线粒体分裂相关蛋白高表达参与阿霉素大鼠肾病模型蛋白尿的发生

目的:探讨肾小球线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、P-Drp1(Ser616)和线粒体分裂蛋白1(Fis1)表达与足细胞损伤及蛋白尿发生的关系。方法:建立阿霉素大鼠肾病模型,用免疫组化和western blot检测肾小球和肾皮质Drp1、P-Drp1(Ser616)及Fis1的表达,分析上述蛋白表达与蛋白尿及足细胞线粒体形态的相关性。在小鼠足细胞系MPC5过表达Drp1,分析对凋亡和线粒体形态的影响。结果:肾小球和肾皮质Drp1在阿霉素大鼠肾病模型4周和6周时表达增强,肾小球P-Drp1(Ser616)在6周时表达增强,肾小球Fis1在2周和6周时增强。肾小球和肾皮质Drp1、肾小球P-Drp1(Ser616)和Fis1表达与24h尿蛋白正相关。肾小球Drp1表达量与足细胞线粒体胞浆密度和线粒体细胞密度呈负相关。肾小球P-Drp1(Ser616)与足细胞线粒体最大长宽比呈负相关。肾小球Fis1与足细胞线粒体面积和周长呈负相关。过表达Drp1致小鼠足细胞凋亡显著增多,线粒体片段化。结论:肾小球Drp1、P-Drp1(Ser616)与Fis1高表达参与阿霉素大鼠肾病模型蛋白尿的发生,Drp1高表达致线粒体片段化和足细胞凋亡。

1例肾单位肾痨12型的临床特点及TTC21B基因型研究

肾单位肾痨(NPHP)是一组常染色隐性遗传,主要累及肾小管间质的囊性肾病。该文报道1例TTC21B基因突变所致的NPHP12型。患儿女,起病隐匿,3岁6个月首次就诊时即存在中量蛋白尿、肾功能损害、高血压2期,并伴有内脏反位、短指/趾,4岁前进展到终末期肾病。尿蛋白电泳以肾小球性蛋白尿为主。尿β2-微球蛋白、尿α1-微球蛋白等肾小管指标均明显增高。基因检测显示TTC21B基因存在c.1552T>C(p.C518R)、c.752T>G(p.M251R)复合杂合突变,前者来自父亲,后者来自母亲。c.752T>G为新发突变。TTC21B基因突变患儿的肾脏病理除了NPHP典型的肾小管改变外,多同时存在显著的肾小球损害。

儿童系统性红斑狼疮相关肾小管酸中毒五例临床分析

目的探讨儿童系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)相关肾小管酸中毒(renal tubular acidosis, RTA)患儿的临床特点。方法回顾性分析2012年1月至2017年6月北京协和医院收治的5例SLE相关RTA患儿的临床资料,并进行文献复习。结果 5例均为女童,均为远端RTA。确诊RTA年龄为7.0~17.1岁,平均(13.4±4.0)岁。随访时间为14~100个月,平均(62.0±33.6)个月。其中3例同时诊断SLE和RTA,1例为先诊断RTA后诊断SLE,另1例先诊断SLE后发现RTA。分析SLE和RTA的相关指标,发现起病时补体C3的水平越低,血碳酸氢盐水平越低,两者呈显著正相关(r=0.917,P <0.05)。2例曾行肾活检,均有肾小管间质改变。在积极治疗原发病同时予纠正酸中毒、补钾治疗;随着SLE病情缓解,RTA病情控制较好。结论病因不明的RTA患儿,尤其是青春期女孩,应注意排查SLE;SLE患儿应注意评估肾小管损害。对于SLE相关RTA患者,治疗原发病是关键,纠正酸中毒及补钾治疗可改善预后。

线粒体功能紊乱与肾脏损伤

线粒体动力学是指线粒体之间不断进行融合和分裂,处于动态平衡。线粒体动力学紊乱影响线粒体功能,参与神经、心血管和代谢性疾病等多种疾病的发病机制。新近研究发现,线粒体动力学紊乱参与肾小管上皮细胞和足细胞损伤机制,参与急性肾损伤、糖尿病肾病和肾病综合征的发病机制,对其深入理解有助于探索新的肾脏保护靶点。本文对线粒体动力学紊乱与肾脏损伤研究进展加以综述。

