节约穿爆费用 重在技术创新

黑岱沟露天煤矿通过优化布孔参数，改进装药工艺，采用低耗爆破器材等措施，使穿爆成本大大降低，总结出一套依靠科技创新，吸收先进经验，降低生产成本的新方法。

加强固定资产管理 提升企业经济效益

固定资产是生产力要素之一,是企业进行生产经营活动的必不可少生产资料,如何管好用好固定资产,对于加强企业的生产经营,提升企业的经济效益,促进企业的稳固发展有着重要意义。

DHX15在HBV复制中的意义及其机制初步研究

目的:筛选DEx D/H-box家族中可能影响HBV增强子或核心启动子转录活性的基因,初步研究DHX15对HBV复制的调控作用。方法:克隆DEx D/H-box家族基因到表达质粒PCH9,并构建由HBV增强子和核心启动子驱动的海肾荧光素酶报告质粒pcore-Rluc;分别将各种DDX表达质粒与pcore-Rluc共转染HepG2细胞,筛选影响Rluc荧光素酶活性的DDX家族成员。在HepG2细胞中共转染HBV1.3倍体质粒和DHX15表达质粒,通过Western blot检测DHX15在细胞中的表达,用Southern blot、Northern blot检测过表达DHX15对细胞中HBV复制水平和转录水平的影响。构建HBV增强子与核心启动子截短突变体,确定DHX15在HBV增强子或核心启动子上的作用区域。结果:成功构建30种DEx D/H-box家族基因克隆;筛选出对HBV增强子/核心启动子有明显影响的基因DHX15(P=0.042);与对照组相比,过表达DHX15能促进HBV DNA的复制水平;并且能上调HBV RNA转录水平;成功构建HBV核心启动子截短突变体,发现DHX15促进HBV的复制是通过增强子实现的(t=8.292,P=0.001;t=5.215,P=0.006)。结论:过表达DHX15可通过影响HBV增强子的活性从而促进HBV复制。

抑制HBV核心启动子转录活性的化合物筛选与鉴定

目的构建靶向核心启动子转录的稳定细胞系,筛选影响乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的药物。方法利用HepG2细胞,以重组慢病毒的方式构建由HBV核心启动子驱动的Gaussia荧光素酶稳定表达细胞系(HepG2-Pcore-Gluc)。通过检测荧光素酶活性来反映核心启动子的活性变化情况。在HBV复制细胞模型中,通过Southern blot、荧光定量PCR等进一步评估经多轮筛选得到的化合物对HBV RNA、HBV DNA的影响。结果利用HepG2-Pcore-Gluc细胞模型筛选1450种小分子化合物,第1轮筛选到41种化合物,能影响荧光素酶活性2倍以上。将这41种化合物进行第2轮剂量依赖性测试,得到2种化合物:逆转素(Reversine)、SCH58261。进一步验证发现:Reversine在瞬时转染HBV1.3倍体的HepG2和HepG2.2.15细胞中,能够有效降低HBV RNA、HBV DNA以及HBeAg、HBsAg的水平。结论建立了一种新型、高效的抗乙肝药物筛选细胞模型(HepG2-Pcore-Gluc),利用该模型筛选到一种新型分子Reversine,该分子可以通过抑制HBV核心启动子的转录活性来抑制HBV RNA的转录。

国有煤炭企业的不良资产问题浅析

国有煤炭企业不良资产存在的危害,制约着企业的快速发展。煤炭企业要加强不良资产的管理,做到“物尽其用”。只有充分发挥企业资产的使用效率,实现产业结构的优化,才能促进国有煤炭企业步入可持续发展的良性循环,使企业健康稳定发展。

