利用高效液相色谱-电化学法检测尿液8-羟基脱氧鸟苷

目的观察利用高效液相色谱-电化学法（HPLC—ECD）检测尿液8-羟基脱氧鸟苷（8—OH—dG）的效果。方法尿液经前处理后，利用美国Varian Prostar高效液相色谱仪检测8—OH—dG水平。结果8—OH—dG峰与杂质峰分离良好，8—OH—dG浓度在1～25ng／ml之间呈良好线性，流动相最佳pU为3．5，最佳工作电压为0．80V，最低检测浓度为0．39ng／ml，回收率在89．1％和86．1％之间，批内差异（CV）均低于8％。结论该HPLC—ECD法是一种灵敏度高、重复性好的尿液8—OH—dG简便检测方法，值得推广。

丹参酮ⅡA对海马细胞缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制探讨

目的初步探讨丹参酮主要成分丹参酮ⅡA(TSA)对海马细胞缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制。方法离体脑缺血模型采用化学方法制作的大鼠脑皮质/海马神经元氧糖剥夺模型(oxygen-glucose deprivation,OGD)。观察TSA(1,2,5,10μmol/L)以及经典钙通道阻断剂尼莫地平(nimodipine)对OGD诱导的神经元损伤的影响;运用生化方法检测TSA对氧化/抗氧化指标MDA,SOD,GPX的影响;运用HPLC方法检测TSA对胞外谷氨酸水平的影响。结果(1)TSA可减轻OGD引起的神经元损伤及LDH,NO释放;(2)TSA可减少MDA的生成,增加SOD,GPX活性;(3)TSA可抑制OGD引起的胞外谷氨酸浓度的异常升高。结论TSA可减轻OGD引起的神经元损伤,其抗损伤的机制可能涉及以下两个方面:减轻自由基损伤;减少谷氨酸的释放,从而抑制谷氨酸的兴奋毒性。

极谱催化波法检测肝癌患者发铜含量变化的初步探讨

微量元素铜的络合物极谱催化波测定国内外已有报道，但以络合物极谱催化波法研究肝癌患者发铜含量尚未见报道。本文研究了“金属－乙二胺－８－羟基喹啉”体系催化极谱波法，测定铜的最佳条件，并对肝癌患者和健康人群的发铜水平进行对照测定，旨在通过测定肝癌患者发铜含...

端粒重复扩增生物发光分析法定量检测端粒酶活性

目的:建立端粒酶活性定量检测的TRAP-发光分析法。方法:细胞株、组织样品与引物孵浴后,释放的焦磷酸盐由硫酸化酶作用转变为ATP,用荧光素酶生物发光系统检测发光信号;比较TRAP-发光分析法与TRAP-ELISA的结果。结果:TRAP-发光分析法的线性范围在2～1000个细胞之间。检测结果与TRAP-SYBR Green染色一致,与TRAP-ELISA法显著相关(r2=0.992,P<0.001)。结论:TRAP-发光分析法是一种稳定、快速、实际可行的端粒酶活性的定量分析方法。

丹参酮Ⅱ_A对血管性痴呆小鼠的神经保护作用机制初探

目的初步探讨丹参酮主要成分丹参酮ⅡA对血管性痴呆小鼠的神经保护作用机制。方法双侧颈总动脉反复缺血/再灌注合并尾部放血降压方法建立血管性痴呆小鼠模型。动物随机分为假手术组、缺血模型组、丹参酮ⅡA低、高剂量(4 mg/kg.d,8 mg/kg.d)治疗组。手术20 d后开始运用Morris水迷宫观测各组的学习记忆功能,然后断头取脑,分离皮层和海马组织,分光光度法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化;运用高效液相色谱法测定不同组小鼠皮层和海马组织内谷氨酸和γ-氨基丁酸的含量。结果①丹参酮ⅡA可以改善血管性痴呆小鼠的学习记忆功能;②丹参酮ⅡA可减少MDA的生成,增加SOD、GSH-Px活性;③小鼠手术20 d后,小鼠皮层和海马组织谷氨酸和γ-氨基丁酸的含量减低,丹参酮ⅡA可增加血管性痴呆小鼠皮层和海马组织内谷氨酸和γ-氨基丁酸的含量。结论丹参酮ⅡA在血管性痴呆小鼠可发挥抗氧化作用并调节兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的含量。

