人真皮微血管内皮细胞的原代培养及低氧/复氧模型的建立

目的:培养人真皮微血管内皮细胞,建立人真皮微血管内皮细胞低氧/复氧模型。方法:采用酶消化及联合磁珠分选法,得到人真皮微血管内皮细胞(HDMECs),体外培养传至P5代,采用Ⅷ因子免疫荧光及CD309、CD34流式细胞学进行鉴定。用缺氧Buffer加低氧舱的方法低氧处理P5代HDMECS。实验分为四组,Con组不做任何处理、H8组低氧8小时组,H8R12组低氧8小时复氧12小时组、H8R24组低氧8小时复氧24小时组。TUNEL(脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法)染色法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达。结果:联合法分离的细胞,经过2次CD31磁珠分选后,可见细胞短梭形,呈铺路石样。细胞传至P5,Ⅷ因子免疫荧光染色阳性率为(95±2.61)%。流式细胞仪检测CD309阳性率为(95.4±1.34)%;CD34阳性率为(42.5±3.23)%。TUNEL染色、Western Blot结果显示:H8组的细胞凋亡率和活化的Caspase-3表达高于Con组(P<0.05),H8R12组、H8R24组细胞凋亡率和活化的Caspase-3表达高于H8组(P<0.05)。结论:本研究采用磁珠分选的办法成功培养了HDMECs,并且建立了HDMECs低氧/复氧模型,为临床研究游离皮瓣缺血再灌注损伤机制提供实验基础。

锌合金铸造工艺品电镀仿古铜色工艺

介绍锌合金铸造工艺品电镀、着色表面处理的方法和溶液组成,如何获得幽雅古旧的仿古铜色。

基于LC-MS的除湿胃苓汤加减治疗脾虚湿蕴型慢性湿疹的血清代谢组学研究

目的 基于液相色谱-质谱法(LC-MS)研究除湿胃苓汤加减治疗脾虚湿蕴型慢性湿疹的代谢机制。方法 选取10例脾虚湿蕴型慢性湿疹患者给予除湿胃苓汤加减治疗并收集患者治疗前后血清,分别纳入患者治疗前血清组、患者治疗后血清组;另选取10例健康无湿疹症状及病史的健康人血清作为健康对照血清组进行对照。比较治疗前后慢性湿疹患者的湿疹面积及严重程度指数(EASI)评分。将三组应用LC-MS进行血清样品的分离和数据采集,以主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法筛选出相关差异代谢物,通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)和人体代谢组数据库(HMDB)等开放数据库对差异的标志物进行代谢通路分析。结果 患者治疗后血清组的EASI评分(1.81±0.45)分明显低于患者治疗前血清组的(8.16±1.41)分,差异有统计学意义(t=13.567, P=0.000<0.01)。三组血清样本的代谢模式存在显著差异,基于变量重要性投影(VIP)>1.7和P<0.05的原则筛选出12个代谢标志物,苹果酸、油酰基肉碱显著上升, L-蛋氨酸、丙酰基肉碱、脱氧胆酸、焦谷氨酸、甲基半胱氨酸、谷氨酸肉碱、L-苏氨酸、L-异苏氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸显著下降;经除湿胃苓汤加减治疗后,血清中这12种代谢物水平均出现显著回调、接近健康对照血清组正常值。进一步的代谢富集分析显示D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢途径和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成途径是主要的影响通路。结论 除湿胃苓汤加减可能通过调控氨基酸及其衍生代谢等途径调节机体能量代谢和免疫功能来治疗脾虚湿蕴型慢性湿疹。

电沉积非晶态Ni－W－P－SiC复合镀层性能研究

讨论了热处理温度对非晶态Ｎｉ－Ｗ－Ｐ－ＳｉＣ复合镀层硬度、耐磨性和结构的影响。结果表明，复合镀层在３００℃以下为晶态，在３００～４００℃之间为混晶，４００℃开始晶化，并析出细小的Ｎｉ＿３Ｐ相；在镀液中加入少量的添加剂，能提高复合镀层的硬度、耐磨性和晶化温度；复合镀层的硬度和耐磨性随热处理温度的升高而增加，当热处理温度达到４００℃时，硬度和耐磨性达到峰值；腐蚀试验表明复合镀层在各种腐蚀介质（硝酸除外）中的耐蚀性优于１Ｃｒ１８Ｎｉ９Ｔｉ不锈钢；扫描电子显微镜表明，添加剂的加入对复合镀层的表面形貌无影响，但电流密度和ｐＨ值的大小对复合镀层的表面形貌影响较大。