Ⅲ型或Ⅳ型狼疮性肾炎患儿环磷酰胺诱导治疗3和6个月后序贯吗替麦考酚酯的非随机对照试验

目的对肾脏病理Ⅲ型或Ⅳ型的狼疮性肾炎(LN)患儿用环磷酰胺(CTX)诱导治疗3和6个月后序贯吗替麦考酚酯(MMF)的疗效和不良反应进行探讨。方法非随机对照试验。Ⅲ型或Ⅳ型LN患儿,在患儿家长充分知晓CTX诱导治疗3个月(A组)和6个月(B组)后序贯MMF不同方案利弊的前提下,根据患儿家长意愿入A组或B组,考察两组疗效和随访12个月时药物不良反应事件。主要结局指标为有效率(完全缓解+部分缓解),完全缓解:血常规、肾功能、白蛋白、血沉正常,补体C3≥0.73 g·L-1,C4≥0.1 g·L-1,抗ds-DNA抗体免疫荧光法和ELISA法检测双阴性,且24 h尿蛋白定量<150 mg;部分缓解:达到以下任意1项,①24 h尿蛋白定量较治疗前降低50%,且总量<3.5 g·24 h-1,②血肌酐和尿蛋白/肌酐较治疗前改善50%,③血肌酐较治疗前改善50%,尿蛋白/肌酐<1.0,实验室检测均较治疗前有改善。结果2012年1月至2018年1月符合本文纳入和排标准的33例患儿进入本文分析。A组和B组在发病年龄、肾活检年龄、性别、发病季节、居住环境、肾脏病理类型和自身免疫性疾病家族史差异均无统计学意义。两组治疗前、诱导治疗结束时(A组3个月、B组6个月)和治疗后12个月实验室检查指标(血常规、肾功能、补体、白蛋白、尿蛋白、抗ds-DNA抗体和ESR)差异均无统计学意义。诱导治疗3个月时两组患儿有效率差异无统计学意义,治疗3个月时A组和B组患儿CTX累积用量(mg·kg-1)分别为(94.0±20.5)和(104.1±34.8),差异无统计学意义(P=0.39),3个月及6个月时CTX平均累积量与治疗有效率不相关(r=0.95,P=0.051)。两组总的药物不良反应发生率差异无统计学意义,药物不良反应主要表现为WBC<4×109·L-1、感染、胃肠道不适、月经不规律,均未出现因使用CTX所致的脱发及出血性膀胱炎。结论Ⅲ型或Ⅳ型LN患儿CTX诱导治疗3和6个月后序贯MMF对治疗结局无影响。

GLIM营养不良诊断标准在系统性红斑狼疮病人中的应用

目的:使用全球领导人营养不良倡议(GLIM)诊断标准分析系统性红斑狼疮(SLE)病人营养不良的发生率,并探讨营养评估指标与SLE疾病活动的相关性。方法:选取122例SLE病人,根据SLE疾病活动度分为SLE疾病活动组(SLEDAI-2K≥5,n=62)和SLE非疾病活动组(SLEDAI-2K <5分,n=60),比较两组病人的临床资料、实验室指标、生物电阻抗人体成分(BIA),使用GLIM诊断标准分析SLE病人营养不良的发生率,并分析营养评估指标与SLE疾病活动的相关性。结果:与SLE非疾病活动组相比,疾病活动组病人的血红蛋白、淋巴细胞计数、血清白蛋白、补体C3、补体C4水平显著偏低,而血沉、尿素氮水平较高(P <0.05)。SLE疾病活动组的全身相位角(PhA)及体脂肪显著低于非疾病活动组(P <0.05)。76例(62.3%)SLE病人具有营养风险,其中SLE疾病活动组病人48例,显著高于非疾病活动组28例(77.4%vs 46.7%,P=0.001)。72例(59.0%)SLE病人诊断营养不良,其中SLE疾病活动组病人46例显著高于SLE非疾病活动组26例(74.2%vs 43.3%,P <0.01)。SLE疾病活动组发生重度营养不良30例显著高于非疾病活动组6例(65.2%vs 23.1%,P <0.01)。SLE病人疾病活动度与BIA中全身相位角(PhA)呈负相关,与营养不良发生率呈正相关。结论:高疾病活动度的SLE病人营养风险及营养不良的发生率高,GLIM诊断标准可用于评估SLE病人的营养状态及程度,营养评估指标与SLE疾病活动度显著相关。

