HIV-1p24蛋白在大肠肝菌中的高效可溶性表达、一步纯化及抗原性分析

合成引物扩增HIV 1p2 4基因 ,并将其克隆到 pQE 30质粒中 ,使其在大肠杆菌E .coliM 15中以IPTG诱导高效表达 ,经SDS PAGE分析 ,该表达产物约占菌体总蛋白 2 0 % ,并且以可溶蛋白的形式存在于细菌裂解液上清之中。经镍离子柱亲和层析一步纯化 ,洗脱产物中 p2 4蛋白纯度达95 %。ELISA分析表明 ,该蛋白可与HIV感染者血清发生特异性免疫反应。以此蛋白交联Sepharose 4B ,亲和层析纯化HIV感染者血清中的抗体 ,用所得抗体与HIV确认试剂反应 ,发现该纯化抗体仅与确认试剂中的 p2 4蛋白反应。上述结果表明在大肠杆菌中已经高效表达了可溶性HIV 1p2 4蛋白 。

上海、天津、太原三市部分农村人群HBsAg阳性者某些特征的比较研究

１９９３年７～１０月份，分别在上海郊区场北村、天津郊区北湖村、太原郊区西蒲村进行了一次ＨＢＶ感染的血清流行病学研究。三个村庄ＨＢｓＡｇ的年龄标化阳性率分别为６．２％、３．３％和４．９％，场北村最高。除此之外，场北村与北湖村和西蒲村相比，ＨＢｓＡｇ阳性者在其年龄、性别、ＨＢｓＡｇ阳性率、抗－ＨＢｅ阳性率等方面具有明显的差异；与１９８０年上海地区ＨＢＶ感染的血清学调查相比，场北村１０岁以下儿童ＨＢｓＡｇ的阳性率显著下降。分析认为，导致场北村ＨＢｓＡｇ阳性者出现这些特征的原因是由于近几年场北村儿童广泛接种了乙型肝炎疫苗。

脾内注射法免疫小鼠制备抗-HBc单克隆抗体的研究

用基因工程菌产乙型肝炎核心抗原(HBcAg)对 Balb/c 小鼠脾内多点注射法免疫,将该鼠的脾淋巴细胞与鼠骨髓瘤细胞在 PEG 作用下融合,用固相放射免疫分析法(SPRIA)筛选,成功地获得了2株抗-HBc 阳性的杂交瘤细胞株。通过中和试验和交叉鉴定,2株抗-HBc 单克隆抗体只能与 HBcAg 起反应,而不能与 HBsAg 和 HBeAg 反应。经多次亚克隆后,所得腹水中的抗-HBc 滴度达1:64000～1:28000。这2株单克隆抗体做包被抗体检测 HBcAg 和(125)~Ⅰ标记查患者血清标本时,所测得的结果与人抗-HBc 多克隆抗体做包被或(125)~Ⅰ标记所测得的结果相一致。2株杂交瘤细胞连续传代3个多月,冻存复苏后仍能稳定地分泌特异的抗-HBc 单克隆抗体。