酒糟单细胞蛋白饲料生产技术研究

为了充分利用酒糟资源 ,减轻酒糟对环境的污染 ,以优良菌种 117号产朊假丝酵母、136号热带假丝酵母、白地霉和扣囊拟内孢霉混合发酵酒糟 ,生产酒糟单细胞蛋白饲料 .结果表明 :发酵最适起始 p H为 5 .0左右 ;适宜的发酵培养基配方为 80 %酒糟 ,15 %麦麸 ,3%玉米粉 ,1%豆饼 ,1%尿素 ,0 .0 5 %磷酸二氢钾 ,发酵前用适量糖化酶预处理酒糟能明显提高酒糟蛋白质含量 ,通过扩大发酵试验 ,10 0 g酒糟中粗蛋白含量由 18.1g增加到 2 8.6 g,人和成年哺乳动物必需氨基酸及钙、磷含量显著增加 ,粗纤维和单宁含量明显减少 ,酒糟单细胞蛋白饲料可作为配合饲料的新型优质蛋白源 ;采用分割留种培养能生产高质量、低成本的酒糟单细胞蛋白饲料 .

耐高温腐乳毛霉菌种选育及产酶条件研究

以毛霉M263为出发菌株，经紫外线，γ—射线及高温热处理复合诱变，并采用高温培养条件定向驯化，获得一株耐高温毛霉菌株M263-3，在32℃条件下，生长正常，酿制的腐乳质量优良。对毛霉M263-3的培养基及产酶条件进行试验，在最佳培养基及较适宜培养条件下，毛霉M263-3中性蛋白酶活力为830ug／min。

钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠慢性心力衰竭

目的:观察肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心功能的影响。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系实验室完成。选取4周龄清洁级雄性SD大鼠作为骨髓供体。雌性SD大鼠作为细胞移植、基因治疗受体,随机数字表法分为4组:肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组(n=7)、骨髓干细胞移植治疗组(n=7)、肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植组(n=8)、腺病毒空载体对照组(n=7)。结扎左冠状动脉制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型,每组进行相应的基因治疗和细胞移植。治疗后21d,采用苏木精-伊红染色和MASSON染色评价心脏形态及结构变化,组织多普勒评价各组心功能。并检测肌浆网钙离子ATP酶2a基因和蛋白在宿主心脏的表达。结果:29只雌性大鼠均进入结果分析。①与腺病毒空载体对照组大鼠相比,骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠心室腔明显减小。MASSON染色显示,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠蓝色的胶原纤维染色区域减少,红色的肌纤维染色区域增多。②肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组、骨髓干细胞移植治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度均较腺病毒空载体对照组显著升高[左室前壁:(0.58±0.03),(0.67±0.02),(0.78±0.05),(0.31±0.02)cm/s;(0.81±0.04),(1.26±0.04),(1.39±0.05),(0.40±0.01)cm/s;室间隔:(0.60±0.05),(1.00±0.08),(1.33±0.04),(0.40±0.01)cm/s;(0.70±0.04),(1.28±0.05),(1.57±0.03),(0.44±0.03)cm/s,P<0.001]。与肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组相比,肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组大鼠左室前壁、室间隔收缩及舒张期纵向峰值速度升高(P<0.001)。③肌浆网钙离子ATP酶2a基因治疗组和肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗组心肌内肌浆网钙离子ATP酶2amRNA表达强度明显高于骨髓干细胞移植治疗组和腺病毒空载体对照组。结论:肌浆网钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植能显著改善慢性缺血性心力衰竭大鼠心脏的收缩和舒张功能。

软岩大断面交岔点锚网喷+锚索联合支护的应用

以软岩大断面交岔点为研究重点,通过对锚网喷+锚索支护分析,进行锚网喷+锚索联合支护对软岩大断面交岔点的试验研究,以探索张集煤矿在软岩条件下的支护改革。

钙离子ATP酶2a基因修饰骨髓间充质干细胞移植改善慢性心力衰竭大鼠的心功能(英文)