产妇体内有机氯农药残留对血中4种生殖激素水平的影响

[目的]探讨有机氯农药污染区产妇静脉血中有机氯农药目前的残留水平及其对血中生殖激素的影响。[方法]抽取2004年1月1日至4月30日在湖北省天门市妇幼保健院住院分娩的产妇71名,分别采集产妇静脉血和脐带血样各1份,采用磁性分离酶联免疫法检测其中的促卵泡激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。同时,采用气相色谱附电子捕获器(GC-ECD)方法检测产妇静脉血中有机氯农药的残留水平。[结果]①有机氯农药污染区产妇静脉血中六六六和DDT的8种主要代谢产物在低、中、高残留组均有不同程度检出,总六六六的检出量明显高于总DDT,低残留组为4.1与0.0μg/L,中残留组为13.2与5.5μg/L,高残留组为50.0与41.8μg/L;各组总有机氯的检出量均数分别为<0.005、4.95、24.10、98.70μg/L,经统计学检验差异有显著性(P<0.05)。②产妇血中总有机氯残留水平与产妇血和脐带血中FSH、LH、E2和P的改变有关,并呈现剂量-效应关系(P<0.05)。③相关分析表明,产妇血和脐带血中FSH、LH、E2和P水平呈现明显的相关关系;产妇血中总有机氯残留水平与产妇血中E2和P呈现负相关(r=-0.5158,P=0.0238;r=-0.6491,P=0.0026)。[结论]人体内有机氯农药残留可能与血中生殖激素水平的改变有密切关系。

端粒酶与p53、C-myc、K-ras在肺癌组织中的表达

目的 研究端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达 ,并探讨端粒酶的表达与p5 3、C -myc、K -ras之间可能存在的关系。方法 采用TRAP -SYBRGreen染色法检测 36例肺癌和 36例癌旁组织 ,2 0例肺部良性病变组织和 2 0例正常肺组织及A5 49肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达 ,并利用免疫组化技术检测肺癌组织p5 3、C -myc、K -ras表达水平。 结果 83 3%的肺癌组织 2 5 0 %的癌旁组织、15 0 %肺部良性病变级织表达端粒酶活性 ,正常肺组织未检测到端粒酶活性。端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关。在 30例端粒酶活性阳性的肺癌组织中有 2 4例 (80 % )表达 p5 3蛋白 ,18例 (6 0 % )表达C -myc蛋白 ,2 2例 (73% )表达K -ras蛋白。利用Spearman分析方法分析端粒酶活性与p5 3、C -myc、K -ras蛋白表达水平之间的相关关系 ,相关系数分别为r =0 6 0 ,P <0 0 1:r =0 335 ,P <0 0 1;r =0 42 7,P<0 0 1。结论 端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一 ;肺癌组织的端粒酶活性与p5 3、C -myc、K -ras蛋白表达水平之间存在正相关关系。

食管癌端粒酶表达与其活性关系

目的探讨食管癌端粒酶亚基因表达及其与端粒酶活性的关系。方法采用端粒末端重复序列扩增技术检测29例食管鳞癌组织及其相应癌旁正常组织、47例食管鳞状上皮不典型增生组织的端粒酶活性;采用逆转录聚合酶链反应技术检测端粒酶各亚单位基因mRNA的表达。结果端粒酶活性阳性检出率、亚单位基因端粒酶逆转录酶(mTERT)mRNA表达在食管癌、不典型增生组织和癌旁正常组织之间差异有统计学意义(P<0.001);而端粒酶亚单位基因hTR或TP1mRNA在3种食管组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。在105例食管癌组织、癌旁正常组织和不典型增生组织中hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈显著正相关(P<0.001);而hTR或TP1mRNA表达与端粒酶活性无明显相关(P>0.05)。结论端粒酶在食管癌的发生发展过程中可能起关键性作用:hTERT与端粒酶活性密切相关;端粒酶有望成为食管癌的生物标志物。

