中学音乐教学中奥尔夫教学法的应用

德国当代著名的作曲家、儿童音乐教育家奥尔夫提出了"节奏第一"的口号。在奥尔夫音乐教学的课堂上,学生运用身势律动提高兴趣,加强课堂互动,教师以更积极的方式实现自己的教学目标,让学生感受到音乐是美好的。"音乐离开了节奏,是根本不存在的。"课堂中渗透奥尔夫教学法,能培养学生的节奏感,让学生更有信心投入到学习中。奥尔夫音乐教学法训练音色表现力丰富、简便易学又易于找到代用品,比较适合教学器材相对匮乏的农村音乐课堂。

茅苍术AlCMK基因的克隆及原核表达分析

4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶[4-(cytidine-5′-diphospho)-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK]是生成萜类化合物MEP途径的关键酶之一。本研究以茅苍术转录组数据为依据,克隆获得CMK基因序列,命名为AlCMK(GenBank登录号为OM283293)。研究结果表明,AlCMK包含一个全长为1230 bp的开放阅读框(ORF),编码409个氨基酸,推测其相对分子质量为44752.53,蛋白理论等电点为6.67;跨膜结构分析表明其无跨膜结构,二级结构显示其主要由无规则卷曲(48.17%)结构组成;同源氨基酸序列分析表明,茅苍术与除虫菊、桂花、杜仲、忍冬、丹参CMK基因编码的氨基酸序列具有较高同源性;系统进化树分析表明,茅苍术AlCMK与菊科植物CMK蛋白亲缘关系较近;构建pET-32a-AlCMK原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达感受态,蛋白表达结果显示其分子质量约为65 kDa;利用qRT-PCR分析AlCMK基因在不同组织和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后的表达模式,同时采用ELISA试剂盒法测定茅苍术CMK酶活性,结果表明,不同产地茅苍术AlCMK基因具有组织表达差异性,且受外源MeJA诱导表达,酶活结果显示不同产地茅苍术CMK酶活性均在叶中较高;亚细胞定位显示该基因位于叶绿体中。本研究为进一步阐明茅苍术中萜类化合物合成途径AlCMK基因的生物学功能提供参考。