雷公藤红素激活AMPK信号通路抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用研究

目的:研究雷公藤红素(celastrol,Cel)抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用并探讨其作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0.5,1,2.5,5,10,25,50μmol·L^(-1))Cel抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用;流式细胞术检测不同浓度(1,2.5,5μmol·L^(-1))Cel对肝癌HepG2细胞周期分布的影响;Western blot法检测Cel对肝癌HepG2细胞中周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、周期素A2抗体(Cyclin A2)等增殖相关蛋白和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα,Thr172)、固醇调节元件结合蛋白^(-1)(SREBP^(-1))、脂肪酸合酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)等脂代谢相关蛋白表达的影响;在蛋白激酶B(Akt)/原癌基因c-Met过表达肝癌HepG2细胞中运用AMPK抑制剂Dorsomorphin(Compound C)干预,确证Cel抑制肝癌HepG2细胞增殖的机制。结果:Cel对肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用,且具有剂量-时间依赖效应;与对照组比较,不同浓度(1,2.5,5μmol·L^(-1))Cel能够阻滞肝癌HepG2细胞周期于S期,并显著降低CDK2、Cyclin A2等细胞周期调控蛋白表达水平;同时,Cel能够升高p-AMPKα(Thr172)蛋白表达水平,降低SREBP^(-1)、FASN、ACC等脂代谢关键蛋白的表达水平;在Akt/c-Met过表达肝癌HepG2细胞中,Cel同样能够激活p-AMPKα(Thr172)并降低SREBP^(-1)、FASN、ACC、CDK2、Cyclin A2等脂代谢与增殖相关蛋白的表达水平,但是运用AMPK抑制剂干预后能够逆转Cel对HepG2细胞脂代谢及增殖相关蛋白表达的影响。结论:Cel可能通过激活AMPK信号通路抑制脂代谢及增殖信号活化从而抑制肝癌HepG2细胞增殖。

肝癌进展的自噬机制及中药活性成分调控研究进展

肝癌是临床常见的高致死率恶性肿瘤,目前虽在肝癌的诊断和治疗上取得了较大进展,但仍存在患者预后不佳等问题。近年来研究表明,中药活性成分在肝癌的治疗中发挥积极作用,其机制可能与中药活性成分靶向调节细胞自噬有关。自噬作为细胞分解代谢途径之一,通过溶酶体降解细胞内潜在的有害物质,发挥保护细胞内环境稳态作用,是防治肝癌研究领域的热点问题。大量研究表明,中药活性成分可通过靶向细胞自噬途径诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞侵袭与转移、降低肝癌细胞耐药性。中药活性成分来源广泛,积极探寻在肝癌进展过程中具有调控细胞自噬作用的中药活性成分,对肝癌预防和治疗具有一定的应用前景及重要的科学意义。本文对近年来国内外研究现状进行分析,综述了中药活性成分调控自噬防治肝癌的临床前研究进展,以期为开发潜在的抗肝癌创新中药提供参考。