H^＋敏LAPS及其信号检测系统的研制

Ｈ＋敏光寻址电位传感器采用电解质Ｓｉ３Ｎ４－ＳｉＯ２—Ｓｉ结构，取光响应曲线的拐点电位值作为测量ｐＨ的输出参数．整个信号检测和数据处理过程在微处理器控制下实现．传感器的灵敏度为４８ｍＶ／ｐＨ．

企业内部控制在财务风险管理中的应用

在现代企业的管理中,财务风险管理是内部控制的重中之重,随着经济的不断发展和进步,企业内部财务风险控制起到至关重要的作用。目前,我们国家的经济正在飞速地发展,社会也在飞速地向前发展,在企业的发展过程中,可能会遭遇到各种各样的财务风险,而风险管理的方法将贯穿企业的整个经营过程。财务风险管理的效果将会对企业的发展起到很大的作用,因此,必须要加强企业的财务风险管理,用内部控制的方式提高财务风险管理的水平。本论文主要是对我国财务风险管理中的内控现状进行探讨。

N-花生四烯酸氨基乙醇对小鼠肝片去甲肾上腺素递质体外释放的影响

目的探讨N-花生四烯酸氨基乙醇(anandamide,AEA)对肝组织中去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的影响及可能的神经生物学机制。方法制备肝片,用高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)方法检测AEA在体外对肝片NE释放的影响。结果随着AEA浓度的增加,AEA对肝片NE含钙自发性释放的抑制率(与对照组比较)逐渐下降并显现剂量-效应关系;而对无钙自发性释放抑制率先降低后升高,最低为11.43%。对肝片NE含钙去极化释放的抑制率先升高后降低,最高为39.17%,当AEA浓度达到20μmol/L时,对肝片NE的作用表现为刺激而不是抑制;对无钙去极化释放抑制率先升高后降低,最高为85.29%。结论AEA对NE自发性和去极化释放过程均有干扰作用,且该作用与钙离子有一定关系。

极谱催化波法检测肝癌患者发镉的初步研究

在“六次甲基四胺-二苯胍(DPG)-二安替比林甲烷(DAM)—碘化钾”体系中,镉在JP-2型示波极谱仪上于-0.75V处能产生一灵敏的络合物吸附催化波.利用该法测定生物样品中痕量镉,其检出限为5×10^(-4)μg/ml,线性范围为5×10^(-4)～5×10^(-2)μg/ml.使用该法测定肝癌患者和健康人的发镉水平,其(?)±s分别为13.11±6.99ppm和5.61±4.62ppm,结果表明二者差异有显著性意义,P<0.05。

浅谈内部审计在国有企业财务管理中的作用

在21世纪,伴随着我国市场经济的深入发展和国企改革的持续深入,国有企业所面对的经济环境已经出现了很大的改变,产业之间的竞争已经越来越多地围绕着公司的高质量发展能力展开。财务管理是国有企业经营管理工作中的一个重要环节,它对优化资源配置,提高盈利能力,实现国有资产的保值增值起着举足轻重的作用。然而,在实际操作中,由于受到多种因素的影响和制约,部分国有企业在进行财务管理工作的过程中,存在着一定的问题,从而严重地影响到了财务管理职能的发挥。

一种基于适配分子的偏振荧光检测法

凝血酶适配分子 (aptamer)可与凝血酶以高亲和力结合 ,二者的结合可改变荧光素标记的适配分子溶液的荧光偏振强度 ,据此建立了适配分子荧光偏振法测定凝血酶的新方法。方法的线性范围是 0 .1～ 4IU/mL ;检出限为 0 .0 9IU/mL。将该方法用于人体血浆中凝血酶含量分析 。

miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-125b对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法培养乳腺癌MCF-7细胞,用miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞,检测miR-125b表达,乳腺癌MCF-7细胞活力、凋亡情况、细胞周期及Cyclin A1、Cyclin D1、Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果 miR-125b模拟物和miR-125b抑制物转染乳腺癌MCF-7细胞1、2、3、4 d后,乳腺癌MCF-7细胞活性均显著降低(均P<0. 05)。miR-125b模拟物组乳腺癌MCF-7细胞凋亡率均显著低于miR-125b抑制物组(均P<0. 05);miR-125b抑制物组细胞周期G1期显著长于miR-125b模拟物组(P<0. 05)。两组Cyclin A1、Cyclin D1、Bax及Bcl-2表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0. 05)。结论 miR-125b抑制剂可显著抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡。