1例家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变体功能研究

目的分析基因突变对低密度脂蛋白受体(LDLR)功能的影响,探讨其对家族性高胆固醇血症(FH)的可能致病机制。方法对1名FH患者进行基因检测,构建真核细胞表达载体,经定点诱变获得突变受体质粒,并将突变受体质粒转染入人胚肾(HEK293)细胞中,用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察突变蛋白细胞定位,用流式细胞术检测突变蛋白表达及内吞活性变化。结果基因测序显示该名患者发生了LDLR基因Y398X突变;CLSM结果显示突变蛋白部分滞留于内质网中;流式细胞术结果显示细胞表面LDLR表达量减少至5.5%,内吞活性减少至20.1%。结论在临床确诊的FH患者中检测到LDLR致病性基因Y398X突变,在中国为首次报道。该突变造成LDLR转运缺陷,从而导致血浆中胆固醇代谢障碍,继而诱发FH的发生。

红曲用于高脂血症治疗有效性及安全性的Meta分析

背景和目的动脉硬化性心血管病是危害人类健康的重大疾病，高脂血症尤其是高胆固醇血症是心血管病最重要的危险因素，调脂治疗对于防治心血管病具有重大意义。目前调脂应用最广泛的他汀类药物可有效降低总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）及心血管死亡风险，但其引起肌溶解、肝酶升高、新发糖尿病等副作用，影响患者的依从性，因此急需寻找新的安全有效的降脂药物。红曲（RedYeastRice）是以籼米为原料，采用现代生物工程技术分离出优质的红曲霉菌经深层发酵精致而成的紫红色米曲，含天然他汀、黄酮、生物碱和氨基酸等多种活性物质，在我国已有1000多年药食两用的历史，目前已经作为食品补充剂和功能性保健食品出口到欧美国家，由于调脂效果好且安全性高，而受到国内外广泛关注，但临床试验样本量不大，结果不一致。循证医学代表了现代医学的前进方向，其核心思想是根据研究结果选择最佳治疗药物，Meta分析运用统计学方法对多个研究结果进行系统、客观、定量的综合分析，通过增大样本量来增加研究结论的可信度，解决研究结果的不一致性。本文拟对13项高质量的红曲（不包括成品药血脂康和脂必妥）随机对照试验（RCT）进行系统评价和Meta分析，

电沉积耐磨耐蚀复合材料的工艺研究

研究了镀液组成、添加剂用量及温度、电流密度、ｐＨ值、搅拌等工艺条件对电沉积复合材料镀层的影响。结果表明，应用适宜的镀液组成及工艺条件，可制得一系列不同组成的复合材种镀层，并具有优异的耐磨耐蚀性能。

稀土在复合电镀中的应用

研究了稀土对复合电镀工艺及性能的影响,结果表明,添加适量的稀土能显著地提高复合镀层中SiC微粒的含量,镀层硬度和耐磨性。

高三酰甘油血症合并急性心肌梗死男性患者载脂蛋白A5基因甲基化研究

目的探讨高三酰甘油血症(HTG)合并急性心肌梗死(AMI)男性患者载脂蛋白A5(apo A5)基因甲基化对apo A5表达水平的影响。方法选取HTG合并AMI男性患者为病例组,选取HTG合并颈动脉粥样硬化(As)男性患者为对照组,每组各18例。用Illumina人类全基因组DNA甲基化450K芯片检测两组患者外周血DNA甲基化变化,用生物信息学方法分析比较两组间apo A5基因的甲基化差异;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测apo A5 mRNA表达水平;ELISA法检测血浆apo A5水平。结果全基因组甲基化芯片初步筛选结果显示,与对照组相比,病例组apo A5基因表现为高甲基化;RT-PCR和ELISA检测结果显示,病例组apo A5 mRNA及apo A5表达水平低于对照组[(0.037±0.016)vs(1.000±0.093),(156.6±16.8)μg/L vs(197.3±32.3)μg/L,t分别为18.970和2.502,P均<0.05]。结论 HTG合并AMI男性患者apo A5的mRNA和apo A5蛋白表达水平均降低与该基因甲基化水平增高有关,apo A5基因甲基化异常可能参与HTG患者的As进展。

比伐卢定对比肝素加血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体抑制剂在PCI治疗中的安全性与有效性的系统评价

