流行性感冒裂解疫苗免疫原性试验及电镜观察

实验报告了以三硝基甲苯X-100(Triton X-100)为裂解剂对流行性感冒病毒裂解效果的电镜观察结果及裂解疫苗的免疫原性。通过对病毒纯化、裂解、再纯化制备的3批流行性感冒裂解疫苗样品的电镜观察,表明使用此裂解剂能使疫苗中的病毒裂解完全,无完整病毒颗粒,裂解效果好。安全试验和免疫试验结果表明疫苗的安全性好,免疫效果好。

流感病毒裂解疫苗裂解剂去除方法的研究

裂解剂的残余含量是流感病毒裂解疫苗的主要质控指标之一。实验中采用膜超滤法和透析法做了裂解剂去除的比较研究。结果表明,膜超滤法效果优于透析法。其血凝素抗原纯化收率达到90%,裂解剂去除达98%以上;疫苗生产无菌操作和细菌内毒素易于控制,成本低,易于大规模生产。

肾综合征出血热病毒糖膜蛋白纯化工艺的改进

为了提高肾综合征出血热 (HFRS)纯化疫苗中糖膜蛋白 (GP)的纯度 ,采用调节pH值使乳鼠脑组织蛋白沉淀的方法 ,对蔗糖密度梯度区带离心脱糖后的GP样品进一步纯化。试验结果表明 ,此方法简便易行 ,能大幅度降低样品中的杂蛋白含量、提高GP纯度。以该法纯化前、后的样品免疫家兔 ,产生的血清中和抗体水平基本一致。用此方法 ,可省去部分昂贵的纯化设备 ,降低生产成本 ,为HFRS纯化疫苗的批量生产提供又一简单可行的途径。

轮状病毒LLR株培养条件的优化

目的为提高轮状病毒滴度,对病毒培养过程中的关键因素如感染复数(multiplicityofinfection,MOI)、胰蛋白酶浓度及维持液pH进行优化,为口服轮状病毒活疫苗生产提供数据依据。方法将轮状病毒LLR株分别以MOI0.005、0.01、0.02、0.04和0.08接种牛肾细胞后收获病毒;以MOI0.02接种牛肾细胞,分别加入含1、2、3、4、5和7μg/mL胰蛋白酶的MEM培养液后收获病毒;以MOI0.02接种牛肾细胞,分别加入pH为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0及8.5的MEM培养液后收获病毒。分别在24、48、72及96h取样,检测病毒滴度。结果以MOI0.02接种牛肾细胞后滴度最高,为7.5lgCCID_(50)/mL;当维持液中胰蛋白酶质量浓度为4μg/mL时滴度最高,为7.2lgCCID_(50)/mL;当pH为6.5及7.0时滴度最高,均为7.5lgCCID_(50)/mL。结论通过对牛肾细胞培养轮状病毒关键条件的优化,获得了提高病毒滴度的有效方法,为口服轮状病毒活疫苗生产过程控制提供数据依据。