以肾病综合征起病的儿童狼疮性肾炎的临床分析

目的探讨以肾病综合征(nephrotic syndrome, NS)起病的儿童狼疮性肾炎(lupus nephritis, LN)的临床特点及治疗转归。方法选择2013年1月至2018年1月北京协和医院收治的79例LN患儿,根据起病时临床表现分为NS组(31例)及非NS组(48例),比较两组的临床表现、实验室检查结果及治疗转归。结果肾脏病理类型均以Ⅳ型多见。起病时,NS组皮疹、关节炎、ALT异常的发生率及ALB和T-BIL水平显著低于非NS组(P<0.05)。NS组浆膜腔积液发生率、WBC、TC、24 h尿蛋白定量、系统性红斑狼疮活动度指数(systemic lupus erythematosus disease activity index, SLEDAI)评分、肾损害程度均显著高于非NS组(P<0.05)。治疗6个月后,NS组治疗有效率显著低于非NS组(74.2%比91.7%,P<0.05)。NS组达到临床缓解所需时间显著长于非NS组[(5.5±3.5)个月比(3.8±2.9)个月,P=0.02]。结论以NS起病的患儿肾损害程度更严重,达到临床缓解所需要的时间更长。胆红素水平可能是NS表现的LN患儿疾病活动的一个新的观察指标,具体机制有待进一步阐明。

人体组分在系统性红斑狼疮患者营养评定中的应用

目的:评估系统性红斑狼疮(SLE)患者的营养状况,分析SLE患者营养不良的危险因素。方法:选取本院风湿免疫科收治的120例SLE患者,根据全球领导人营养不良倡议(GLIM)对SLE患者进行营养评定,分为非营养不良组(n=63)和营养不良组(n=57),对比分析两组患者的临床资料、实验室指标、人体组分数据和SLEDAI-2000评分,Logistic回归分析预测SLE患者营养不良的危险因素。结果:①SLE营养不良组患者的身高、体重、血红蛋白、血白蛋白、补体C3、补体C4水平均明显低于非营养不良组,差异具有统计学意义(P<0.05);SLE营养不良组的SLEDAI-2000评分中位数为6.5,明显高于非营养不良组(1.0,P<0.001)。②SLE营养不良组的全身相位角、身体总水分、蛋白质量、骨骼肌量、身体细胞量、细胞内水分等人体成分明显低于非营养不良组(P<0.05)。③Logistic回归结果显示,全身相位角(OR:0.364,95%CI:0.180~0.737,P=0.005),蛋白质量(OR:0.195,95%CI:0.042~0.892,P=0.035)是SLE患者营养不良的独立影响因素。结论:运用人体组分对SLE患者进行营养评定,可全面、准确地了解患者营养状况,为整体改善SLE患者临床预后提供依据。

儿童风湿性疾病相关药物的药物基因组学研究进展

儿童风湿性疾病是以肌肉、骨骼系统、血管和皮肤的急、慢性炎症为主要表现的全身性疾病。糖皮质激素、非甾体类抗炎药、免疫抑制剂以及生物制剂等广泛用于此类疾病的治疗,这些药物的疗效和不良反应具有显著的个体差异。本文从药物基因组学角度,综述相关基因的多态性对此类药物治疗的影响,展望未来药物基因组学可以为儿童风湿性疾病个体化治疗提供理论依据。

炎症小体病研究进展

炎症小体(inflammasome)是由受体蛋白分子、接头分子和效应分子三部分构成的高相对分子质量蛋白复合体,通过招募pro-caspase-1并使其发生自身水解,产生具有酶活性的caspase-1,再对pro-IL-1β和pro-IL-18进行剪切活化,使成熟的IL-1β和IL-18分泌到胞外发挥促炎作用。研究表明,炎症小体相关基因突变可导致多种炎症性疾病,这些炎症疾病与感染、肿瘤或自身免疫无关。近来,越来越多的研究者开始关注炎症小体及炎症小体病,本文介绍相关进展。

