皮层肌动蛋白表达水平与NSCLC患者MVD及术后预后的关系

目的探讨皮层肌动蛋白(cortactin)表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤微血管密度(MVD)及术后预后的关系。方法选取行手术治疗的140例NSCLC患者,于术中获取癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法检测cortactin表达情况,用CD34标记微血管计算MVD。比较癌组织及癌旁正常组织中表达水平,癌组织cortactin水平与MVD的相关性采用Pearson相关性分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析cortactin对预后的预测效能。分析cortactin表达与临床病理特征的关系,采用COX比例风险模型分析NSCLC术后预后的影响因素。结果癌组织cortactin表达量(1.09±0.27)明显高于癌旁组织(0.65±0.12;P<0.05)。癌组织中MVD计数为(38.09±7.27)个,Pearson相关性分析显示MVD与cortactin呈正相关(r=0.594,P<0.05)。随访3年,140例NSCLC患者中死亡58例(41.43%),存活82例(58.57%)。单因素、多因素Logistic回归分析显示,临床分级、淋巴结转移、MVD、cortactin均是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。cortactin表达阳性组存活36例(54.55%),死亡30例(45.45%),阴性组中位生存时间[(30.56±2.68)个月]明显高于阳性组[(27.15±2.30)个月;χ^(2)=4.235,P=0.022]。ROC曲线分析显示,cortactin截断值为1.15时,诊断曲线下面积为0.844(95%CI:0.796~0.902),灵敏度为77.59%,特异度为86.59%。结论NSCLC癌组织中cortactin高表达,且与MVD存在正相关性,是影响NSCLC患者术后预后的危险因素,对于预后具有良好的预测效能。

过表达OMA1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨OMA1在肺腺癌中的表达水平及其对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法:收集2018年01月至2019年10月在本院保存的42例经病理确诊为肺腺癌患者的癌组织样本及其癌旁组织(距离肿瘤边缘≥5 cm),免疫组化染色法检测癌组织及癌旁组织中OMA1表达情况。体外培养人肺腺癌细胞系NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1、A549及人正常肺上皮细胞BEAS-2B,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平。采用OMA1过表达慢病毒及其空载慢病毒感染A549细胞,分为OMA1过表达慢病毒感染组(OMA1组)和空载慢病毒感染组(Vector组),另设置空白对照组(Blank组)。采用MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;JC-10染色法检测细胞线粒体膜电位变化;qRT-PCR法检测细胞中OMA1 mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞中OMA1、cleaved caspase-3、OPA1以及细胞线粒体和胞浆中Cyt C蛋白表达水平。结果:肺腺癌患者癌组织中OMA1表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1和A549细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平显著低于BEAS-2B细胞(P<0.05)。与Blank组或Vector组比较,OMA1组细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率及cleaved caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而细胞增殖活性、线粒体膜电位及OPA1蛋白和线粒体中Cyt C蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:OMA1在肺腺癌组织及其细胞系中低表达,过表达OMA1可通过下调OPA1蛋白表达、破坏线粒体膜电位、加速线粒体Cyt C释放而诱导肺腺癌A549细胞凋亡。

具有不同酶活性并可抵抗特异shRNA降解的nm23-H1真核表达载体的构建和表达

背景与目的已有的研究证明nm23-H1基因是一个重要的肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的生化机理尚不完全清楚。Nm23-H1基因结构和功能异常与肿瘤的侵袭转移有密切关系。我们前期已构建了nm23-H1的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体以及可抵抗此shRNA降解的nm23-H1的cDNA的表达载体,在此基础上我们欲应用基因定点突变技术构建具有不同酶活性并能抵抗此shRNA降解的nm23-H1cDNA真核表达载体,并通过恢复实验验证其表达,为进一步研究肿瘤抑制基因nm23-H1的分子机制提供理论基础和实验依据。方法以pcDNA3.1(+)-shRNA-resistant-nm23-H1质粒为突变模板,应用重叠延伸PCR方法引入nm23-H1基因四个单点突变和一个联合位点突变,并将突变基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1Hygro(+)。将突变质粒转染人肺腺癌细胞株A549/nm23-H1-shRNA(稳定沉默nm23-H1基因),利用Western blot技术验证不同突变体nm23-H1蛋白的表达。结果成功构建了shRNA抵抗的nm23-H1S44A、nm23-H1P96S、nm23-H1H118F、nm23-H1S120G、nm23-H1P96S-S120G五个突变型真核表达载体,经DNA序列分析突变的碱基序列与实验设计完全一致,经Western blot验证nm23-H1蛋白表达正常。结论成功构建了五个具有不同突变位点的shRNA抵抗的nm23-H1基因真核表达载体,并且突变蛋白质nm23-H1表达正常,同时也表明重叠延伸PCR技术是一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法。

