析结果显示,44株菌株核苷酸同源性为86.2%~100.0%,氨基酸同源性为86.0%~100.0%;ompH基因核苷酸序列遗传进化树结果显示,荚膜A型、B型和D型菌株分别在不同的分支。试验结果表明,猪源多杀性巴氏杆菌ompH基因在不同血清型之间具有较高的同源性,与荚膜型之间存在相关性。

禽源多杀性巴氏杆菌多位点序列分型研究

为了解国内禽源多杀性巴氏杆菌流行情况,对分离自18省份的84株多杀性巴氏杆菌采用荚膜多重PCR分型和多位点序列分型对其血清型和基因型进行鉴定。结果表明:禽源多杀性巴氏杆菌主要以血清A型为主,占96.4%(81/84);多位点序列分型可将禽源多杀性巴氏杆菌分为5种ST型,其中ST129为主要流行型,占94.0%(79/84)。本研究为我国禽源多杀性巴氏杆菌的流行病学监测和基因多样性提供了数据支持。

猪巴氏杆菌病诊断技术行业标准修订

1修订猪巴氏杆菌病诊断技术的必要性 猪巴氏杆菌病,又称猪肺疫,是危害我国养猪业的重要疫病之一,我国将之定为二类动物疫病。猪巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）引起的一种以败血症和炎性出血为特征的猪传染病。病原主要存在于病猪肺脏病灶及猪的上呼吸道与消化道中,随分泌物及排泄物排出体外,健康猪如接触病猪的排泄物被污染物时,经消化道和呼吸道传染，即可感染发病。

沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品的研制

为研制沙门氏菌马流产凝集试验抗原国家参考品,提高沙门氏菌马流产凝集试验相关试剂半成品和成品检验的准确性和可重复性,按照有关最新规定,在以往各批次沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品的制备和标定技术基础上,规范了该抗原参考品的制备方法 ;采用3种效价血清进行标定,监测其保存期内的稳定性,并将其应用于生产检验实践。结果表明,用该方法制备和标定的沙门氏菌马流产凝集试验抗原参考品效价稳定、品质良好,可作为一种国家参考品使用。