Actin启动子的克隆及海洋丝状真菌Phoma herbarum YS4108的遗传转化(英文)

目的:建立一种简便有效的海洋丝状真菌Phoma herbarum YS4108的转基因方法。方法:用简并引物扩增和染色体步行克隆P.herbarum YS4108的actin启动子,以潮霉素抗性基因为选择标记,用部分原生质体化的单细胞进行电转化并摸索最佳电转化参数。结果:成功获得了actin启动子序列,并确定了最佳电转化参数:电压0.75kV(0.2cm电转化杯),电阻400?,载体DNA用量为9μg。在此条件下可获得多于100个转化子/电转化杯(106细胞)。结论:内源性的actin启动子可用于P.herbarum YS4108的电转化,该方法可用于P.herbarum的转基因研究。