20(s)-原人参二醇对体外培养宫颈癌Siha细胞的增殖抑制作用及其机制

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养宫颈癌Siha细胞生长周期的作用及其对p53、p21及细胞周期素E(cyclin-E)基因转录和表达的影响,探讨PPD抑制Siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20μg·L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48h后流式细胞术检测细胞周期,Real time PCR和Western blotting法检测宫颈癌Siha细胞内p53、p21及cyclin-E mRNA及蛋白的表达情况。结果:与阴性对照组比较,20μg·L-1 PPD处理48h后,G0/G1期Siha细胞比例增加(P<0.01),G1期阻滞作用明显增强;Siha细胞中p53与p21mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.01),cyclin-E mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.01)。结论:PPD可抑制人宫颈癌Siha细胞增殖,其机制可能与上调p53、p21基因表达,下调cyclin-E基因表达有关。

郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用

目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量组(2.5g·kg-1)、郁金中剂量组(5.0g·kg-1)、郁金高剂量组(10.0g·kg-1)和阳性药组(甘利欣22.5mg·kg-1);连续给药7d后,除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,HE染色观察肝组织形态学变化;RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况;免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠肝指数明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠肝指数明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT增高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低(P<0.05)。肝脏形态学变化,肉眼观察,空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色,质软而富有弹性,模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色,表面可见散在点状及片状黄褐色斑点,质脆,各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间,且表面无明显黄褐色斑点;镜下观察,空白对照组小鼠肝脏结构正常,模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡,而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强(P<0.05);与模型组比较,郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱(P<0.05)。与模型组比较,郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论:郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用,其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。

20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达激活的影响

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20μg.L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48h后流式细胞仪检测细胞的凋亡峰,半定量RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学染色方法检测PPD处理后Siha细胞中caspase-9和caspase-3基因的转录与表达水平。结果:与阴性对照组比较,20μg.L-1 PPD处理48h后,Siha细胞凋亡率增加(P<0.05),Siha细胞中caspase-9与caspase-3转录水平升高(P<0.01),表达上调(P<0.01),caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量增加(P<0.01)。细胞免疫化学检测可见实验组细胞出现棕色颗粒。结论:PPD可促进人宫颈癌Siha细胞凋亡,其机制与激活caspase家族级联反应有关。

20(S)-原人参二醇对体外培养siha细胞自噬的影响

目的:观察20(S)-原人参二醇(PPD)对人子宫颈癌siha细胞生长的抑制作用及其对自噬基因Beclin1及MAP1-LC3转录和表达的影响,探讨PPD抑制siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌siha细胞分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40μmol·L-1顺铂)及PPD10、20和40μg·L-1组,分别用乙醇、顺铂和PPD处理细胞24、48、72和96h后,MTT法检测siha细胞增殖抑制率,RT-PCR、Western blotting及免疫细胞化学染色法观察各组siha细胞自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3的转录及蛋白表达情况。结果:与对照组比较,PPD10、20和40μg·L-1组细胞增殖抑制率明显增加(P<0.05),且随时间延长和剂量的增加而逐渐提高,自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3的转录水平及蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。结论:PPD可抑制体外培养siha细胞增殖,诱导siha细胞发生自噬。其机制可能与上调自噬相关基因Beclin1及MAP1-LC3表达有关。

人参二醇组皂苷对家兔急性酒精性心肌损伤的保护作用及其机制

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)对家兔酒精性心力衰竭的保护作用,阐明PDS保护心肌的作用机制。方法:15只健康家兔随机分为对照组、模型组和PDS组,每组5只。对照组家兔静脉滴注生理盐水0.2g·mL-1,模型组家兔恒速静脉滴注20%酒精(0.1g·kg-1·min-1),PDS组家兔静脉滴注酒精前给予PDS 0.025g·kg-1。心室内插管检测各组家兔的血流动力学变化;比色法检测家兔血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CKMB)水平,检测心肌组织匀浆中丙二醛(MDA)水平、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果:与对照组比较,模型组家兔左心室内舒张末期压(LVEDP)在开始记录30min时显著降低(P<0.05),血清LDH、CK和CKMB水平升高(P<0.05),心肌组织匀浆中MDA水平升高(P<0.05),T-SOD、GSH-Px和CAT活性下降(P<0.05);与模型组比较,PDS组家兔LVEDP显著升高,血清LDH、CK及CKMB水平下降(P<0.05),心肌组织匀浆中MDA水平下降(P<0.05),T-SOD、GSH-Px及CAT活性升高(P<0.05)。结论:PDS对家兔急性酒精性心力衰竭具有保护作用,其作用机制可能与改善心肌过氧化损伤有关。

20(s)-原人参二醇对体外培养的人前列腺癌PC3细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养的人前列腺癌(PCa)PC3细胞凋亡的作用,阐明其抗肿瘤作用机制。方法:将体外培养的PC3细胞分为对照组及20、30和40μmol.L-1 PPD组。采用PPD处理细胞48h后,利用光学显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞增殖抑制情况,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡情况,并通过Western blotting方法检测Bcl-2、Bax和γH2Ax蛋白的表达情况。结果:不同剂量PPD处理后,PC3细胞变圆回缩并出现碎片,AO/EB染色呈现不同程度的黄绿色;不同剂量PPD作用后,各组细胞增殖抑制率均显著升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同剂量PPD作用PC3细胞48h后,Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05),Bax蛋白表达变化不明显,γH2Ax蛋白表达上调(P<0.05)。结论:PPD可诱导PC3细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2、Bax信号通路以及DNA断裂基因γH2Ax蛋白表达上调有关。

儿童寰枢关节半脱位非手术治疗分析

目的:通过对寰枢椎半脱位患者临床资料的分析和研究,探讨小儿寰枢椎关节半脱位的治疗和预后。方法:10例症状较轻者经单纯的颈项固定,另外30例入院即用牵引复位。结果:10例症状较轻经单纯的颈领固定,1周后治疗有效3例,无效7例,随后此7例采用卧床牵引1周后基本痊愈。30例入院即用牵引复位有效28例,无效2例,此30例中就诊时间<1周者21例(其中18例牵引<5 d,3例>5 d)。两种治疗效果差异有统计学意义(P<0.05);就诊时间与牵引时间之间有相关关系。结论:无论寰枢椎半脱位的临床表现和X线表现轻重与否,牵引复位固定治疗是最有效的治疗方法。较轻患者的单纯颈领固定会耽误患者病情,影响预后。寰枢椎半脱位就诊时间越早,治疗效果越好。

论绿色壁垒对我国经济发展的关系

绿色壁垒是经济全球化背景下产生的，是西方发达国家对进口产品进行限制的方式。本文从绿色壁垒的概念及特征出发，从积极和消极两方面剖析其对我国经济发展的影响。

高中生数学表达能力的培养方法

随着高中数学学科新课程改革标准的深入实施,对于教师们的教学理念、教学要求等方面,已经发生了与时俱进的变化;而对于学生的学习要求和效率也就越高了。对于高中阶段的我们来讲,高中是我们身心发展的一个重要阶段,我们在刚刚进入高中之后,思维发展水平还不足以适应数学学习的需求。而我们高中生对于数学语言表达能力的培养也相当的重视,这也是我们的一项重要的学习任务。由于高中阶段,我们学习的时间比较短,但是内容却比较多,而且对我们的要求比较高,就很少有教师重视教学过程中数学语言的培养。本文主要针对高中生表达能力存在的缺憾,提出相应的的改进建议。