NR6A1在HepG2细胞中抑制HBV转录与复制的初步研究

目的:筛选核受体家族中对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)增强子或核心启动子转录活性有影响的基因,初步研究生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,NR6A1)对HBV转录与复制的调控作用。方法:克隆带有核受体家族基因的表达质粒,与海肾荧光素酶报告质粒pcore-Rluc共转染,转染后检测荧光素酶活性,筛选对增强子或核心启动子转录活性有影响的核受体基因。然后在Hep G2细胞中共转染HBV1.3倍体质粒与NR6A1表达质粒;通过Southern blot检测细胞内复制的HBV DNA;Northern blot检测HBV RNA的转录情况。结果:筛选出对HBV增强子/核心启动子有明显影响的基因NR6A1,其作用与对照组(空载和pcore-Rluc共转染)相比,Rluc活性下降约80%,对照组为1.000±0.319,NR6A1组为0.198±0.009(P=0.000)。NR6A1过表达时,BCP(核心启动子,PCH9-1744-Rluc)实验组荧光素酶活性相对值(0.504±0.023)较对照组(空载和PCH9-1744-Rluc共转染,1.000±0.099)下降约50%(t=6.534,P=0.0226),BCP(核心启动子)+EnhⅡ(PCH9-1636-Rluc)实验组荧光素酶活性相对值(0.089±0.002)比对照组(空载和PCH9-1636-Rluc共转染,1.000±0.042)下降约92%(t=31.59,P=0.001)。NR6A1N(NR6A1DBD+Hinge)荧光素酶活性相对值相对于阳性对照组(NR6A1和pcore-Rluc共转染,1.150±0.141)无统计学差异,其荧光素酶活性相对值为(1.000±0.170)(P>0.05)。NR6A1C(NR6A1LBD+Hinge)荧光素酶活性相对值相对于阳性对照组(NR6A1和pcore-Rluc共转染,1.150±0.141)无统计学差异,其荧光素酶活性相对值为(1.160±0.078)(P>0.05)。结论:过表达NR6A1通过抑制核心启动子和增强子II的活性能够显著抑制乙肝病毒的复制。

从FDA批准药物库中筛选影响乙型肝炎病毒核衣壳形成的药物的初步研究

目的从FDA已批准的药物库中,筛选可以干扰乙肝病毒核衣壳形成的药物。方法利用细胞模型SRluc-HBc6,通过分段荧光素酶互补实验来指示二聚体的形成,筛选靶向HBV核心蛋白二聚体形成的药物;对初筛出来的候选化合物,用颗粒凝胶电泳分析法鉴定其对HBV核衣壳形成的影响;用Southern blot方法鉴定候选药物对HBV DNA复制的影响。结果利用SRluc-HBc6细胞模型筛选了FDA批准的1 434种药物,第1轮筛选鉴定到5种药物:苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、克拉屈滨(Cladribine)、亚甲蓝(Methylene Blue)、索拉菲尼(Sorafenib)、瑞格菲尼(Regorafenib);进一步测试发现,苯丁酸氮芥可以减少HBV核心蛋白和核衣壳的形成,抑制HepAD38细胞中HBV DNA的复制。结论苯丁酸氮芥通过减少HBV核心二聚体和衣壳的形成来抑制HBV DNA的复制。

内蒙古临床医生的职业紧张现况及其影响因素

[目的]了解内蒙古临床医生职业紧张现状,并分析其影响因素。[方法]采用整群随机抽样的方法,抽取内蒙古二级(8家)、三级(12家)医院的临床医生作为研究对象,采用目前国际公认的职业紧张量表(OSI-R)对医生的职业紧张状况进行测评。采用t检验、方差分析和多重线性回归分析职业紧张的影响因素。[结果]男性、薪酬高、工龄10~20年、夜班频率高者职业任务得分较高(P<0.05);男性、研究生、每周工作时间长、每月夜班频率高、薪酬高、中高级职称者紧张反应较强(P<0.05);男性、本科、每周工作时间短、薪酬低、初级职称、工龄短者个体应对资源得分较高(P<0.05)。临床医生在职业任务问卷及其各维度(除工作环境)、个体紧张反应问卷及其各维度得分均高于科研人员常模(P<0.05);个体应对资源问卷及其各维度得分低于科研人员常模(P<0.05)。多重线性回归分析显示:职业任务的独立影响因素为性别、薪酬、职称、工龄、夜班频率(F=32.70,P<0.001,R2=0.178);个体紧张反应的独立影响因素为性别、学历、薪酬、职称、工龄、夜班频率、每周工作时间(F=16.951,P<0.001,R^2=0.196);个体应对资源的独立影响因素为性别、学历、职称、薪酬、每周工作时间、工龄(F=26.614,P<0.001,R2=0.146)。[结论]内蒙古临床医生职业紧张程度较高,建议相关部门针对其影响因素制定相应的防护对策,以保护临床医生的身心健康。