背景:目前仍缺乏有效手段修复心力衰竭后受损心肌,逆转心肌病理性重塑。作为一种新的治疗策略,用正常肌细胞和治疗性基因干预受损心肌正逐渐显示出其在改善心功能方面的优势。目的:观察腺病毒转染不同代骨髓间充质干细胞的有效性和稳定性。并以携带肌浆网钙离子ATP酶(sarcoplasmicreticulumCa(2+)ATPase,SERCA2a)基因的腺病毒转染骨髓间充质干细胞,治疗心力衰竭大鼠,比较SERCA2a基因治疗,骨髓间充质干细胞移植以及骨髓干细胞基础的SERCA2a基因治疗慢性心力衰竭大鼠的效果。设计:随机对照实验。单位:解放军总医院老年心血管病科和北京医科大学生物化学系。材料:选取购于北京医科大学动物实验中心的4周龄雄性SD大鼠作为骨髓供体。选取体质量200~250g雌性成年SD大鼠作为细胞移植和基因治疗受体。以雄性大鼠Y染色体sry基因鉴定供体移植细胞是否在雌性大鼠受体心肌内存活。实验所用Ad-SERCa2a,Ad-EGFP的构建由我科鲁小春博士完成;第3和8代骨髓间充质干细胞自行分离培养。方法:实验于2004-07/2005-12在北京医科大学生物化学系周春燕实验室完成。对30只雌性SD大鼠进行左冠状动脉结扎,制作急性心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠模型。将造模成功的29只大鼠随机分为4组:基因治疗组7只,干细胞移植治疗组7只,基因修饰的干细胞移植组8只,腺病毒空载体对照组7只,分别予以单纯SERCA2a基因、MSC移植、SERCA2a基因修饰的骨髓间充质干细胞移植及腺病毒空载体干预。分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,用携带SERCA2a及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-SERCA2a-GFP)转染第3和8代骨髓间充质干细胞。主要观察指标:采用流式细胞仪检测不同代骨髓间充质干细胞的Ad-SERCA2a-GFP转染率。分别在治疗前及治疗后14,21d采用超声心动图检测大鼠心功能。采用免疫组化法检测大鼠心脏Ⅷ因子表达;采用RT-PCR和Western杂交检测SERCA2a的基因和蛋白水平表达,并按照说明书检测宿主SERCA2a功能活性。结果:①转染率:腺病毒转染不同代骨髓间充质干细胞的转染率超过80%,第3代骨髓间充质干细胞与第8代的转染率比较,差异无显著性意义(P>0.05)。②大鼠心功能:治疗后14d,与腺病毒空载体对照组相比,其余3组左室射血分数均明显升高(P<0.01)。治疗后21d,与腺病毒空载体对照组相比,干细胞移植治疗组和基因修饰的干细胞移植组大鼠室壁增厚;干细胞移植治疗组和基因修饰的干细胞移植组左室射血分数和左室短轴缩短率改善率持续升高(P<0.01),基因治疗组两指标改善率较治疗14d时下降。与腺病毒空载体对照组相比,基因修饰的干细胞移植组左室前壁和室间隔收缩期纵向峰值速度显著升高(P<0.01),左室前壁和室间隔舒张期纵向峰值速度亦呈现相同改善(P<0.01)。③心肌SERCA2a的基因、蛋白水平表达和功能活性,以及Ⅷ因子表达:携带SERCA2a基因的骨髓干细胞在宿主心肌能有效地合成和表达有功能的SERCA2a蛋白。与腺病毒空载体对照组相比,基因修饰的干细胞移植组SERCA2a基因、蛋白表达和酶活性均显著增强。干细胞移植组心力衰竭大鼠心脏瘢痕区可观察到Ⅷ因子表达。结论:①第3和8代骨髓间充质干细胞均具有高腺病毒转染率,骨髓间充质干细胞是基因治疗的良好细胞载体,其介导的SERCA2a基因治疗对衰竭心肌具有持续稳定的心功能改善作用。②骨髓间充质干细胞移植改善心功能的作用可能与促进血管新生有关。

谷酒糟酵母蛋白发酵饲料的研究

谷酒糟用量从４０％—６０％的不同营养配方，接种酵母菌发酵后，其粗蛋白质含量比对照增产５４．０３％—８４．６５％，其中３号营养配方较理想，粗蛋白质含量最高，为２１．２９％，比对照增产８４．６５％；采取发酵物预处理不消毒灭菌，接种菌液量由２０％降至１０％，经发酵后，粗蛋白质比对照增产４８．９％—６６．８％，特别是７号营养配方，未加任何辅料，只补充少量的氮和磷，粗蛋白质含量为１７．６３％，比对照增产４８．９％，成本低，效益好。

利用啤酒糟生产单细胞蛋白饲料的研究

利用啤酒糟生产单细胞蛋白饲料的研究湖南省益阳县微生物研究所郭正初，郭笑平湖南省益阳行署饲料工业办邓运福湖南农学院鲁小春我们从１９９２年３月开始研究并试产啤酒糟单细胞蛋白饲料，已取得一定成功，现将部分研究结果报道如下。１．材料与方法１．１试验菌种和原料...