HepG2细胞DNA损伤中8-OH-dG含量测定的高效液相色谱-电化学法

目的对利用高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)测定HepG2细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)的方法进行研究。方法 HepG2细胞经前处理后,利用美国Varian Prostar高效液相色谱仪电化学检测器检测8-OH-dG水平。结果 8-OH-dG峰与杂质峰分离良好,8-OH-dG浓度在1～25 ng/ml之间呈良好线性,流动相最佳pH值为5.2,最佳工作电压为+0.60V,最低检测浓度为0.39 ng/ml,在线性范围内的3种质量浓度20、5、1 ng/ml下进行的测定,8-OH-dG回收率分别为(86.1+1.2)%、(85.3+2.3)%、(84.1+1.8)%。精密度试验的批内RSD在2.8%～6.7%,精密度试验的批间RSD在6.5%～8.4%。结论该法检测HepG2细胞内8-OH-dG灵敏、准确、重复性好,操作简便,值得推广。

四氢呋喃与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱法研究

目的研究四氢呋喃（tetrahydrofuran,THF）与牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）相互作用的机制,探讨温度对其反应的影响。方法移取的BSA于石英比色皿中,搅拌混合均匀,避光静置,分别在25℃（298 K）、29℃（302 K）、33℃（306 K）、37℃（310 K）下以280 nm为激发波长,在LS-55荧光分光光度计上扫描280~500 nm波长范围内的发射光谱。结果不同温度下的结合猝灭常数（Ksv）为（3.466~6.317）×104L/mol,猝灭常数随温度的升高而减小。结论四氢呋喃对BSA的猝灭作用是属于静态猝灭。

焦炉工人血清谷胱甘肽硫转移酶活力和尿8-羟基脱氧鸟苷水平

目的探讨血清谷胱甘肽硫转移酶(GST)和尿8羟基脱氧鸟苷(8OHdG)作为焦炉工人多环芳烃(PAHs)暴露生物监测标志的可行性。方法用高效液相色谱-电化学方法和试剂盒分别检测47名男性焦炉工和31名男性对照者尿8OHdG水平和血清GST活力;尿1羟基芘(1OHP)作为PAHs接触的内暴露标志,采用碱水解-高效液相色谱方法分析。结果焦炉工人尿1OHP浓度的中位数(P25～P75)为[5.7(1.4～12.0)μmol/molCr],血清GST活力为[22.1(14.9～31.2)U/ml],尿8OHdG水平为[1.9(1.4～15.4)μmol/molCr],均高于对照组工人[3.0(0.5～6.4)μmol/molCr、13.1(9.5～16.7)U/ml、1.3(1.0～4.0)μmol/molCr],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。以吸烟分层,两组工人尿1OHP浓度和血清GST活力仅在吸烟者中、尿8OHdG水平仅在非吸烟者中差异有统计学意义(均P<0.01)。焦炉工人血清GST活力和尿1OHP浓度呈正相关(rs=0.31,P<0.01,n=78)。多元Logistic回归分析显示,与对照工人相比,焦炉工人血清GST活力>16.7U/ml和尿8OHdG水平>1.8μmol/molCr的OR值分别为13.2和4.4;高体重指数是影响尿8OHdG水平下降的独立因素。结论焦炉工人血清GST活力增强和氧化性DNA损伤增加,吸烟和职业暴露有交互作用;血清GST有可能作为PAHs暴露评价的生物标志;尿8OHdG检测有助于焦炉工肺癌危险度评价。