目的经皮冠状动脉介入（PCI）治疗是冠心病重要的治疗方法，可明显减少再发心肌梗死、死亡及再次住院率。但PCI术后出现支架内血栓形成、支架内再狭窄及出血等不良结果，目前常规使用抗血小板及抗凝药预防并发症，但有伴发出血的风险。目前认为出血为PCI患者死亡率强有力的独立预测因子。比伐卢定作为直接凝血酶抑制剂，显著减少PCI术后出血风险。目前有多项随机化试验对比比伐卢定和肝素加GPIs在PCI治疗中的有效性及安全性，证实比伐卢定比肝素加GPIs更能减少出血风险，但对其他临床事件如心肌梗死、死亡率等均有不同的结果。循证医学代表现代医学的前进方向，其核心思想是根据研究结果选择最佳治疗药物；Meta分析运用统计学方法对多个研究结果进行系统、客观、定量的综合分析，通过增大样本量来增加研究结论的可信度，解决研究结果的不一致性。

2例家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因及突变体表达的研究

背景家族性高胆固醇血症（FH）是一种常染色体显性遗传疾病，患者血浆胆固醇水平极度增高，动脉粥样硬化发展迅速，且多发生早发冠心病。FH主要是由低密度脂蛋白受体（LDLR）突变所致。LDLR是一种细胞表面糖蛋白，通过受体介导的内吞作用特异性结合并内吞含载脂蛋白B100（ApoBl00）或载脂蛋白E（ApoE）的脂蛋白，可将约70％的低密度脂蛋白胆固醇（LD．LC）转入细胞。截至目前，世界范围内已报道了1000多种LDLR突变（http：／／www．ucl．ae．uk／fhandhttp：／／www．umd．necker．fr）。针对LDLR的突变，国外已采用突变体表达、流式细胞术及激光共聚焦（CLSM）等方法研究其致病机制。而国内大多局限于基因突变的检测，尚未开展致病机制的研究。深入研究FH发病机制对于寻找新的治疗靶点具有重耍意义．

靶向外显子捕获芯片制作及在家族性高胆固醇血症基因诊断中的应用

背景家族性高胆固醇血症（FH）是一类严重脂质代谢紊乱的单基因显性遗传性疾病，其主要致病基因有低密度脂蛋白受体（LDLR）、载脂蛋白B100（ApoBl00）、枯草溶菌素9（PCSK9）等六种致病基因。FH是早发冠心病的高危人群，早期明确诊断对于预防心血管病具有重要意义。由于缺乏高通量的筛查手段．在中国对于其基因诊断报道较少。北京安贞医院动脉硬化研究室与美国迈基诺公司共同研发FH致病基因靶向捕获芯片，结合二代测序不仅可检测患者已知6种基因突变位点，还可检测到血脂代谢相关基因的变异，对全面了解我国FH人群的遗传背景有重要意义。目的自行设计研制血脂代谢相关的基因靶向外显子捕获芯片，验证已知明确基因诊断的患者，证明该基因芯片的准确性。检测患者未知致病基因，选择基因诊断部分明确和未知的患者，明确诊断患者的未知基因突变，探讨基因芯片在我国FH基因诊断中的应用价值。方法（1）选择与血脂代谢相关的基因自行设计研制靶向外显子捕获芯片，以10例明确基因诊断的FH患者为对象，提取外周血DNA，

电镀法制取耐磨耐蚀复合材料的研究

讨论了镀液组成、工艺条件、添加剂用量以及热处理温度等对复合材料镀层物理、化学性能的影响。结果表明，复合材料镀层在镀态下是非晶态，当热处理温度达到４００℃时，镀层由非晶态转化为晶态；在镀液中加入少量的添加剂，能提高复合材料镀层的硬度、耐磨性和晶化温度；热处理温度对复合材料镀层的硬度和耐磨性有较大的影响，４００℃时，硬度和耐磨性达到最佳值；复合材料镀层的耐磨性是硬铬的１７倍，在腐蚀介质中的耐蚀性优于ＩＣｒ＿（１８）Ｎ＿（１９）Ｔｉ不锈钢。

低密度脂蛋白受体基因全长cDNA序列分析法检测1例家族性高胆固醇血症患儿基因突变

目的建立低密度脂蛋白受体(LDLR)基因全长cDNA序列分析方法并对1例家族性高胆固醇血症(FH)患儿进行基因检测。方法设计7对LDLR基因cDNA引物并验证;对1例临床诊断为FH的患儿进行家系调查和临床体检,提取外周血DNA和RNA,DNA扩增结合测序分析LDLR基因并找出其突变位点;RNA经PCR反转录为cDNA后扩增LDLR基因,将扩增产物进行正、反双向核苷酸序列分析,并与GenBank中LDLR基因的正常序列对比找出突变位点后与传统DNA测序方法结果比对。结果 LDLR基因全长cDNA序列分析方法检测LDLR基因为2 583个碱基,与标准序列完全一致;本例患儿确诊为"FH纯合子",cDNA测序结果与传统DNA测序结果相符,均为第2外显子终止突变和第6外显子点突变及框移突变。结论 LDLR基因全长cDNA序列分析法检测FH患儿突变,与传统DNA方法检测结果相符,可为FH的基因诊断提供新的方法依据。