便携式汉字心电图自动诊断仪的研制及应用

本仪器采用与普通心电图互连使用方式，以8098单片机为主要芯片，完成心电图机自动控制、心电信号采集、心电参数测量、参数分析、疾病诊断和汉字心电图报告打印等全自动化过程。

少耕分厢撒播水稻田土壤微生物活性研究

试验于1083～1987年进行。结果表明:少耕法避免了常耕法过多犁耙对土壤的破坏,使耕层土壤形成“上糊下松”的结构,改善了通气性能,为水稻生长和微生物活动创造了良好条件,微生物数量特别是好气性微生物数量显著增加,氧化代谢加强,土壤酶活性和土壤呼吸强度也明显提高,证明少耕土壤的肥力水平比常耕土壤要高。

钙离子ATP酶2a基因修饰的骨髓干细胞移植治疗大鼠心肌梗死后心力衰竭的研究

目的比较肌浆网钙离子ATP酶2 a(SERCA2 a)基因治疗,骨髓干细胞(MSC)移植以及SERCA2 a基因修饰的细胞移植治疗慢性缺血性心力衰竭的效应,评价MSC作为治疗基因的细胞载体策略的可行性。方法制作心力衰竭大鼠模型并随机分为4组。SERCA2 a基因治疗组(组Ⅰ,7只),MSC细胞移植组(组Ⅱ,7只),基因修饰的细胞移植组(组Ⅲ,8只),腺病毒空载体对照组(组Ⅳ,7只)。检测各组SERCA2 a基因,蛋白表达及活性。超声心动图及有创血流动力学评价心脏功能。HE染色观察心室形态。结果组Ⅰ,组Ⅱ,组Ⅲ比对照组Ⅳ心功能和血流动力学明显改善。治疗后组Ⅱ(2.9 mm±0.2 mm)和组Ⅲ(3.0 mm±0.1 mm)大鼠室壁厚度增加,心室腔减小。治疗后14d组Ⅰ,组Ⅱ与组Ⅲ射血分数(EF)为26.6%±3.9%,20.6%±5.0%,25.6%±2.7%。短轴缩短率(FS)分别为13.3%±2.0%,10.1%±2.5%,12.1%±1.0%(P<0.05)。治疗后21 d组Ⅰ,组Ⅱ与组ⅢEF分别为19.7%±5.0%,21.4%±5.2%,26.6%±4.1%,FS分别为9.7%±2.5%,10.7%±2.6%,12.8%±2.2%(P<0.05)。组Ⅳ治疗后14 d EF无变化,治疗后21 d EF下降了6.6%±4.0%。组Ⅰ和组ⅢSERCA2 a基因,蛋白表达及酶活性均高于组Ⅱ和组Ⅳ(P<0.01)。结论MSC移植和SERCA2 a基因修饰的细胞移植组大鼠呈现稳定持续的心功能改善作用。MSC可以作为治疗基因的有效转移载体。

孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异性哮喘84例临床疗效观察

目的：探讨孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床疗效.方法：我院2008～2011年间收治的168例咳嗽变异性哮喘患儿随机分为观察组和对照组,每组各84例,两组患儿均给予口服盐酸丙卡特罗和酮替芬常规治疗,观察组在此基础上,加用孟鲁司特咀嚼片,观察两组患儿临床疗效.结果：观察组患儿治疗后,总有效率为96.4%,显著高于对照组的83.3%,两组总有效率之间的差异有统计学意义（P＜0.05）,见表1.两组患儿治疗后血、尿常规及肝、肾功能均正常,观察组2例患儿出现轻微头痛,1例患儿出现腹痛,继续服药后症状自行消退,对照组出现腹痛、呕吐等胃肠道症状3例,嗜睡1例,未经特殊处理,症状自行缓解.结论：常规治疗基础上加用孟鲁司特咀嚼片治疗CVA临床疗效好,且无严重的不良反应发生,使用较为安全,服用方便,患儿依从性较好,值得临床进一步推广使用.