IL——12RB1基因突变致孟德尔遗传易感分枝杆菌病2例临床特点及基因分析

目的研究白细胞介素12受体B1基因(IL-12RB1)突变所致孟德尔遗传易感分枝杆菌病的基因资料及临床特点,提高对该病的认识。方法检测2016-2018年中国医学科学院北京协和医院就诊的2例播散性卡介苗感染患儿基因并分析结果,同时总结患儿的临床资料。结果 2例患儿分别为11月龄和13月龄男性儿童,均于出生后接种卡介苗,接种后3个月出现同侧腋下淋巴结肿大,病原学检查提示抗酸杆菌生长。均否认结核病接触史。基因检测分析结果显示2例患儿均为IL-12RB1复合杂合基因突变,分别为c.1561C>T,p.R521X;c.632G>C,p.R211P;c.339-340 del CT,p.L113Lfs*15和c.1791+2T>G。其中c.339-340 del CT,p.L113Lfs*15未见报道,是新突变。结论对于接种卡介苗后出现感染性播散的患儿,应进行原发性免疫缺陷基因检测,相关基因突变的识别,可为早期治疗及遗传咨询提供依据。

线粒体钙单向转运体拮抗剂钌红对阿霉素肾病模型大鼠的保护作用

目的探讨钌红(ruthenium red,RR)对阿霉素大鼠肾病模型肾脏病理的改善作用及可能机制。方法32只SD大鼠分生理盐水对照组、RR对照组、阿霉素(adriamycin,ADR)组和ADR+RR组。予以尾静脉注射1次ADR建立大鼠肾病模型,分别予RR对照组和ADR+RR组腹腔注射RR 2周。在ADR注射后6周处死大鼠,分析RR对肾小球病变的保护作用。进而在体外培养的小鼠足细胞系分析RR对ADR诱导的足细胞凋亡和线粒体Ca^(2+)的影响。结果与ADR组比较,ADR+RR组大鼠肾小球新月体样病变指数降低(P=0.024)。与ADR组足细胞比较,ADR+RR组小鼠足细胞凋亡率降低(3.23%±0.95%vs13.62%±0.92%,P=0.028,n=3),线粒体Ca^(2+)降低(P=0.000,n=12)。结论线粒体钙单向转运体拮抗剂钌红可显著改善ADR肾病模型大鼠肾脏病理改变,拮抗ADR诱导的小鼠足细胞线粒体Ca^(2+)超载和足细胞凋亡。

IP_(3)R-Grp75-VDAC1-MCU钙轴分子高表达伴mTORC1过度活化参与阿霉素大鼠肾病模型蛋白尿发生

目的分析1,4,5三磷酸肌醇受体(IP_(3)R)-葡萄糖调节蛋白75(Grp75)-电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)-线粒体钙单向转运体(MCU)钙轴分子在肾病蛋白尿时表达变化,探讨其上游调控路径。方法将SD大鼠分为对照组(6只)和阿霉素(ADR)组(10只)。通过尾静脉1次注射ADR法建立肾病模型。采用免疫组织化学染色分析肾小球钙轴分子表达和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)活化标志物。体外培养小鼠足细胞,用ADR诱导足细胞损伤,分别予不同浓度依维莫司干预,分析钙轴分子和凋亡标志物。结果与对照组比较,ADR组大鼠蛋白尿时肾小球IP3R(0.02±0比0)、Grp75(0.04±0比0)、VDAC1(0.04±0比0.01±0)、MCU(0.05±0.01比0.01±0)表达显著增强,mTORC1活化标志物增强(0.57±0.01比0.18±0),差异均有统计学意义(均P<0.001)。在小鼠足细胞中,与对照组比较,ADR组Grp75(1.89±1.17比0.16±0.08)、VDAC1(1.59±0.34比0.20±0.07)、MCU(1.56±0.38比0.46±0.35)表达显著增强,mTORC1活化标志物增强(2.12±0.08比0.39±0.09),差异均有统计学意义(均P<0.05)。与ADR组比较,ADR+依维莫司(1.0 nmol/L)组足细胞Grp75(0.26±0.20比1.89±1.17,P=0.001)、VDAC1(0.40±0.26比1.59±0.34,P=0.014)、MCU(0.60±0.32比1.56±0.38,P=0.029)表达显著减少,线粒体钙显著降低[(2664.00±140.57)U比(3025.16±180.92)U,P=0.023],凋亡标志物活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3显著减少(0.55±0.28比1.48±0.45,P=0.011),差异均有统计学意义。结论IP_(3)R-Grp75-VDAC1-MCU钙轴分子高表达伴mTORC1过度活化参与ADR大鼠肾病模型蛋白尿发生,mTORC1抑制剂显著抑制足细胞钙轴分子表达,可能参与mTORC1抑制剂所致足细胞效应机制。