金诺芬通过促进自噬对弓形虫增殖的影响

目的:金诺芬对弓形虫速殖子的作用及对弓形虫感染小鼠的自噬初步探讨。方法:透射电子显微镜观察用药前后刚地弓形虫超微结构的变化;采用免疫荧光、免疫组化和免疫印迹法检测感染有弓形虫的脑组织中自噬蛋白 LC3 的变化。 HE 染色观察金诺芬作用前后小鼠脑部的弓形虫速殖子变化。结果:透射电镜显示 10 μg/mL 组(B 组)的弓形虫速殖子内部结构被破坏,虫体细胞膜破裂,细胞质均质样改变,20 μg/mL 组(C 组)的虫体内容物溢出,线粒体及粗面内质网消失,核固缩,核膜断裂,细胞质出现许多空泡,严重者虫体崩解呈均质样改变。免疫荧光结果显示实验组(77.49±15.68)的 LC3 蛋白的表达量较对照组(53.81±15.24)明显增加(P=0.001)。免疫组化结果显示用药后(1 208.55±580.07)的 LC3 蛋白表达量比对照组(544.54±225.04)明显增高(P=0.000)。免疫印迹法检测结果显示用药后(41 738.52±0.00)的 LC3 蛋白表达量比对照组(25 383.88±607.34)明显增高(P=0.000)。用药后(218.80±21.17)寄生在小鼠脑部的弓形虫速殖子增殖数量明显少于对照组(495.40±31.91)(P=0.000)。结论:金诺芬在体外有破坏弓形虫速殖子的作用,同时金诺芬可以提高弓形虫感染小鼠的自噬水平从而抑制弓形虫增殖。