自体血与高糖在治疗胸腔镜肺叶切除术后持续肺漏气的效果对比

目的:比较自体血与高糖在治疗胸腔镜肺叶切除术后持续肺漏气的临床效果。方法:将2017年8月—2020年12月期间在贵州省人民医院胸外科行胸腔镜肺叶切除术后肺漏气的患者分为2组,自体血胸腔内注射组(自体血组)45例,高糖注射组(高糖组)40例,观察两组患者的治疗效果及并发症情况。结果:自体血组有效42例,无效3例,有效患者注射后平均漏气时间为6.6 h;高糖组有效38例,无效2例,有效患者注射后平均漏气时间为12.5 h;两组患者有效率比较差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后自体血组平均漏气时间明显短于高糖组(P<0.05)。自体血组胸痛发生率明显低于高糖组(P<0.05)。结论:自体血胸腔内注射应用于肺术后持续漏气的治疗,效果明显且不良反应小,但要注意操作细节的处理,以保证其安全性。

miR-144-3p靶向ONECUT2抑制肺癌细胞迁移、侵袭的实验研究

目的分析miR-144-3p对肺癌细胞迁移和侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测肺癌NCI-H460细胞、正常支气管上皮细胞HBE中miR-144-3p、ONECUT2的表达;采用脂质体法将miR-144-3p mimics(miR-144-3p组)、miR-NC(miR-NC组)、si-con(si-con组)、si-ONECUT2(si-ONECUT2组)、miR-144-3p mimics和pcDNA(miR-144-3p+pcDNA组)、miR-144-3p mimics和pcDNA-ONECUT2(miR-144-3p+pcDNA-ONECUT2组)转染至NCI-H460细胞;Transwell法检测各组细胞的迁移、侵袭能力;Western blotting检测各组ONECUT2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测miR-144-3p和ONECUT2的靶向关系。结果与HBE组比较,NCI-H460组细胞中miR-144-3p表达显著降低,ONECUT2表达显著升高(P<0.05)。过表达miR-144-3p、沉默ONECUT2均可明显抑制NCI-H460细胞的迁移和侵袭能力,上调E-cadherin蛋白表达,下调N-cadherin、Vimentin蛋白表达;miR-144-3p可抑制野生型ONECUT2 3’-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型ONECUT2 3’-UTR-MUT的荧光素酶活性无影响。过表达ONECUT2可逆转miR-144-3p对NCI-H460细胞的EMT相关蛋白表达。结论miR-144-3p过表达可抑制肺癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向ONECUT2抑制EMT有关,可为肺癌的治疗提供参考。

胸腔镜治疗肺隔离症3例

肺隔离症是一种少见的先天性肺发育异常,本病误诊率较高,易与肺囊肿、肺脓肿、肺良性肿瘤、肺癌等相混淆。螺旋CT增强扫描后的血管成像,可直观地显示异常血管的全貌。肺隔离症一旦确诊,即使患者无任何临床症状,也应积极手术治疗,术前尽量明确供血动脉来源及数目,防止术中误伤大血管。对于该症病程短、肺部感染、粘连较轻的患者,胸腔镜下肺叶切除成为手术治疗的重要选择。

纵隔型肺癌CT及MRI的影像表现及诊断效果探讨

目的:分析纵膈型肺癌患者应用MRI以及CT诊断的影像表现与诊断效果。方法:抽取42例在我院接受纵膈型肺癌诊治的患者,所有研究对象均接受MRI、CT扫描检查。结果:MRI与CT两种诊断方式诊断灵敏度均为100%,两种诊断方式诊断效果差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:MRI以及CT检查在纵膈型肺癌患者的病情诊断中具有较高的应用价值,同时结合患者临床表现进行诊断能够使临床确诊率得到明显提高。

高中化学教学中学生学习兴趣的培养策略研究

高中的化学课堂较为枯燥乏味,高中化学的一些难点对学生而言,较难理解。因此,应该改变传统的教育方法,从而令处在叛逆期的学生较易接纳,转变其对高中化学的抵触性。通过分析高中化学教育,提升高中学生对学习化学的兴趣,从而有利于提高其理解并体会化学课堂。

浅谈高中化学自主学习能力的培养策略

高中化学是一门基础学科,具有一定的难度,要想学好这门学科实属不易。随着新课程改革的不断深化,化学教学更加注重培养学生的自主学习能力,使得学生在分析化学问题和解决化学问题方面能够游刃有余的应付。在实际的教学中,广大的教育工作者要做好除旧立新的工作,积极探索化学教学上的创新,提升学生的自主学习能力和综合实力,为学生的未来发展打下坚实的基础。

创伤性血气胸82例诊治分析

目的分析创伤性血气胸临床诊治方法以及治疗效果。方法选取82例贵州省人民医院收治的创伤性血气胸患者,用随机抽签法平均分为两组,对照组实施传统开胸术,观察组实施电视胸腔镜手术。比较分析患者手术情况以及术后并发症情况。结果观察组患者各项指标均明显高于对照组患者(P<0.05)。结论创伤性血气胸患者应用电视胸腔镜手术治疗效果优于传统开胸术。

原电池中离子定向移动的“推手”

从理论和实验两个方面分析了原电池中离子定向移动的原因，得出了原电池电解质溶液中的离子因受到电场力和扩散力的共同作用而定向移动的结论。