家族性高胆固醇血症患者LDLR基因全长cDNA序列方法建立及应用

研究背景家族性高胆固醇血症（FH）是一种严重的常染色体显性单基因遗传性疾病，其主要特点为血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）水平极度升高、皮肤和肌腱黄色瘤、早发冠心病。FH的主要病理基础是LDLR基因突变，目前为止已报道有1000余种突变，2／3为点突变，1／3为内含子突变、移码突变、大片段插入或缺失。目前FH的基因诊断传统方法是采用逐-LDLR基因外显子DNA序列的方法，而有可能忽视或未发现同义突变和内含子突变，外显子和内含子的突变可能引起前信使RNA剪接缺陷，致使临床确诊的FH患者中仍有15％～30％检测不到突变。国外报道，直接分析患者全长cDNA序列有可能检测到一些基因组DNA检测不到的突变。由于受到mRNA取材及测序长度的限制。

左旋维C联合Q开关Nd:YAG激光1064 nm治疗更年期女性黄褐斑疗效观察

目的:分析左旋维C联合Q开关Nd:YAG 1064 nm激光治疗更年期女性黄褐斑患者的疗效。方法:选择2017年7月-2019年2月于笔者医院皮肤科诊治的86例女性更年期黄褐斑,随机分为对照组和观察组,每组43例。对照组采用Q开关Nd:YAG 1064 nm激光治疗,每个月治疗1次;观察组在对照组的基础上采用超声导入联合口服左旋维C治疗,超声导入1次/周,口服3次/天,3粒/次,两组均持续治疗6个月。比较两组患者治疗总有效率、治疗前后黄褐斑面积及颜色、激素水平和治疗后不良反应发生率。结果:观察组总有效率(93.02%)显著高于对照组(74.42%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清FSH、E2、LPO、MSH水平、黄褐斑面积及颜色评分较治疗前降低,且观察组降低程度较对照组更明显(P<0.05);血清SOD水平较治疗前升高,且观察组升高程度较对照组更高(P<0.05);观察组不良反应发生率(6.98%)低于对照组(25.58%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与单独使用Q开关Nd:YAG 1064 nm激光治疗更年期女性黄褐斑相比,联合左旋维C能显著减小患者黄褐斑面积、淡化黄褐斑颜色、调节患者内分泌状态,其疗效更好,安全性更高,值得临床推广使用。

一种金属陶瓷复合镀层的研究与应用

研究了电镀法制取Ｎｉ－Ｗ－Ｐ－ＳｉＣ金属陶瓷复合镀层的工艺。探讨了各种工艺参数及热处理对镀层的成份及物理化学性能的影响。热处理温度高达４００℃时，镀层由非晶态转化为晶态，硬度１７００Ｈｖ，磨损率为１．３５ｍｇ／ｋｍ，在多种腐蚀介质中耐蚀性均优于１Ｃｒ１８Ｎｉ９Ｔｉ不锈钢。

关于权利担保与善意取得

权利担保与善意取得是民商法上两项重要的法律制度;在货物买卖中,它们对买方利益的保护起着不可忽视的作用。但我国法律中,现在还没有这两项规定。

化学镀Ni-P合金在烟草机械上的应用

研究了在烟草机械零件上化学镀Ni-P合金的工艺及其镀层的性能,结果表明,热处理温度对镀层的硬度和耐磨性均有较大影响,二者经400℃,1h热处理后达到峰值。镀层在酸、碱,盐介质中的耐蚀性均优于不锈钢。铝合金上之化学镀Ni-P合金层比硬阳极氧化层有较优的性能。

政工师创新企业思想政治工作的意义与策略

随着经济和科技水平的快速发展，政工师创新企业思想政治工作具有重要作用，能统一员工思想并明确企业发展方向，提高企业广大员工的工作效率，推动企业发展和市场竞争力提高。但目前企业政工师在具体工作中，仍然存在一些不足，需要采取完善措施，结合新形势和新情况创新工作策略：提高服务意识、准确把握方向、创新工作方法，并坚持与时俱进，落实“两学一做”。